检验技术操作规程目录一、全自动血液细胞分析仪操作规程-------------------1二、尿液分析仪使用规程-----------------------------4三、自动凝血仪操作规程-----------------------------6四、半自动生化分析仪操作规程-----------------------8五、血常规检验操作规程-----------------------------9六、尿常规检验操作规程----------------------------11七、肝功能检验操作规程----------------------------12八、肾功能检验操作规程----------------------------14九、血脂检验操作规程------------------------------18十、血液葡萄糖测定技术操作规程--------------------24十一、凝血四项检验操作规程------------------------26十二、AB0血型正反血型鉴定技术操作规程-------------28一、全自动血液细胞分析仪操作规程1.样品分析前准备1.开机前的检查准备2．在开启分析仪电源之前操作者须按以下要求进行检查3.释液清洗液溶血素是否充足有无过期试剂管路是否弯折连接是否可靠4.电源线是否正确连接5.废液桶是否清空6.UPS电是否足够打印纸安装是否正确是否足够7.确保键盘正确连接到键盘接口上8.打开分析仪后面的电源开关电源指示灯亮屏幕上显示Initializing9.分析仪进行初始化整个初始化过程持续约4～7分钟10.初始化过程结束后系统自动进入计数界面2.动物类型选择1.按[菜单]键移动光标选择动物按[确认]进入动物界面2.操作者根据测量的动物类型选择需要分析的动物类型3.按[菜单]键选择计数进入计数界面再按[模式]键将当前模式设置为全血模式4.确认状态指示区的计数状态为就绪工作模式为全血5.将准备好的全血样本放到采样针下使采样针可以吸到样本且针头与容器底保持一定距离6.按计数键启动样本分析过程此时状态指示区的计数状态为运行7.采样针自动吸取13ul的样本后蜂鸣器响在采样针抬起后移开样本8.分析完成后按[F4]键进入样本信息编辑界面按[F9]键进入汉字状态在汉字状态下按[F8]键在全拼和五笔输入法之间进行切换输入样本信息输入完成后点击确认保存输入的内容并返回到计数界面9.按[打印]键打印样本分析报告10.按照此操作过程进行其余样本的分析3. 预稀释样本分析1.按[菜单]键选择计数进入计数界面再按[模式]键将当前模式设置为预稀释模式按[稀释]键屏幕弹出加稀释液对话框取一个干净的样本杯放在采样针下按计数键微倾斜样本杯一定角度让分析仪自动排出的16ml稀释液沿管壁流入样本杯中避免产生气泡或溅出2.加完稀释液后按[确认]键加稀释液对话框关闭分析仪自动清洗采样针3.采集20ul血液迅速注入盛有稀释液的样本杯中混匀4.确认状态指示区的计数状态为就绪工作模式为预稀释5.好的预稀释样本放到采样针下使采样针可以吸到样本且针头与容器底保持一定距离6.按计数键启动样本分析过程此时状态指示区的计数状态为运行7.采样针自动吸取07ml的样本后蜂鸣器响在采样针抬起后移开样本8.成后按[F4]键进入样本信息编辑界面按[F9]键进入汉字状态在汉字状态下按[F8]键在全拼和五笔输入法之间进行切换输入样本信息输入完成后点击确认保存输入的内容并返回到计数界面9.[打印]键打印样本分析报告10.此操作过程进行其余样本的分析4.样品分析结束后1.按[菜单]键弹出系统菜单选择关机2.界面弹出关机对话框点击确认进入关机界面3.