不同类型疫苗的交替
❖ 初免和加强免疫策略已在多种疫苗实验中证 实可更有效地诱生免疫应答，因此被认为可 最大限度发挥治疗性疫苗的治疗作用。常见 的策略是先以基因疫苗予以初免，再以蛋白 质疫苗或痘病毒活疫苗等予以加强，其机制 可能是联合了基因疫苗的低水平表达、长效 和蛋白疫苗的强抗原性功能。
新型佐剂的辅助作用
❖ 用细胞因子或细胞因子基因作用作为佐剂的疫苗虽 然能提高外源性病毒、细菌的免疫原性,但可能引起 被免疫的机体产生免疫耐受性。DNA 疫苗的作用效 果一直是研究人员关注的主要问题，开发此类疫苗 必须用高敏感的 PCR 技术证实所注射的 DNA 疫苗 不与宿主基因组整合。
治疗性疫苗的机制
❖ 治疗性疫苗通过不同途径把微生物抗原提呈 给免疫系统,来弥补或激发机体的免疫反应(特 别是细胞毒性 T 细胞,CTL 的杀伤活性) 从而 达到清除病毒的治疗作用
➢以细胞为组成的疫苗是肿瘤治疗性疫苗设计的热点， 主要有肿瘤细胞和树突状细胞(DC) 疫苗。
➢肿瘤细胞中包含着广谱的肿瘤抗原，但缺乏协同刺 激分子以有效识别和激活免疫细胞。若以各种辅助 分子修饰肿瘤细胞或DC，可增强其免疫原性,达到治 疗目的。修饰可发生于多环节上，如偶联表达、共 构建、质粒转染、共注射等。
❖ 有目的地在多水平上对疫苗进行基因修饰，可增强疫苗的免 疫原性、增强对疫苗抗原的呈递及激活特异性免疫应答，大 部分新型治疗性疫苗的设计均不同程度地进行了基因修饰： 如基因疫苗中辅助基因共同构建于抗原所在载体或其他质粒 载体而进行了基因修饰；肿瘤DC疫苗在体外抗原致敏培养 中导入多种细胞因子基因；多肽疫苗辅以辅助因子基因疫苗 注射等；基因修饰为治疗性疫苗补充诱生免疫应答所必需的 协同刺激分子、细胞因子和趋化因子，使特异性免疫应答有 效激活，同时产生定向的免疫偏离，诱生特异性抗体和免疫 应答；对基因疫苗而言，基因修饰可在系列环节中增强靶基 因的翻译表达、处理呈递和诱生特异性免疫。
❖ 疫苗靶抗原的改造和组合 ❖ 以抗原表位为基础的疫苗设计 ❖ 模拟天然病原体感染 ❖ 多水平基因修饰 ❖ 不同类型疫苗的交替 ❖ 新型佐剂的辅助作用 ❖ 疫苗和基因治疗的联合应用 ❖ 疫苗设计策略的核心
疫苗靶抗原的改造和组合
❖ 对于蛋白质靶抗原，可在蛋白水平进行多种修饰或 重组，还可与其他辅助分子如多肽、脂质或小分子 物质组合成为免疫原性增强或有利于摄入的复合物
治疗性疫苗的机制
❖ 总之，治疗性疫苗旨在打破机体的免疫耐受 ，提高机体的免疫应答。是通过改善和增强 对疫苗靶抗原的摄入、表达、处理、呈递和 激活免疫应答,从根本上重新唤起机体对靶抗 原的免疫应答能力。它能在已患病个体诱导 特异性免疫应答,清除病原体或异常细胞,使疾 病得以治愈。
五、治疗性疫苗分子设计的基本策略
治疗性疫苗的机制
❖ 还有一种说法是机体接受治疗性疫苗后,刺激 TPB 细胞增殖,激活巨噬细胞,促进 NK 细胞 杀伤肿瘤细胞,从而发挥免疫增强作用。例如 卡介苗治疗肿瘤，就是通过增强机体免疫系 统对肿瘤细胞的杀伤作用而辅助治疗肿瘤， 使患者的免疫系统在对新的基因重组体产生 反应的同时, 也同时排斥打击自身类似的病原 ,从而达到治疗效果。
一、治疗性疫苗的简介
