《蚕体解剖生理学》实验指导实验目的与要求蚕体解剖生理学实验,是本课程的一个组成部分,是学好这门课程的重要环节。
蚕体解剖生理学实验的目的,不仅在于加深和巩固对讲课内容的理解,更重要的是在学习理论知识的基础上,掌握蚕体解剖生理学的实验技术,进一步使理论密切联系实际,培养分析和解决问题的能力,为学好蚕桑技术专业课以及开展科学实验活动打下基础。
为使实验顺利进行,提高实际效果,特提出以下要求:一、实验前要预习实验内容,明确实验目的和要求,了解操作方法和注意事项。
二、教师讲解时必须注意听讲。
三、领到实验材料和仪器后,立即进行检查,如有遗缺或差错应及时向有关教师提出。
四、示范标本不得随便移动。
如需变动位置或观察部位,应征得教师的同意。
五、每次实验不得迟到早退,有事外出必须请假。
实验时要保持安静,不得高声谈笑,不要到处走动,以确保实验顺利进行。
六、实验中要坚持严肃性、严格性和严密性,按照实验步骤,依次操作。
须据实记录,并认真分析研究。
实验报告要求数据确实,绘图准确。
七、实验观察如不能当日结束,必须在指定时间内观察完毕。
八、注意节约水,电、药物及其他实验材料。
仪器、用具、药物用完后要放回原处。
未经教师许可,实验材料,药物、仪器,用后不得携出室外。
仪器损坏要及时登记,酌情赔偿。
九、实验完毕后,要整理桌面,清洗仪器及用具,打扫实验室,保持室内整洁卫生。
实验一外部形态的观察一、目的要求:1、了解卵的外形2、能识别各种卵3、了解蚕的外部形态4、掌握口器各部及触角的构造二、材料:1、越年卵及不良卵2、5令浸渍材料蚕3、口器各部、胸、腹、足标本片4、雌、雄蛹,雌、雄蛾三、用具:解剖镜,显微镜、解剖器、烧杯(500m1)、二重皿、吸管、载玻片、乙醚。
四、观察内容:(一) 观察卵的形状、卵涡、卵色、卵纹、卵孔、气孔以及越年卵和不良卵卵呈扁平椭圆形,一端稍尖,一端略大,在尖的一端生有卵孔。
卵壳无色透明或带淡黄色,表面布满五角形或六角形卵纹。
卵孔的卵纹排列呈菊花瓣状。
卵纹之间有针状的气孔。
在卵面的中央有凹陷的卵涡。
刚产下的卵,从外表看均为乳白色或淡黄色。
如果是越年卵,则逐渐变为品种特有的固有色。
不越年卵中的生种,产卵后虽为淡黄色,用阳光照射即现红色,以后卵色一般不变,并不断发育而孵化。
不越年卵中的再出卵,产卵后变成固有色,以后在年内又陆续孵化。
由于生种和再出卵蚁蚕孵化出来留下1个空壳,出现了原来卵壳的颜色,卵的一端并有1个孵化孔。
不受精卵卵色一直保持淡黄色,大多不能向前发育而陆续死亡。
死卵(早期死卵)虽已着色,但卵涡深陷,呈三角形或成瘪卵,多赤褐色,也有普通卵色带黑色。
(二) 观察蚕的头部及附属器官1.头部分区头部正面有条倒“Y”形线缝为头盖缝,中干为颅中沟,两臂为口上沟。
左右两片呈半球形,为颅侧板。
中央三角形的一片为额。
额下狭长的一块为唇基。
2.触角着生在颅侧板的下端,白色角基膜内,由3节组成。
第二节长,上端有两根刚毛,4个短小圆锥形突起,第三节很小,在其前端也有大小不等的2个圆锥形突起。
3.单眼在颅侧板前端的两侧,触角的基部,左右各6个,其中4个排列成半圆形,1个略在圆心,1个靠近触角。
单眼是半球形隆起,呈黑褐色,有光泽。
4.口器由上唇、上腭,下腭、下唇四部分组成。
①上唇在唇基的下方,呈倒凹字形,其外面有6对感觉毛,其内面靠近游离缘的部分,有6个无色圆锥形的感觉突起。
②上腭在上唇的下方,外面近后缘基部有两根刚毛。
上腭前关节是凹形的臼,后关节为球形踝突。
其内侧为收肌板,宽大,圆扇状,上附上腭收缩肌。