将E-Z清洗液放到采样针下按计数键采样针将自动吸取E-Z清洗液执行液路和计数池的清洗4.按照界面提示信息将E-Z清洗液放到采样针下按计数键采样针将再次自动吸取E-Z清洗液执行液路和计数池的清洗5.执行完成后界面提示请关闭电源是关闭分析仪的电源开关6.关闭电源后检查分析仪是否有渗漏并将血液分析仪的周边环境打扫干净二、尿液分析仪使用规程本测试仪是一项精密仪器为了更好的维护和使用本仪器必须遵照以下操作规程1.操作步骤1.尿液分析仪的通讯电缆与电脑背面的通讯端口相连接通电源先打开电脑再打开分析仪仪器启动风扇转动推进器移动屏幕显示系统正在测试此时系统正在自检显示屏显示主菜单工作台检条区有红色光交替闪烁用户可以开始测试2.点击电脑桌面尿液分析软件3.将试纸条的试剂区完全浸入新鲜的充分混合的未离心的样本中立即取出将试纸条的侧边沿尿样容器的管壁刮去多余尿液4.将蘸有尿液的试纸平放在工作台的检条区确保试纸同工作台前壁接触5.仪器检测到试纸存在后推进器将试纸推到测试区进行测试6.当推进器退回原位放下一条试纸这样实现连续测试7.当工作台上所有的试纸条测试完毕打印结果输出结束后按菜单键进入仪器设置将电源开关拨到断○位置关闭仪器电源二.仪器维护1.不要在仪器通电状态下清洁仪器2.不要用汽油油漆稀释剂苯化合物等可能腐蚀仪器的有机溶剂擦拭仪器3.不要用水清洗液晶屏不要用任何会擦伤工作台和白基准的物质擦拭工作台4.不要用任何溶剂清洁白基准如果白基准有明显划痕或损坏请与供应商联系5.用柔软干布或沾有温和去污剂的软布擦拭仪器保持仪器清洁6.用柔软无磨损的布擦拭液晶屏7.为使仪器正常运行并提供准确的测试结果必须定期从仪器中取下推进器工作台步进板用清水冲洗用软布依次擦干保持工作台的清洁三.注意事项1.测试时不要将仪器放置在阳光直射的地方以免影响测试精度2.请在测试前核对尿液分析试纸型号避免因使用的尿液分析试纸型号不正确而导致测试结果错误3.请勿使用过有效期或变质的尿液分析试纸4.尿样本中血的浓度高时可影响测试的准确性仪器能够识别出高浓度血尿并打印出结果无效的提示5.必须在推进器动作前将待测试纸条放好6.在放置试纸条时应确保试纸条前端接触工作台前壁7.如果仪器测试头下发生故障导致纸条运行受阻关掉仪器拉出工作台取出受阻试纸条后重新安装工作台开机自检后对未得出结果的样本重测三、自动凝血仪操作规程1.仪器的常规操作1.打开电源开关前的检查2.检查废液瓶及洗液瓶如果洗液瓶中洗液的液面过低请用蒸馏水或去离子水将罐充满清空废液瓶3.管道连接：检查各种管线的连接确保没有管子脱落或扭结电源线被安全的插入交流插座确保打印机中有足够的纸张以供打印当天所需处理的所有样本结果4.补充反应杯丢弃用过的反应杯加入适量的干净的反应杯2.打开电源1.开机顺序打印机→压力单元→电源单元和主单元右侧2.打开电源后仪器自动进入自检3.将病人样本质控与试剂分别按要求准备就绪进入分析过程4.试剂准备→Set Reagent →输入确认试剂体积→补充反应杯→安放样本架3.样本分析1.Work List → ID NoEntry →输入样本号→ ENTER →选择所需检测的项目－变为○确认所有的设置结束后→ ENTER →按屏幕右上方Start键执行分析2.分析完毕仪器进入准备状态4.关机前的工作1.每日清洁所有样本针和试剂针2.在主菜单屏上按下Rinse probe键将出现清洗针屏按下Excute键5.关机1.关闭电源6.仪器保养1.每日保养2.清洗样品针3.每次做完试验都必须清洗样品针主要是预防堵针执行[RinseProbe]→[Excute]4.清空垃圾箱7.清空废液1.