（三） 发展基础
1．微生物的持续性感染日益受到重视 ➢在控制微生物所致的持续性感染中，为达到杀灭或 抑制宿主体内微生物的目的，除采用抗微生物药物 外，提高机体免疫应答也已受到关注。 ➢虽然被动输入免疫细胞或抗体有短暂的抗微生物或 其产物的作用，但对于持续性感染，更受重视的是
用治疗性疫苗通过主动免疫诱生机体免疫应答。
治疗性疫苗
主要内容
❖ 一、治疗性疫苗的简介 ❖ 二、治疗性疫苗的分类 ❖ 三、治疗性疫苗的组成特性 ❖ 四、影响治疗性疫苗效果的因素及其机制 ❖ 五、治疗性疫苗分子设计的基本策略 ❖ 六、乙肝疫苗 ❖ 七、结核病疫苗
一、治疗性疫苗的简介
❖（一）概念
❖ 治疗性疫苗，是指在已感染病 原微生物或已患有某些疾病的 机体中，通过诱导特异性的免 疫应答，达到治疗或防止疾病 恶化的天然、人工合成或用基
➢ 短小棒状杆菌(革兰阳性杆菌)以及其他的一些细 菌均曾被用作非特异的治疗性疫苗。
二、治疗性疫苗的分类
根据所用免疫原的种类，可分为： 1. 核酸型治疗疫苗 2. 重组蛋白型治疗疫苗 3. 天然蛋白型治疗疫苗 4. 免疫复合物型治疗疫苗 5. 嵌合型治疗疫苗
三、治疗性疫苗的组成特性
1. 蛋白质复合重构的治疗性疫苗 2. 基因疫苗（核酸疫苗） 3. 多水平基因修饰细胞疫苗
转基因肿瘤细胞 疫苗
抗原合成肽疫苗
肿瘤核酸疫苗
自身免疫疾病 型免疫治疗性
疫苗
多发性硬化症治 疗性疫苗
重症肌无力治疗 性疫苗
系统性红斑狼疮 治疗性疫苗
I型糖尿病治疗性 疫苗
9
二、治疗性疫苗的分类
根据治疗性疫苗的作用机制，可分为：
1. 特异性治疗性疫苗 2. 非特异性治疗性疫苗
➢ 卡介苗主要用于非特异地提高机体的细胞免疫， 但作用较弱而被用作一种协同治疗，联合用于肿 瘤病人。
根据针对感染疾病种类的不同，可分为：
种类
举例
细菌型治疗性 疫苗
结核杆菌治疗 性疫苗
麻风杆菌治疗 性疫苗
幽门螺旋杆菌 治疗性疫苗
Байду номын сангаас
病毒型治疗性 疫苗
单纯疱疹治疗性 疫苗
人类免疫缺陷病 毒(HIV)感染治 疗性疫苗
人类乳头状瘤病 毒感染治疗性疫 苗
肿瘤型治疗性 疫苗
以肿瘤细胞为基 础的第一代疫苗 和树突细胞痘苗
一、治疗性疫苗的简介
➢ 在细菌方面，已有用麻风菌素治疗麻风菌感染、 用布氏杆菌素治疗布氏菌感染、用灭活的自身菌 疫苗治疗金黄色葡萄球菌皮肤反复感染等。
➢ 此外，还研制了针对自身免疫病、肿瘤等的治疗 性疫苗。
➢ 目前，治疗性疫苗主要应用于尚无有效治疗药物 的疾病，如肿瘤、自身免疫病、慢性感染、移植 排斥，超敏反应等。
对于蛋白质疫苗而言，可从以下几方面进行改造 1.在蛋白质水平上修饰：脂蛋白化 2.在结构或构型上改造：固定化、交联、结构外显 及构象限定及 3.在组合上可有多蛋白的复合及多肽偶联： ➢HBV (PAM)2 – HTL – Tc 多肽治疗性疫苗：多肽偶 联和多肽氨基端软脂酸化 ➢抗原 – 抗体复合物治疗性疫苗：两种蛋白组合为 一体
模拟天然病原体感染
❖ 治疗性疫苗如能模拟病原体的天然感染过程 ，则在更接近自然的情况下有可能获得对病 原体的天然免疫力。基因疫苗及重组DNA痘 病毒疫苗可在注射或感染局部于一段时间内 表达具天然构象的编码靶抗原，并具有天然 抗原的MHCⅠ或Ⅱ类呈递过程，因此可诱生 良好的特异性抗体和免疫应答。
