二.生物传感器的工作原理
（一）将化学变化转变成电信号 （二）将热变化转变成电信号 （三）将光信号转变为电信号 （四）直接产生电信号
汗 水 传 感 带
它通过测量汗水中分泌的代谢物质，让使用者能 跟踪自身的电解质平衡、水化程度、肌肉劳累度 和身体活动能力等。
免疫单向扩散
免疫比浊法
酶联免疫检测
当抗原与抗体在特殊稀释系统中反应而且比例合适(一般规定抗体过 量)时，形成的可溶性免疫复合物在稀释系统中的促聚剂（聚乙二醇 等）的作用下，自液相析出，形成微粒，使反应液出现浊度。当抗 体浓度固定时，形成的免疫复合物的量随着检样中抗原量的增加而 增加，反应液的浊度也随之增加。通过测定反应液的浊度与一系列 标准品对照，即可计算出检样中抗原的含量。
第五节 基因芯片技术
一.基因芯片概述
基因芯片的定义： 将多个DNA探针固定在很小面积的固相载 体上所组成的微点阵阵列，可与来自样品 的互补核酸片段杂交。基因芯片技术实际 上是高度集成化的反向斑点技术。
二.基因芯片的制作和分析步骤
DNA探针设 计
DNA探针制 作
玻片活化
杂交
样本DNA制 作
芯片点样
洗涤
玻片扫描
数据处理
多聚赖氨酸处理的目的—防脱
基 因 芯 片 系 统
三.基因芯片在转基因食品检测中的应用
选择目的基 因片段
DNA探针制 作
芯片点样
杂交和洗涤
DNA扩增和 标记
转基因食品 DNA提取
结果检测
第六节 生物传感器
一.生物传感器概述
生物传感器的定义 将含有固定化生物活性物质（如酶、抗体、 全细胞、细胞器或其联合体）做敏感元件， 配上适当的换能器所构成的分析系统，称 为生物传感器，它可以将生化信号转为数 量化的电信号。
统
第二节 免疫学检测技术
一.免疫学检测方法的原理
抗原：能刺激机体产生抗体和致敏淋巴细胞，并能 与之结合引起特异性免疫反应的物质。
反应 能与相应抗体结合发生反应的特性
原性 抗原性
免疫
原性 刺激机体产生抗体和致敏淋巴细胞 的特性
不完全抗原 （半抗原）
抗体：在抗原刺激下产生，并能与之特异性结合的 免疫球蛋白。
southern印迹杂交
三.核酸探针杂交技术
（二）同相杂交 即液-液相杂交
发光
供能
5'
3'
双探针常规技术
分子信标技术
自由状态时，分子信标呈发卡式结构，从 而荧光基团和淬灭基团相距较近。此时使 荧光基团发出的荧光被淬灭基团吸收并以 热的形式散发，荧光几乎完全被淬灭。当 分子信标与靶分子结合时，荧光基团和淬 灭基团之间的距离加大，从而使分子信标 的荧光几乎100%恢复。所检测到的荧光强 度与溶液中靶标量成正比。
第四章 食品检验检疫新技术
2015-9-18
一
概述
二
免疫学检测技术
提
三
核酸提取方法与探针技术
纲
四
五
基因芯片技术
六
生物传感器
第一节 概述
一.概述
为什么要发展新方法？
老方法费时费力， 精确性不高
新方法快速、 可靠
现代免 疫技术
PCR 技术
核酸探 针技术
基因芯 片技术
生物传 感器
现代免 疫技术
自动微生 物鉴定系
随机引物法
PCR标记法
三.核酸探针杂交技术
（一）异相杂交 即固-液相杂交
Edwin Mellor Southern
一般利用琼脂糖凝胶电泳分 离经限制性内切酶消化的 DNA片段，将胶上的DNA变 性并在原位将单链DNA片段 转移至尼龙膜或其他固相支 持物上，经干烤或者紫外线 照射固定，再与相对应结构 的标记探针进行杂交，用放 射自显影或酶反应显色，
四.试剂盒快速检测方法
试剂盒，装试剂的盒子。 将实验所需的众多试剂组合到一起，并 对每一步实验操作给予详细的说明，使 用者只要按操作步骤添加试剂即可。
第三节 核酸提取方法与探针技术
一.核酸的提取方法
课本上有个地方有问题
二.探针种类及其制备方法
（一）探针的标记物分类
（二）探针的标记方法
缺口平移法
ELISA
酶联免疫吸附测定（enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA）
Elisa Swan
Hikari Elisa
二.ELISA快速检测方法
（一）基本原理
酶标抗体
酶标抗原
酶联免疫吸附试验
抗原吸附在固相载体上，加待测抗体，再加相应酶标记抗体，生成抗原一待测抗 体一酶标记抗体的复合物，再与该酶的底物反应生成有色产物。借助分光光度计 的光吸收计算抗体的量。待测抗体的量与有色产物成正比。同理也可包被抗体， 测定抗原含量。

（二）ELISA的种类
直接法、间接法、夹心法、竞争法
（三）用于标记的酶
常用的有辣根过氧化物酶、碱性磷酸酯酶 常用的交联方法有戊二醛法、过碘酸氧化法
（四）酶与底物
辣根过氧化物酶
联苯二胺（OPD） 3,3 ′， 5,5 ′-四甲基联苯胺
显色
（五）固相载体
聚苯乙烯材料
ELISA小试管
聚苯乙烯材料 ELISA小珠
血清学试验：因为抗原抗体反应一般都要用血清， 所以把抗原抗体在体外发生的特异性结合反应称血 清学试验。
免疫学检测方法的原理：借助抗原和抗体在体外特 异性结合后出现的各种现象，对标本中的抗原或抗 体进行定性或定量的检测。
定性 有免疫复合物形成的现象发生
定量
反应中加入抗原或抗体的浓度与形成免疫复合 物的浓度成函数关系。根据免疫复合物产生的 多少来推算样品中抗原或抗体的含量。
聚苯乙烯材料 ELISA酶标板
硝酸纤维素膜
磁性微粒
（六）ELISA的测定方法（视频）
三.免疫层析条检测方法
免疫胶体金层析条
脂质体层析条
脂质体中含有染料等其他可见的化合物。 脂质体结构的外膜表面有抗体附着，若 被检食物中存在病原体，后者就结合在 抗体上，使脂质体的外膜破裂，从而释 放出染料或其他标记物。