血培养的原则和流程
Bact/ALERT 3D 全自动细菌、分 枝杆菌培养检测系统
Bact/ALERT 3D检测系统
• 工作原理:
系统采用非侵入性检测原理，并采用具有专利技术 的颜色不可逆液乳感应器来检测是否有微生物生长。 利用微生物在培养基中代谢基质时，产生二氧化碳， 进而使瓶底液乳感应器中PH发生改变，颜色就由墨绿 色变黄。仪器培养孔底的光电探测器测量反射光变化 并按相应公式计算，在设定时间内报告培养阳性或阴 性。
Blood Culture Set：一套组合的血培养瓶，其接种的是同一来源的 标本（同一穿刺）
血培养现状
• 阳性率不高，但2次送检阳性率明显提高
RJH 0704
每日送检1套阳性率 3.8%
每日送检2套阳性率 17.6%
采血量
– 对于成年患者，每套血培养瓶推荐的采血量 为20至30ml
– 对于婴幼儿患者，采血量不超过患者总血量 的1％
Staphylococcus Species
Streptococcus Species
S. pneumoniae
Enterococcus
E. faecium
S. pneumoniae
Gram-Positive bacilli
Clostridium species C. perfringenes
血培养实验室报告
1级 2级 3级
养 培
革
兰
染
色
鉴
定
血培养
电 话 报
直
鉴
定
＋
药
敏
终报告
告
接
药
敏 （
DA ST )
一级报告---血培养革兰染色
改善血流感染早期治疗的简单而 有效的方法
临床微生物室
临床医生
革兰染色的处理和报告
革兰染色
• 革兰氏染色阳性球菌,成堆 • 革兰氏染色阳性球菌,成链或成对 • 革兰氏染色阳性杆菌,偏小
是否进行厌氧培养
• 血培养在需氧瓶和厌氧瓶中的分配
– 对于常规的血ห้องสมุดไป่ตู้养，建议采取包括需氧和厌 氧的一套血培养瓶
– 当采血量不能满足推荐的采血量时，首先应 进行需氧瓶的培养
要不要做厌氧培养？
菌血症病原菌种类构成 需氧瓶
需氧菌
厌氧瓶
厌氧菌
兼性厌氧菌
病原菌培养更完整
样本采集和运输
• 样本的转运
– 血培养瓶应立即被送往实验室 – 血培养瓶保留在室温不得超过数小时 – 接种后血培养瓶禁止冷藏或冷冻
提高血培养阳性率关键点
4.采血量：至少10ml/套，5ml/瓶，血量多，阳
性率相对较高。最佳组合（需氧＋厌氧 X2 ）。 5.严格无菌操作：消毒剂在皮肤表面停留至少30” 以上，以保证消毒效果，避免污染。 6.血培养瓶放在常温下，采血后及时送检，不得 放冰箱。
血培养三级报告制度
提高血培养的临床应用价值
样本采集和运输
• 血培养的时间
– 细菌通常在寒战和发烧前1小时入血 – 考虑到操作上的原因，血培养应同时采集， 除非有怀疑心内膜炎或其他静脉内感染，如， 导管相关性感染
采血时间
寒战 血培养
体温
细菌浓度
0
30 时间 (分钟)
体温与细菌浓度并不完全同步
60
血培养的次数
• 血培养的数量
– 研究表明，当每套血培养采血20ml时
CLSI 血培养的原则和流程： 基本内容
• • • • 范围 定义 血培养的临床重要性 标本采集和运输
– – – – – – – 时间 数量 采血量 在需氧和厌氧瓶中的分配 皮肤准备和污染预防 采集 拒收标准
• 方法和步骤
– – – – – 检出率的重要影响因素 方法 真菌 分枝杆菌 特殊话题
• • • •
斯 特)
报告
可疑为葡萄球菌属 可疑为链球菌属
可疑为革兰氏染色阳性杆菌(如李
• 革兰氏染色阳性杆菌,偏大 • 革兰氏染色阴性的杆菌
可疑为厌氧的革兰氏阳性杆菌 可疑为革兰氏阴性杆菌(如弧菌)
• 革兰氏染色阴性的球菌 可疑为革兰氏阴性球菌(如鲍曼不动杆 菌, 脑膜炎球菌,厌氧的革兰氏阴性球菌
• 酵母菌 菌) 酵母菌(可疑为隐球菌或白色念珠
Listeria monocytogenes
Corynebacterium spp.
P. aeruginosa
Neisseria meningitidis
Candida species
C. tropicalis
C. glabrata
制定血培养的原则和流程的目的和意 义
• • • • • • • 如何提高阳性率 如何避免污染 血培养一次还是多次 采血量 采样时间 是否需要做厌氧培养 如何及时报告
血培养标准操作规程（SOP）的 制定和培训
Principle and Procedure for Blood Culture （ CLSI Proposed Guideline M47-P，Oct 2006）
结果报告 污染 安全问题 质量保证
– 检查前 – 检查过程中 – 检查后
Bact/ALERT 3D培养基
• 7种多层聚合碳纤维培养瓶可供选择使用，包括标准需氧/ 厌氧瓶，含活化碳粉的需氧/厌氧瓶，儿童瓶及两种结核 分枝杆菌瓶（无菌和有菌标本） 。
• 具同时细菌和真菌的培养检出，培养基成分对真菌有良好 的复活性。 • 3D培养系统为当前国际上唯一可同时进行细菌和结核分 枝杆菌（无菌和有菌标本）培养功能的多功能仪器。
样本采集和运输
• 样本拒收标准
– 标签错误或在血培养瓶上未贴标签 – 破损的或渗漏的血培养瓶 – 血液凝固的血培养瓶
提高血培养阳性率关键点
1. 时机：一旦怀疑血流感染，应该立即采 集血培养（尽可能在患者寒战或发热 时），无须等到发热最高峰。 2.次数：每名患者应至少采集2次血培养， 最好为 3 次，每次间隔不超过 30 分钟且 为不同部位。 3. 采样要求：在抗菌药物使用前或血药浓 度最低时。如果已经使用抗菌药物，使 用能中和抗菌药物的血培养瓶。
• 一套检出率：65% • 二套检出率：80% • 三套检出率：90%
– 目前的指南推荐采集2~3套血培养 – （Single blood culture）单一的血培养结果将很难做出临 床解释。 – 血培养在采取血培养后的2至5天内，不需要重复采取血培养， 因为采取治疗后的2至5天内血液中的感染细菌不会马上消失。