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抗中性粒细胞胞浆抗体

抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)最佳检测方案
同时采用间接免疫荧光法和靶抗原(尤其是PR3和MPO)明确的酶联免疫法检测抗中性粒细胞胞浆自身抗体可以获得更高的诊断灵敏度。

但是基于成本和最优化选择因素的考虑,可以首先单独采用免疫荧光法进行检测,然后对阳性结果再进行特异性ELISA法检测。

乙醇固定的人中性粒胞是间接免疫荧光法检测ANCA的标准基质。

该基质可区分出两种荧光模型:与Wegener,s肉芽肿相关的胞浆型(cA NCA)和对多种疾病有提示作用的核周型(pANCA)。

pANCA与抗核抗体(ANA)常常难以区分,因此,另外增加了Hep-2细胞基质(可能有粒细胞沉积)。

灵长类肝脏基质的作用:肝细胞核和血窦中的中性粒细胞处于同一视野中,如果同时存在ANA和pANCA,中性粒细胞的荧光强度比肝细胞核更强。

欧蒙生物薄片技术可以将所有实验基质整合在同一反应区,所以不需要在另一张载片上平行温育人上皮细胞以排除抗核抗体的干扰。

第四种生物薄片是甲醛固定的中性粒细胞,主要用于检测具有诊断价值的髓过氧化物酶,而其它pANCA(尤其对胃肠疾病较为重要)和几乎所有的抗核抗体则完全被抑制。

欧蒙推荐间接免疫荧光法的起始稀释度为1:10,但检测不到一些低滴度抗体(主要是抗PR3抗体)。

因此Wegener,s患者采用间接免疫荧光法的检出率为80%-90%(cANCA),94%的cANCA阳性病例可通过最新抗PR3-hn-hr ELISA得到确证(传统抗PR3 ELISA为79%)。

许多Wegener ,s患者在检查时并无该疾病征兆或其临床活动性很低。

但多数情况下这些结果对此类患者并没有治疗意义,因此在常规实验室诊断中采用上述经济适用的方案较为合适。

但是如果临床症状和实验室检查结果不符时,建议同时开展所有可能检测方法。

ANA:抗核抗体;BPI:杀菌/通透性增强蛋白;cANCA:抗中性粒细胞胞浆抗体胞浆型;CD:克罗恩病;CSS:Churg-Strauss综合征;EL:弹性蛋白酶;EOH:乙醇;HCHO:甲醛;HEp-2:人上皮细胞;IFT:免疫荧光检测法;LF:乳铁蛋白;MPA:显微多动脉炎;MPO:髓过氧化物酶;PAN:结节性多动脉炎;pANCA:抗中性粒细胞胞浆抗体核周型;PR3:蛋白酶3;PSC:原发性硬化性胆管炎;RA:类风湿性关节炎;SLA:系统性红斑狼疮;UC:溃疡性结肠炎;WG:Wegener ,s肉芽肿。

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