药理学实验报告
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元胡止痛片对小鼠镇痛抗炎镇痛活性研究
组员:指导老师:
摘要:目的:研究元胡止痛片是否具有镇痛抗炎的效果。
方法:使用小鼠热板法、醋酸扭体法、耳肿胀法,并分别建立小鼠的镇痛抗炎模型,观察元胡止痛片对小鼠的镇痛抗炎作用的影响。
结果:1.热板法:元胡止痛片对小鼠热板法实验中给药60分钟后有显著性差异,阳性药阿司匹林与生理盐水组相比有明显的痛阈降低,低浓度与生理盐水组相比有痛阈降低。
2. 醋酸扭体法:实验结果有显著差异,阿司匹林阳性药与高浓度元胡溶液相比有显著性差异,阳性药有明显的镇痛作用。
而阿司匹林组与生理盐水,低浓度与生理盐水组没有出现显著性差异。
3. 热肿胀法:结果显示无显著性差异,阳性药阿司匹林没有明显的抗炎活性。
结论:阿司匹林阳性药有抗炎镇痛作用,元胡止痛片无抗炎镇痛作用。
关键词:元胡止痛片;镇痛;抗炎;热板法;醋酸扭体法;耳肿胀法
元胡止痛片为中药复方制剂,由延胡索(醋制)、白芷等中药组成,延胡索(醋制)具辛、苦、温,归肝脾经,由活血、理气、止痛等功效;白芷辛温,归胃、大肠、肺经,其功能与主治为散风除湿、通窍止痛、消肿排脓。
该制剂为中国药典方,临床上用于气滞血淤的胃痛、胁痛、头痛及月经痛等。
由于直肠给药50%以上的药物可以不通过肝脏而直接进入血液作用于全身,可避免口服引起的胃肠道刺激,同时减少。
胃液和肝脏对药物的破坏和降解,从而提高药效减轻药物的不良反应。
另外,直肠给药药物吸收缓慢,可使药效维持较长的时间。
本实验旨在对元胡止痛栓的镇痛抗炎作用的研究。
1 材料与方法
1.1 动物健康昆明种小白鼠,体重25±8g,雌性32只,雄性32只。
健康昆明种小白鼠,体重40±10g,雄性,32只。
1.2 药品与试剂元胡止痛片,广西半宙天龙制药有限公司,批号130807;0.9%氯化钠注射液,新疆华世丹药业股份有限公司,批号214070702;阿司匹林肠溶片,临汾宝珠制药有限公司,批号140401;二甲苯,天津市富宇精细化工有限公司,批号120411;冰乙酸,天津市光复科技发展有限公司,批号090527。
1.3 仪器YLS-6B智能热板仪,淮北正华生物仪器设备有限公司,出厂日期071018;天孚牌JYT-5架盘药物天平,生产日期2011年8月;YLS-25A电动耳肿打耳器,济南益延科技发展有限公司,出厂日期20140521;电子天平。
2 实验内容
2.1 热板法
2.1.1 动物筛选致痛潜伏期(痛阈值)为5~45s 之间的合格雌性小鼠。
32只,热板法镇痛
试验,筛选痛阈值合格的小鼠,取♀小鼠于给药前先用热板仪于55 ±0.5 ℃分别测定每只小鼠的正常痛阈值[将小鼠放于智能热板仪上至出现舔后足的所需时间作为痛阈值( s) ,连续2次,间隔30 s,测定平均值即为正常痛阈值]。
将舔后足时间<5 s 或>45s,或跳跃者不用于此实验。
2.1.2 分组按体重随机分组,分4组,编号,每组8只。
2.1.3 给药1组生理盐水空白对照组(按0.1mg/10g灌胃生理盐水),2组阿司匹林阳性对照组(按4mg/10g灌胃20mg/ml的阿司匹林),3组元胡止痛片低剂量组(按0.6mg/10g
灌胃2mg/ml的元胡止痛片溶液),4组元胡止痛片高剂量组(按1.3mg/10g灌胃10mg/ml 的元胡止痛片溶液)。
2.1.4 测定痛阈值各鼠给药前测定正常痛阈值。
取智能热板仪,调节温度,使温度恒定在55±0.5℃,取每组合格雌性小鼠,按2.1.2灌胃不同药液,测定给药后每组15、30、60、
90分钟后各鼠痛阈值。
2.1.5 痛阈提高百分率
2.2 耳肿胀法
2.2.1 分组 取雄性小鼠25±8g ,32只,随机分为4组,编号,每组8只。
