Bradfo方法和考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度一样，是 利用蛋白质-染料结合的原理，定量地测定微量蛋白质浓度的快速灵敏的方法。
该法是根据最常用的两种蛋白浓度检测方法之一Bradford法研制而成，
实现了蛋白浓度测定的快速，稳定和高灵敏度。
利用此方法检测速度极快，10〜20个样品只需不足10分钟即可完成。
0.01%,Triton X-100低于
0.05%,Tween20, 60, 80低于
0.015%。
试剂和仪器
一、试齐I」
试剂盒自备：
G250染色液、BSA标准蛋白。
BSA标准蛋白浓度已稀释至500卩g/ml -20C保存。二、测试样品
待测样品蛋白浓度稀释在50-500 g/ml范围内为宜。
三、仪器
96孔酶标、酶标仪。
操作方法
标准品编号
500ug/mlBSA/口1
蒸馏水/卩110302
1.5
28.45
12
186
6830
0分别于小离心管中混匀后，取20卩加入到对应酶标孔中待测样品编号31415•…待测样品稀释后，各取20卩加入到相应酶标孔中G250/卩1200孔1/
反应3-5min
1.用酶标仪测定A595nm处的吸光值。
灵敏度高，检测浓度下限达到25ug/ml,最小检测蛋白量达到
0.5ug待测样品体积为1〜20ul。
且在50〜1000ug/ml浓度范围内有较好的线性关系。
Bradford法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响。样品 中-巯基乙醇的浓度可咼达1M，二硫苏糖醇的浓度可咼达5mM。但受略咼浓度 的去垢剂影响。需确保SDS氐于
2.根据标准曲线计算待测样品的蛋白浓度。