查看仪器后面防逆流瓶Trap Chamber有无水防止因为有水而导致真空泵不能抽真空2.在洗液瓶中注蒸馏水最高不要超过上面的凹槽防止因水过满工作时水回流到压力泵和压力传感器上导致人为破坏8.每周保养1.做一次管路清洁执行[Special Operate] →[RinsePrepare]清洁仪器9.每半年保养1.清洗洗液瓶内部清洗洗液瓶出水管上的过滤网一次10.每三或六个月保养1.清洁传动滑轨 X轴Y轴并上润滑油防止因积尘而使样品针运行不到位向下扎错位置造成样品针弯曲或断裂四、全自动生化分析仪操作规程1.操作规程1.开机之前检查电源线是否连接无误电源要求接地良好连接打印机电源线接通打印机电源开关将废液管插入废液容器内接通显示器开关及主机背部电源开关2.开机→自检后→键入Enter确定已设定测试参数→键入Enter进入编制工作表→在设置栏开启联机打印→仪器预热20分钟后调用已设定测试项目进行样品测定→打印结果→清洗仪器→关机3.吸液口由不锈钢保护管和钢管内聚四氟乙烯吸液管组成应注意保护不要碰弯4.切忌在带电状态下连接任何连接口2.仪器的保养与维护1.日常保养工作主要是清洗流动比色皿每天工作结束后要用蒸馏水清洗具体方法如下将吸液管插入蒸馏水中向上扳动吸液开关反复冲洗流动比色皿直到蒸馏水的吸光度值正常为止2.每周要用专门的清洗剂清洗一次流动比色皿清洗时让清洗剂停留在比色皿中约半小时然后排掉再用蒸馏水冲洗干净最后注入蒸馏水3.不使用仪器时流动比色皿内一定要保证充满蒸馏水4.更换打印机色带时严格遵照打印机操作手册避免不规范操作5.光源灯更换时一定要先切断仪器的电源手不可触摸光源灯的玻璃部分万一光源灯的玻璃部分弄脏了可用无水乙醇将污物除去6.更换的蠕动泵管尺寸材料应与原泵管一致如不一致则要重新调整吸液量五、血常规检验操作规程1.标本1.抗凝静脉血有些仪器也可用末梢血2.方法1.血液细胞自动分析仪测定法3.试剂1.血液细胞自动分析仪配套试剂4.操作1.详见血液细胞自动分析仪使用手册附注：血常规包括白细胞计数及分类红细胞计数血红蛋白浓度红细胞比积血小板计数等项目这些项目亦有相应的手工方法详见有关资料半自动及全自动血液细胞分析仪从设计上均要求用抗凝静脉血其优点为：1.静脉血能正确地反映病人实际情况重复性好2.利于延长仪器的使用寿命3.解决了采血盘的交叉感染问题等4.血细胞计数应用EDTAK2为抗凝剂EDTAK22 H2O 15～22mg可抗凝1ml血5.贮血容器应选用有盖塑料管抗凝血采集后在室温中贮存应不超过6h如需制作血涂片应在2h内完成6.测定前必须将EDTAK2抗凝血充分混匀7.血细胞分析仪测定最适温度为18～22℃低于15℃或高于30℃均可使细胞体积发生改变影响各参数的结果8.血细胞分析仪用于白细胞分类只能当作一种过筛手段当白细胞红细胞血红蛋白和血小板的任何一项有明显升高或降低白细胞分类出现异常结果中间细胞群百分率≥80红细胞白细胞和血小板的任何一个直方图出现异常图形等情况须用显微镜检查及分类六、尿常规检验操作规程1.标本1.新鲜尿液2.方法1.化学试带法3.试剂1.各型号尿液化学分析仪配套试带4.操作1.详见尿液化学分析仪使用手册附注：1.尿常规检查使用尿液化学分析仪目前能进行8～10项检测PH蛋白葡萄糖酮体隐血尿胆红素尿胆素原亚硝酸盐比重白细胞这些项目亦有相应的手工方法详见有关资料2.必须了解所用试带各膜块注意事项药物干扰3.要注意尿液化学分析仪测定结果与手工法的差异必要时用手工法复查4.尿液化学分析仪检测仅是一个过筛手段当蛋白隐血白细胞等出现异常结果如尿蛋白＋或以上时应进行镜检5.尿液颜色透明度等一般性状异常时也应报告七、肝功能检验操作规程1.血清总胆红素TBIL和结合胆红素DBIL测定2.