当前位置:文档之家› 光度测定法

光度测定法

光度测定法
无色液体的纯度可用光度测定法测定。

使用时,先要清洗滤纸、吸收瓶、样品瓶及比色杯。

称取一定量的样品,用玻璃棒搅拌使之溶解。

加入规定量的稀硫酸或蒸馏水,放置一段时间后,观察到有明显蓝色的溶液生成时,则表明样品中不含水分。

然后再逐滴加入碘化钾溶液,即出现棕黄色沉淀。

最后将沉淀通过石蕊试纸检验,确定为滤液。

1光度测定法测定乙醇含量实验目的要求:熟悉波长在390nm左右的紫外可见光对有机物质的穿透性,并掌握该波段的测定方法及测定结果的计算。

仪器药品及试剂:碘液、空气、水、甲醇等必需品及常用消毒防腐剂。

仪器药品准备完毕后,开始测定实验。

由于乙醇具有吸水性,测定前应向容量瓶中加入甲醇,使其含量为19。

5% (w/v)。

由于甲醇也是一种极性化合物,故加入甲醇的体积以稍超过容量瓶刻度线1cm 为宜。

操作步骤和结果:操作步骤:称取100mL(准确至0。

1g)供试品于具塞锥形瓶中,加入1ml碘液,盖上表面皿,加入6mL(4m1)水,摇匀。

此时水层呈微蓝色,并有絮状物产生。

冷却,加入3mL甲醇,充分振摇,继续静置2min,至沉淀完全。

用水稀释至刻度,摇匀,作为供试品溶液。

2光度测定法测定蛋白质含量实验目的要求:熟悉用紫外可见光谱法测定蛋白质含量的原理、方法及各种条件下所需的波长范围;熟练掌握仪器操作,并能得出正确的数据。

仪器药品及试剂:仪器有一台波长范围在340nm-360nm的可见分光光度计,具有
仪器温度补偿功能的电子天平,以及一台分光度计专用玻璃管。

分析步骤和结果:仪器按照要求调节到所需波长,以空气为参比,用水冲洗滤纸、比色皿及透射比色皿各3次,用去离子水冲洗3次。

接通电源预热20min后,打开光源,将盛有蛋白质标准溶液的透射比色皿放入比色杯中,透射比色皿与光源成45°角,打开灯源,然后调整光路使光线通过分光光度计的分光板后进入比色杯,用分光光度计自带的样品架将待测蛋白质样品加入比色杯中,插上电源。

用电子天平准确称取经稀释的标准蛋白质溶液,加入比色杯中,然后移入比色杯中,读出透射比色杯与入射比色杯的比值。

相关主题