Q/JBSW 江西嘉博生物工程有限公司企业标准
Q/JBSW045-2019混合型饲料添加剂液态溶菌酶
2019-09-01发布2019-09-10实施
Q/JBSW045-2019
前言
本标准起草单位：江西嘉博生物工程有限公司。

本标准主要起草人：周志、李成龙。

本标准为首次发布。

混合型饲料添加剂液态溶菌酶
1范围
本标准规定了混合型饲料添加剂液态溶菌酶的原料要求、技术要求、试验方法、检验规则、标签、包装、运输和贮存。

本标准适用于以饲料添加剂溶菌酶按一定比例溶于纯化水中，制成的混合型饲料添加剂液态溶菌酶。

2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。

凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。

凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T9724化学试剂pH值测定通则
GB10648饲料标签
GB/T13079饲料中总砷的测定
GB/T13080饲料中铅的测定原子吸收光谱法
GB/T13091饲料中沙门氏菌的检测方法
GB/T13092饲料中霉菌总数测定方法
GB/T17480饲料中黄曲霉毒素B1的测定酶联免疫吸附法
GB/T18823饲料检测结果判定的允许误差
GB/T14699.1饲料采样
GB/T20195动物饲料试样的制备
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局令（2005）第75号《定量包装商品计量监督管理办法》中华人民共和国农业部公告第1773号《饲料原料目录》
中华人民共和国农业部公告第1849号《混合型饲料添加剂生产企业许可条件》
中华人民共和国农业部公告第2045号《饲料添加剂品种目录（2013）》
3原料要求
生产产品所用原料应符合《饲料原料目录》的规定，所用添加物应符合《饲料添加剂品种目录（2013）》的规定，严禁使用国家明令禁止的添加物和化学制品。

4技术要求
4.1感官
液态，色泽一致，久置有少量沉淀，无发霉变质及异味、异嗅。

4.2pH值
pH值应为3.0～7.0。

4.3卫生指标
总砷不大于10mg/L，铅不大于20mg/L，霉菌总数不大于4.0×104cfu/ml，黄曲霉毒素B1不大于10ug/L，沙门氏菌不得检出。

4.4主要营养成分
表1
产品名称
混合型饲料添加剂液态溶菌酶
Ⅰ型Ⅱ型Ⅲ型Ⅳ型
溶菌酶，u/ml≥100≥500≥1000≥2000 5试验方法
5.1感官
取适量样品，在非阳光直射条件下，观其色泽、形态，嗅其气味。

5.2pH值
pH值的测定按GB/T9724执行。

5.3溶菌酶
溶菌酶的测定按附录A执行。

5.4总砷
总砷的测定按GB/T13079执行。

5.5铅
铅的测定按GB/T13080执行。

5.6霉菌总数
霉菌总数的测定按GB/T13092执行。

5.7沙门氏菌
沙门氏菌的测定按GB/T13091执行。

5.8黄曲霉毒素B1
黄曲霉毒素B1的测定按GB/T17480执行。

6检验规则
6.1批次
以同批原料、同一配方、相同设备的每日生产量为一个批次。

6.2采样
按GB/T14699.1执行。

6.3检验
6.3.1出厂检验
出厂产品由本公司质检部门负责检验，检验项目为感官、pH值和溶菌酶。

产品检验合格后方可出厂，每批出厂产品应附有质量检验合格证（章）和使用说明。

6.3.2型式检验
型式检验为全项目检验，每年不得少于一次。

如有下列情况之一时，应进行型式检验：
a)主要原、辅材料，配方，生产工艺或设备发生较大改变时；
b)停产半年以上再恢复生产时；
c)出厂检验结果与上次型式检验结果有较大差异时；
d)国家有关部门监督检验与抽查时。