改良JG法3.试剂1.参照书刊文献如《全国临床检验操作规程》第二版自配配制标准液的胆红素应符合如下标准纯胆红素的氯仿溶液在25℃当光径1000±0001Cm波长453nm条件下其摩尔吸光系数应在60700±1600范围内偶氮胆红素的摩尔吸光系数应在74380±866范围内配制标准液的稀释剂须含白蛋白可用牛血清白蛋白或人血清代替人血清白蛋白标准液应贮於棕色瓶中避光保存在市售试剂中以含碱性酒石酸的灵敏度特异性高4.操作1.按试剂盒说明书或相应书刊文献规程手工操作比色测定波长600nm制作准曲线血样测定从标准曲线上求TBIL及DBIL的含量以umo1L报告，也可按厂家提供的试剂及仪器使用的说明书的要求将相应的程序及参数设入用自动生化分析仪测定5.标本1.血清空腹血为宜脂血脂溶性色素及严重溶血干扰此测定暂不能测定的标本应避光保存室温可稳定8h28℃可保存48h含叠氮钠作防腐剂的质控血清不宜用此法测定胆红素胆红素氧化酶BOD法6.试剂1.市售成套试剂BOD试剂复溶后28℃可保存一周7.操作1.按厂家提供的试剂及仪器说明书要求设置程序输入参数用自动生化分析仪测定波长450或460nm8.标本1.血清要求与改良J一G法相似八、肾功能检验操作规程尿素氮1.检测目的1.检测血清血浆或尿液中尿素的含量为临床对相关疾病的诊断观察疾病的变化及治疗效果以及对健康人群正常生理指标的监测提供重要的参考价值2.标本要求1.病人准备空腹12小时2.标本类型血清肝素化的血浆或24小时尿3.设备和试剂1.仪器设备：希森美康全自动生化仪2.试剂材料试剂3.试剂的贮存4.2～8℃密闭避光贮存至标签所注失效期5.2～8℃避光稳定30天6.试剂混浊变色或空白吸光度值 1000时不能继续使用7.注意此试剂为体外诊断用禁止入口吞下有害试剂含有叠氮化钠误入眼口中或沾染到皮肤上请立即用清水彻底冲洗必要时到医院就诊叠氮化钠可以和铜铅等金属反应形成爆炸性化合物故废弃时请充分稀释废液和冲洗排水管8.试剂准备即开即用的无需特殊准备4.操作步骤见生化分析仪操作流程5.质量控制1.质控物RANDOX多项人基质血清2.质控措施3.质控每日日常工作前进行4.质控参加焦作临床检验中心临床化学室间质评6.干扰因素1.总胆红素≤40mgdL血红蛋白≤450mgdL抗坏血酸≤400mgdL对本法无干扰7.参考区间及可报区间1.参考范围血清血浆 286～820mmol/L24小时尿 15～35g/24h2.可报范围000～3500mmolL样品Urea含量超过线性范围应用生理盐水稀释重做结果乘以稀释倍数8.异常结果处理1.结果异常与临床诊断不符应复查或与临床联络肌酐1.检测目的检测血清血浆或尿液中肌酐的含量为临床对相关疾病的诊断观察疾病的变化及治疗效果以及对健康人群正常生理指标的监测提供重要的参考价值2.标本要求1.病人准备空腹12小时2.标本类型血清肝素化的血浆或尿液3.设备和试剂1.仪器设备希森美康全自动生化分析仪2.试剂材料试剂4.试剂的贮存1.2～8℃密闭避光贮存至标签所注失效期2.2～8℃避光稳定30天3.试剂混浊变色或空白吸光度值 0050时不能继续使用4.注意此试剂为体外诊断用禁止入口吞下有害试剂含有叠氮化钠误入眼口中或沾染到皮肤上请立即用清水彻底冲洗必要时到医院就诊叠氮化钠可以和铜铅等金属反应形成爆炸性化合物故废弃时请充分稀释废液和冲洗排水管5.试剂准备即开即用的无需特殊准备5.操作步骤见全自动生化分析仪操作流程6.质量控制1.质控物RANDOX多项人基质血清2.质控措施3.质控每日日常工作前进行4.质控参加临床化学室间质评7.干扰因素1.