实验四
血糖的测定及激素对血糖浓度的影响
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一 实验目的
掌握GOD-POD法测定血糖的原理及方法。
观察胰岛素，肾上腺素对血糖浓度的影响。
了解动物实验的基本知识和兔耳缘静脉取血 的方法。
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二 原理
(2) 激素对血糖浓度的影响 葡萄糖在葡萄糖氧化酶的催化下生成葡
萄糖酸，并产生过氧化氢，过氧化氢被过氧 化物酶（POD）催化释放初生态氧，氧又对 与色原性氧受体4－氨基安替比林偶联的酚氧 化，并与4－氨基安替比林结合生成红色醌类 化合物。
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按表操作：
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加入物（ml） 测定管（注射前） 测定管（注射后） 标准管
去蛋白血滤液
0.5
0.5
处理后的葡萄糖
0.5
空白管
标准应用液
蛋白沉淀剂
酶酚混合试剂
3
0.5
3
3
3
混匀，置37℃水浴15分钟调波长为505nm，
以空白管调零，分别读取A测A标,根据标准管法求
10 测定管血糖浓度。
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5．制备无蛋白血虑液:这是注射前的血液，在胰岛素等待 一个小时，肾上腺素等待半个小时期间制备注射前无蛋 白血虑液。方法：蛋白沉淀剂4ml＋全血0.2ml混匀，室 温放置7分钟后，在漏斗上过滤，这时标记为注射前无 蛋白血滤液。
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操作
6．注射后再次取血 7．再制备无蛋白血虑液:标记为注射后 8．比色：最后我们用标准管法来测定血糖浓度，
四 结果与计算
C测（mmol/l）= （A测/A标）×5 mmol/L (5为葡萄糖标准应用液浓度值)
通过计算比较一下家兔注射前后血糖浓度的变 化情况。
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五 分析
(1) 对家兔而言血糖正常值：2.8－5.2 mmol/L， 验证是否在此范围。
(2) 从实验结果来验证胰岛素降低血糖以及肾上 腺素升高血糖的作用。
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二 原理
(2) 显色原理 葡萄糖在葡萄糖氧化酶的催化下生成葡
萄糖酸，并产生过氧化氢，过氧化氢被过氧 化物酶（POD）催化释放初生态氧，氧又对 与色原性氧受体4－氨基安替比林偶联的酚氧 化，并与4－氨基安替比林结合生成红色醌类 化合物。
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葡萄糖＋O2+H2O GOD 葡萄糖酸＋H2O2 4－氨基安H2O
葡萄糖越多，生成的醌类物质就越多，颜 色就越深，通过所讲过的比色法，求出它的葡 萄糖含量，即血糖浓度。（标准管法）
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三 操作
1．准备抗凝试管：首先放入试管一小勺抗凝剂 （草酸钠）。
2．分组。称重：Kg，共有四只兔子，两只注射 胰岛素，两只注射肾上腺素。兔子抓取方法： 一手抓取颈部皮肤，另一只手托臀部，把它放 在天平上称重。
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操作
3. 注射前取血:一般多以心脏取血的方式进行。
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操作
4．注射激素:抓住兔子，肚皮朝上，在腹部的皮下注射， 注意要抓紧兔耳以免被咬住，方法是掂起皮肤，刺入皮 下有落空感，然后缓慢注入激素。首先注射胰岛素0.75 mg/kg（注意记录时间）然后注入肾上腺素0.5 mg/kg， 并记录时间。