2.2.2 给药 1组生理盐水空白对照组(按0.1mg/10g 灌胃生理盐水),2组阿司匹林阳性对照组(按4mg/10g 灌胃20mg/ml 的阿司匹林),3组元胡止痛片低剂量组(按0.6mg/10g 灌胃2mg/ml 的元胡止痛片溶液),4组元胡止痛片高剂量组(按1.3mg/10g 灌胃10mg/ml 的元胡止痛片溶液)。
2.2.3 测量 每组给药30分钟后,给小鼠的右耳前后涂上二甲苯0.1ml/只,30分钟后处死小鼠,沿耳廓对称剪下两只耳壳,用YLS-25A 电动耳肿打耳器取耳片,称重,以两耳重量差计算肿胀度。
2.2.4 计算肿胀率
肿胀率(%)=[右耳片重(mg)-左耳片重(mg)]/左耳片重(mg)×100% 2.3 醋酸扭体法
2.3.1 分组 取雄性小鼠40±10g ,32只,随机分为4组,编号,每组8只。
2.2.2 给药 1组生理盐水空白对照组(按0.1mg/10g 灌胃生理盐水),2组阿司匹林阳性对照组(按4mg/10g 灌胃20mg/ml 的阿司匹林),3组元胡止痛片低剂量组(按0.6mg/10g 灌胃2mg/ml 的元胡止痛片溶液),4组元胡止痛片高剂量组(按1.3mg/10g 灌胃10mg/ml 的元胡止痛片溶液)。
给药1h 后给每组小鼠按0.1ml/10g 腹腔注射0.6%的醋酸(临用前新鲜配制)。
2.2.3 观察 5min 后记录15分钟内各小鼠出现“扭体反应”的次数。
3 结果
3.1热板法 表1 元胡止痛片对小鼠的痛阈影响(x S ,n=8)
**,60分钟时各组出现显著差异,p<0.01
组别 给药剂量mg/10g 给药15min 后(s ) 给药30min 后(s ) 给药60min 后
(s )** 给药90min 后(s )
生理盐水空白对
照组 0.1
24.68 ±12.90
29.52 ± 19.42 23.61 ± 1.28 37.82 ±22.01
阿司匹林阳性药
对照组 4 18.75 ±17.10
21.75 ±15.26 15.76± 2.76* 23.81± 19.66
低浓度元胡止痛
片对照组 0.6 16.64±6.38
16.54± 9.85
14.90±2.77* 30.72± 16.10 高浓度元胡止痛
片对照组
1.3
19.17±6.43
20.96±8.69
18.73±3.81
23.85±18.25
痛阈提高百分率=
用药后平均热痛阈值—用药前平均痛阈
用药前平均痛阈值
* 100%
*,1生理盐水空白对照组vs 2阿司匹林阳性对照组,p<0.05
*,1生理盐水空白对照组vs 3低浓度元胡溶液组,p<0.05
图1元胡止痛片给药60分钟后对小鼠热板法实验的镇痛作用的影响3.2耳肿胀法
表3 元胡止痛片对小鼠的抗炎作用(x S,n=8)
组别给药剂量mg/10g肿胀率(%)生理盐水空白对照组0.162±33 阿司匹林阳性药对照组467±46 低浓度元胡止痛片对照组0.672±32 高浓度元胡止痛片对照组 1.364± 50
图2 元胡止痛片对小鼠耳肿胀实验抗炎作用的影响
3.2醋酸扭体法
表2 元胡止痛片对小鼠的镇痛作用(x S,n=8)组别给药剂量mg/10g扭体次数* 生理盐水空白对照组0.115±18
阿司匹林阳性药对照组42±3^
低浓度元胡止痛片对照组0.620±19 高浓度元胡止痛片对照组 1.333±24
*,小鼠镇痛作用出现显著差异,p<0.05
^, 2阿司匹林阳性对照组vs 4高浓度元胡溶液组,p<0.05
图3 元胡止痛片对小鼠扭体实验的镇痛作用影响
4.结果分析讨论
参考文献:
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