6.4判定规则
检测结果判定的允许误差按GB/T18823执行。

6.5复检规则
产品在检验中如有一项指标不符合本标准时，应重新加倍抽样进行复检。

复检结果中仍有一项指标不符合本标准时，则该批产品判为不合格品。

7标签、包装、运输和贮存
7.1标签
按GB10648执行。

7.2包装
包装物采用无毒、无害，对产品质量无影响的材料。

包装规格（净含量）为：100ml、200ml、500ml、1L、2L、5L、10L，也可根据用户提出的净含量要求进行包装。

包装净含量允许误差应符合《定量包装商品计量监督管理办法》的规定。

7.3运输
产品在运输过程中应防止日晒雨淋、包装破损，严禁与有毒、有害物质混运。

7.4贮存
产品应贮存于阴凉、通风、干燥处，严禁与有毒、有害物质混贮。

在上述条件下，自生产之日起，产品保质期为8个月。

附录A
（规范性附录）
溶菌酶活力的测定
A.1原理
在一定浓度的浑浊溶液中，溶菌酶可以水解细菌细胞壁上的肽聚糖，从而使细菌裂解而浓度降低，透光度增强，因此可以根据其透光度的变化来测定溶菌酶的含量。

A.2试剂和材料
除非另有说明，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂；蒸馏水或去离子水或符合GB/T6682中规定的三级水或相当纯度的水。

试验中所用试剂、制品，均按GB/T603的规定制备。

A.3仪器和设备
A.3.1移液枪：精度为5ul，量程为50～1000ul。

A.3.2分析天平：感量0.0001g
A.3.3酸度计
A.3.4匀浆器
A.3.5紫外可见分光光度
A.3.6恒温水浴锅
A.3.7涡旋混合器
A.4分析步骤
A.4.1底物的制备
菌种为溶菌小球菌，将其接种与营养琼脂培养基上，置35℃±2℃培养48小时，用生理盐水将菌体洗下，用纱布滤过，滤液离心后，倾去上层清夜，再加生理盐水适量，如此反复洗涤菌体数次，取下层沉淀，供测定用；或者将洗涤后的菌体用少量水悬浮，冰冻干燥，得淡黄色粉末，供测定用，可保存一年。

或直接购买成品。

A.4.2试样溶液的制备
精密称取式样适量（约相当于溶菌酶活力125000IU)，置100ml量瓶中，加磷酸盐缓冲液溶解并稀释至刻度，摇匀；精密量取5ml置25ml量瓶中，用磷酸盐缓冲液稀释至刻度，摇匀，即得。

A.4.3底物悬浮液的制备
另外称取底物（即菌体）5-15mg，加磷酸盐缓冲液4-5ml，在匀浆器内研磨5分钟，倾出，用磷酸盐缓冲液稀释到适当体积，使悬浮液在25℃±0.1℃时，用磷酸盐缓冲液调零，用分光光度法，在450nm 波长处测定吸收度为0.65-0.75时（临用前配制)，进行酶活力测定。

A.4.4测定
精密量取25℃±0.1℃底物悬浮液3ml，放入比色皿中，用分光光度法，在450nm 波长处测定吸收度，作为零时读数，然后量取25℃±0.1℃时的试样0.15ml 溶液，加入上述比色皿中，迅速混合，用秒表计算时间，至60秒时在测定吸收度；同时精密量取磷酸盐缓冲液0.15ml，同法操作，作为空白试验，测得零秒的读数及60秒的读数。

A.4.5结果计算
用于酶解反应的稀释酶液中溶菌酶活力按（A.1）计算；
（A 0-A）-（a 0-a)
X=
————-—--—×103
M
式中：
X：式样中的溶菌酶的活力的，单位为每毫克（u/mg）
A 0：试样零时吸收度；A：试样60秒时吸收度；a 0：空白零时吸收度；a ：空白60秒时吸收度；
M ：测定液中试样的重量，单位为毫克（mg）
103：转化因子。

每个试样取两个平行样进行测定，以其算平均值为结果，结果保留整数。

A.4.6重复性
同一试样两个平行测定值的相对偏差，不超过10%。