外侧为展肌板,较小,先端分支,上附上腭伸展肌;③下腭和下唇下腭和下唇互相愈合成一个复合体,位于上腭的下方。
下”腭在下唇的两侧,由3节组成,各节上有l一2根刚毛。
在下腭的顶端有下腭须,由3小节组成,第一小节上有1根刚毛,顶端有圆锥形突起。
其内侧生1个瘤状体,上面有3根稍长的无节毛状突起,两根有节的圆锥形突起。
下唇在左右下腭之间。
下唇的中间为吐丝管,在吐丝管基部两侧,各有1个下唇须。
下唇须由3小节组成,第二、第三小节上各生1根刚毛。
(三) 观察幼虫外部形态:1、外形和体节蚕体由头、胸、腹3体段构成。
胸部有前、中、后3个胸节组成,腹部由10个腹节组成。
2、颈膜颈膜连接头胸部,背面略呈三角形,为柔软的薄膜。
3、节间膜是体节间柔软半透明的薄膜,除胸部背面和第九、十腹节无节间膜外,其他各体节均有。
4、肛上板是第九、十腹节背面的三角形硬板。
5、尾角在第八腹节背面,是刺状肉质突起。
6、气门幼虫有9对气门,分布在前胸、腹部第一至第八体节的两侧。
7、胸足每胸节各有1对,由3小节构成,呈圆锥形。
第三小节先端有逊个黑褐色钩爪,其内侧有1个柔软突出的爪垫。
8、腹足第三、四、五、六、十腹节各有1对腹足。
腹足为柔软的肉质突起,不分节。
腹足先端呈圆盘状,外缘有半圆形黑褐色的骨质弧线,内缘有排成半圆形的黑褐色钩爪,尖端向内弯曲。
钩爪长短不同,相间排成两列。
9、雌、雄蚕外部特征雌蚕,在第八,九腹节腹面,各有1对乳白色小圆点。
雄蚕,在第八、九腹节间腹面中央,有1个乳白色瓢形囊状体。
(四) 蛹外部形态的观察:1、头部及附属器官头部很小,前方的额略呈方形,白色。
额的左右两侧有触角。
触角基部有一对复眼。
头部下方为退化的口器。
2、胸部及附属肢分前胸,中胸、后胸。
其腹面和侧面为附属肢所遮盖,仅能在背面看见,前胸呈六角形,中胸最大,略呈五角形,后胸呈凹字形。
各胸节腹面有对胸足,但外观只能看出前,中、后足的一部分。
在前胸侧面有1对气门,但被翅覆盖着。
中,后胸的两侧各有1对翅,后翅被前翅被覆。
3、腹部及附属肢蛹体的第九,十腹节已愈合,背面外观只能见到9个体节。
其中1— 3腹节腹面被翅覆盖,只能从背面观察。
在1—7腹节两侧有1对气门,呈长椭圆形,第一腹节气门隐在翅下,第八腹节气门已退化,仅留残痕。
4、蛹的外部雌雄特征雌蛹腹部肥大,末端钝圆,在第八腹节腹面正中有细线纹,在体节的前缘及后缘向中央弯入,呈X形。
雄蛹腹部较小,末端稍尖,在第九腹节中央有1个褐色小点。
(五) 蛾外部形态的观察:1、成虫的头部头部呈小卵形,两侧有复眼,呈半球形,一般品种为黑色,也有的为赤色和白色。
复眼由许多小眼组成,表面呈六角形,整齐排列成蜂巢状。
触角在复眼的上方,呈双栉状。
口器在左右两复眼之间,但已退化,只有下腭较为发达。
2、成虫的胸部分前胸、中胸和后胸。
各胸节腹面有1对胸足。
中胸和后胸各生1对翅。
成虫的前翅大,呈三角形,后翅小,呈圆形。
3、成虫的腹部雄蛾腹部只能认出8个体节,雌蛾只能认出7个体节。
此外,在前胸以及第一至七腹节的两侧,还着生有新月形的气门。
4、成虫的外部生殖器雌蛾:(1) 由第八腹节的腹板,形成骨质化而坚硬的锯齿板。
(2) 在锯齿板和第七腹节腹板中央有交配孔开口。
(3) 第九腹节和第十腹节愈合,形成球形的侧唇。
其中央现一条纵沟,沟中有两个孔,上方是肛门,下方是产卵孔。
(4) 侧唇和锯齿板间的节间膜,向侧方突出1对黄色囊状的侧胞。
雄蛾:(1) 第九腹节腹板变形,形成骨质化的“U”形环,环的中间有阴茎。
(2) 阴茎的两侧有一对大形的抱器。