直接胆红素≤257μmolL血红蛋白≤05gL抗坏血酸≤3mmolL甘油三酯≤150mmolL肝素≤50KUL枸橼酸钠≤10gL对本法无干扰8.参考区间及可报区间1.参考范围血清血浆530～1230μmolL 男性440～1060μmolL 女性首次晨尿 1530～15320μmolL24小时尿 66～150mmol24h2.可报范围00～88400μmolL样品Crea含量超过线性范围应用生理盐水稀释重做结果乘以稀释倍数9.异常结果处理1.结果异常与临床诊断不符应复查或与临床联络2.危急值及处理方法177μmolL及时与临床联络10.实验室解释1.增高严重肾功能不全各种肾障碍肢端肥大症等2.降低营养不良多尿等第九节血脂检验操作规程1.标本采集与处理1.受检者抽血前二周应保持平衡的饮食习惯近期体重稳定无外伤手术等意外情况并注意如有使用降糖降脂降压避孕药β-受体阻滞剂免疫抑制剂激素药物等则应根据所用药物特性停药数天或数周后再作血液脂类检测2.空腹抽血TG脂蛋白载脂蛋白测定应至少禁食12小时仅作胆固醇测定不必强求空腹24小时内不作剧烈运动抽血前不要久站立至少应静坐5分钟抽血时止血带使用不可超过1分钟3.标本用血清也可用肝素或EDTANa2抗凝之血浆EDTANa2浓度不宜太高4．血标本室温放置不得超过3h放置3045分钟后应即时分离出血清浆盖封於4℃冰箱中可稳定至少4天如需长期保存应於-70℃中冰冻存放不可反复冻融血清总胆固醇TC测定酶法CHODPAP法1.试剂1.市售现成试剂2.操作1.按试剂及仪器使用说明书要求设定程序输入参数用自动或半自动生化分析仪测定速率法终点法可手工操作用普通分光光度计比色测定波长500nm或520nm3.标本1.血清浆参看本节的标本采集与处理4.附注1.本法为中华医学会检验学会推荐的TC测定常规方法中华医学检验杂志1995181852.胆固醇标准液以定值参考血清为宜而不宜用Chol的水溶液作标准Chol定值质控血清亦不应用作标准液3.主要技术指标终点法批内CV＜15批间CV≤25灵敏度显色剂用酚时TC52mmo1L 200mgdl 时的吸光度A 500nm约030035故A 500nm 0005时TC浓度约为008mmo1L 3mgdL 测定范围当血清与试剂用量之比为1100时其测定的上界为13mmo1L 500ngdL血清甘油三酯TG测定酶法GPOPAP法1.试剂1.市售现成试剂有两种①.一步酶法单一试剂二步酶法双试剂②.标准液参考物一步酶法之用三油酸甘油酯水溶液也可用甘油，但甘油不适用於二步酶法2.操作1.按试剂及仪器使用说明书要求设定程序和参数用自动或半自动生化分析仪测定终点法可用普通分光光度计手工操作比色测定波长500nm3.标本1.血清浆参看本节标本采集与处理4.附注本法在操作程序上分为一步酶法与二步酶法二步酶法为中华医学检验学会的推荐方法中华医学检验杂志199518249现阶段允许二法并存要求逐步过渡到统一采用二步酶法在方法尚未统一前实验室报告TG测定结果时应注明除FG值或未除FG值，主要枝术指标酶试剂用缓冲液配制后2025℃应稳定1天4℃可稳定37天试剂空白为A500nm≤005显色后稳定≥30min测定上界113mmo1L 100mgdL精密度批内CV≤3批间CV≤5灵敏度2mmo1L TG A 500nm≥02血清高密度脂蛋白胆固醇 HDL-C 测定磷钨酸镁沉淀法1.试剂1.市售成套试剂沉淀剂酶试剂同TG测定2.操作按试剂盒说明书操作1．沉淀含apoB的脂蛋白2．测定上清液只含HDL的胆固醇含量方法同酶法TC测定3.标本血清浆4.试剂市售成套试剂总HDL试剂HDL3试剂酶试剂同TC试剂5.操作按试剂说明书操作1．沉淀含apoB的脂蛋白总HDL试剂2．