多水平基因修饰
因重组技术表达的产品或制品。
一、治疗性疫苗的简介
（二）治疗性疫苗的应用
➢ 最早被应用的治疗性疫苗是巴 斯德于1885年所用的狂犬病疫 苗。用该疫苗免疫被狂犬咬伤 但尚未发病的患者，可以防止 发生致死性的疾病。反复多次 注射狂犬疫苗，通过诱生机体 的免疫应答可有效地阻止病毒 进入中枢神经系统，达到治疗 效果。
❖ 对于基因形式的靶抗原，可在其基因序列中取出抑 制性序列或增添有助于基因转录、翻译和表达的元 件，可与其他抗原或辅助因子基因相互偶联，也可 与其他蛋白、脂质、小分子结合
❖ 对于肿瘤细胞抗原可进行包括转基因、添加佐剂等 多种方式的改造
以抗原表位为基础的疫苗设计
❖ 抗原表位是抗原诱生特异性免疫应答的最小 的结构和功能单位，包括有B细胞抗原表位、 Th表位和Tc表位。由于不同类型免疫应答的 下调、缺乏及紊乱是许多及疾病的病因，因 此以抗原表位为基础的几秒设计日益受到重 视，包括多肽疫苗和以表位为基础的基因疫 苗及多表位疫苗等。
一、治疗性疫苗的简介
（三） 发展基础
2．基因重组技术的发展与应用 ➢目前基因重组与表达技术已日趋成熟，提供了用于 发展治疗性疫苗的组分。各种抗原成分的组合、拼 接或用微生物抗原基因与不同细胞因子基因组成表 达嵌合性蛋白，或使表达蛋白与药物交联的治疗性 疫苗为开发治疗性疫苗提供了广阔的前景。
7
一、治疗性疫苗的简介
2.基因疫苗(核酸疫苗)
❖ 基因疫苗具有诸多优点: ① 体内表达抗原使其在空间构象、抗原性上更接近于
天然抗原； ② 可模拟体内感染过程及天然抗原的MHC Ⅰ和MHC
Ⅱ的呈递过程； ③ 可诱生抗体和特异性CTL 应答； ④ 便于在基因水平上操作和改造； ⑤ 生产周期短，经济实用。
3.多水平基因修饰细胞疫苗
疫苗设计策略的核心
❖ 治疗性疫苗的关键在于疫苗的设计.更加有效 的疫苗免疫策略的核心包含有助于清除病毒 的抗原、增大剂量、含有能够有效活化天然 免疫和后天免疫系统的佐剂或免疫调节剂、 与抗病毒治疗联合应用、选择合适的患者(病 毒载量最好不要太高)。
六、治疗性乙肝疫苗
❖ 乙型病毒性肝炎的概念 ❖ 慢性病毒性肝炎的危害 ❖ 治疗性乙肝疫苗及其病理 ❖ 治疗性乙肝疫苗的研制
2.基因疫苗(核酸疫苗)
➢是20世纪90年代发展起 来的一种新型疫苗，使抗 原以基因形式呈现。
➢基因疫苗包括： ➢DNA疫苗和RNA疫苗
2.基因疫苗(核酸疫苗)
基本原理： ➢通过将编码抗原的质粒 直接导入机体组织，常见 肌肉、皮下和脾，在注射 局部表达该抗原，经加工 后形成的多肽抗原可与宿 主细胞MHCI类和MHCⅡ类分 子结合，并被提呈给宿主 的免疫识别系统，从而诱 生抗原特异性体液和细胞 免疫应答。
❖ 编码细胞因子或区划因子的基因载体可作为 一种新型的“分子佐剂”，与治疗性疫苗共 同免疫，提供必需的协同刺激分子，并调节 免疫应答的偏向和平衡。
❖ B.Mulot等以IL-18分子佐剂与HIV-1Nef基因疫 苗共同经皮内免疫，以蛋白疫苗加强，发现 可使免疫应答向Th1型转化。
疫苗和基因治疗的联合应用