(3) 第十腹节的背板骨质化,向后方突出,成为钩形突。
(4) 第十腹节腹板骨质化,向上弯曲成为肛下板,其上方为肛门的开口。
五、方法:(一) 卵外部形态的观察:1、观察卵形用解剖镜观察卵的外形及卵涡。
2、观察卵纹和气孔用解剖刀切取卵壳一块,浸入乙醚数分钟,·取出放置载玻片上,用显微镜观卵、纹及气孔。
3、观察卵孔将卵壳的前端,用解剖刀切下一部分卵壳,水洗,将其表面向上,置载玻片上,在显微镜下观察卵孔。
4、观察越于卵和不良卵利用越年卵的蛾区,观察越年卵,并识别不越年卵(生种和再出卵),不受精卵以及死卵。
(二) 观察蚕的头部及附属器官。
1、观察头部用解剖刀切取五龄蚕头部,观察头部的分区,触角、单眼的位置,并切取触角、单眼置载玻片上,用显微镜观察其形态和构造。
2、解剖上唇用解剖刀齐唇基处切下上唇,置玻载片上,用显微镜观察上唇外面的感觉毛,再将上唇反过来观察内面的感觉突起。
3、解剖上颗用两根解剖针,将上腭分离出来,置载玻片上,用显微镜观察其形态。
4、解剖下腭和下唇用解剖针将下腭和下唇复合体取出,再用解剖针分离下腭和下唇,置载玻片上,用显微镜观察下腭、下唇、吐丝管等各部的形态和构造。
(三) 观察幼虫外部形态:1、观察幼虫外形取5龄蚕,观察蚕体外形和体节,肛上板、尾角,气门的位置。
2、观察胸,腹足观察胸,腹足着生的位置,然后自胸,腹足基部剪下,置于解剖镜下观察。
3、观察雌、雄蚕外部特征取5龄二日或三日的浸渍材料蚕,观察蚕体腹面,尾足内侧部分,区别雌,雄蚕。
(四) 蛹外部形态的观察:取蛹从背面观察胸部形态及腹部体节。
从蛹的腹面观察头部附属器官及胸部附属肢的形态。
取雌、雄蛹观察雌,雄外部特征。
(五) 蛾外部形态的观察:取雌,雄蛾观察外形,并加以比较。
取复眼表面一小块,置载·玻片上,用显微镜观察复眼的构造。
观察成虫前后翅及胸足的标本片,取雌,雄蛾各—只,剪下尾部,放在解剖镜下,观察雌雄蛾外部生殖器的构造。
六、作业:1、绘卵的外形图及卵孔部的卵纹图。
2、绘幼虫全形图。
实验二体壁及衍生物的观察一、目的要求:1、弄清体壁的基本构造2、能识别各类斑蚊3、了解体表突起及刚毛的构造4、了解蜕皮腺的位置、形态、构造二、材料:1、体壁切片标本2、5令浸渍材料蚕3、各种斑蚊标本4、4令眠蚕三、用具:解剖镜、显微镜、解剖器,二重皿、吸管、烧杯(500m1)、载玻片。
四、观察内容:1、体壁构造:底膜、真皮细胞层、表皮层(内表皮、外表皮、上表皮)2、体壁衍生物:⑴毛原细胞及刚毛⑵体表非细胞性突起⑶体表单细胞感觉突起⑷蜕皮腺五、方法步骤:1、用显微镜观察体壁切片标本,观察体壁层次构造,体表突起,刚毛及毛原细胞的形态构造。
2、观察各种斑蚊的标本3、解剖蜕皮腺:⑴取经苏丹Ⅲ染色的4令眠蚕从腹中线剪开,并用大头针将蚕体固定于蜡盘内。
⑵用镊子除去消化管、丝腺等组织。
⑶移于解剖镜下,在侧背线处的环节中央,寻找乳白色或淡黄色的蜕皮腺⑷用镊子将蜕皮腺从基部取出,置显微镜下观察其构造。
六、作业:绘体壁层次构造图。
实验三幼虫消化管及涎腺的观察一、目的要求:了解消化管各部的位置、形态、构造以及组织学构造。
了解涎腺的形态和构造。
二、材料:五龄浸渍材料蚕,中肠组织切片标本、涎腺示范标本。
三、用具:显微镜,解剖镜、解剖器、蜡盘,烧杯(500ml),二重皿、吸管,载玻片。
四、观察内容:(一) 观察消化管的外部形态1、前肠分口腔,咽喉、食道3部分。
口腔和咽喉在头腔内,食道在第一胸节内。
2、中肠由第二胸节前端开始,伸展到第六腹节中部为止。
3、后肠分小肠,结肠、直肠3部分。