沉淀含apoB的脂蛋白及HDL2HDL3试剂3．测定总HDLC及HDL3C同酶法TC测定并计算出HDL2C量4.标本血清浆血样在室温中不宜久放应即时测定原则应低温保存直接HDLC测定法1.试剂市售专门的试剂无沉淀剂酶试剂同TC测定如日本第一化学药品株式会社的产品2.操作按试剂盒及仪器使用说明书要求设置程序输入参数直接用自动或半自动生化分析仪测定无须沉淀离心分离出HDL步骤3.标本血清浆血清低密度脂蛋白胆固醇LDL-C测定1．Friedwald工式计算法1.LDL-C TC―HDL-C―TG5以mgdl为单位计2.LDL-C TC―HDL-C―TG22 以mmo1L为单位计3.只有当血TG＜452mmoL结果才较准确4.只有TCTGHDL-C三项测定都准确且符合标准化要求时才可计算出LDL-C的近似值聚乙烯硫酸沉淀法1.试剂沉淀剂市售酶试剂同TC测定2.操作1．TC测定2．选择性沉淀血清中LDL测定上清液之HDL－C与VLDL－C之和的量同TC测定3．计算出LDL－C的含量3.标本血清血清载脂蛋白A1apoA1测定免疫透射比浊法波长340nm本法批间CV＜51.试剂市售试剂盒试剂28℃保存不同批号试剂不能混合使用抗血清效价不应低於162.操作按试剂及仪器使用说明书要求设定程序和参数用自动生化分析仪测定也可用特定蛋白分析仪作速率法散射比浊测定或用含340nm 的分光光度计手工操作测定3.标本血清血清载脂蛋白BapoB测定免疫透射比浊法波长340nm本法批间CV＜51.试剂市售试剂28℃保存不同批号试剂不能混合使用抗血清效价不应低於11282.操作参看apoA1测定3.标本血清十、血液葡萄糖测定技术操作规程1.检测目的检测血清或血浆中葡萄糖的含量为临床对相关疾病的诊断观察疾病的变化及治疗效果以及对健康人群正常生理指标的监测提供重要的参考价值2.标本要求1.病人准备空腹12小时2.标本类型血清或NaF抗凝的血浆采血后及时分离以避免血清或血浆中葡萄糖被细胞利用而降低3.设备和试剂1.仪器设备全自动生化分析仪2.试剂材料四川迈克公司试剂参与反应成份R1酚120mmolLR2GOD≥35KULPOD≥5KUL4-AAP120mmolL3.试剂的贮存2～8℃密闭避光贮存至标签所注失效期2～8℃避光稳定30天试剂混浊变色或空白吸光度值 0150时不能继续使用4.注意此试剂为体外诊断用禁止入口吞下有害试剂含有叠氮化钠误入眼口中或沾染到皮肤上请立即用清水彻底冲洗必要时到医院就诊叠氮化钠可以和铜铅等金属反应形成爆炸性化合物故废弃时请充分稀释废液和冲洗排水管5.试剂准备即开即用的无需特殊准备4.质量控制1.质控物RANDOX多项人基质血清2.质控措施3.质控每日日常工作前进行4.质控参加焦作临床检验中心临床化学室间质评5.参考区间及可报区间1.参考范围空腹389～611mmolL餐后1小时778～889mmolL餐后2小时389～778mmolL2.可报范围000～2230mmolL样品GLU含量超过线性范围应用生理盐水稀释重做结果乘以稀释倍数6.危急值及处理方法22.2mmol/L及时与临床联络十一、凝血四项检验操作规程全血凝固时间检验CT1.标本静脉取血3ml2.方法与操作试管法硅管法操作参见《全国临床检验操作规程》第二版3.附注1.静脉取血要一针见血尽量减少组织液和空气混入2.水浴箱温度要恒定过高或过低可影响结果活化部分凝血活酶时间测定APTT1.标本自静脉取血用109mmol/L枸椽酸钠作1:9抗凝2.试剂市售成套试剂3.方法与操作按试剂及有关仪器说明书要求进行4.附注1.标本应及时检测最迟不超过2h2.分离血浆应在3000rmin离心10min。