2010
分 子实 生验
物 16 学
操作步骤：
1、图像采集
1）将电泳样品放入分析装置中
2）打开电脑，运行Smart View 软件，单击“Import”键进入
图像获取项目栏，选择“获取视频图像”键，进行图像采集
3）选 择紫外或可见光源，在图像采集窗口中调节好图像大
小、亮度及焦距
4）单击“采集图像”键，根据图像质量选择好优化摄影时间
3）放入样品，盖上盖子;
4）在所建用户名下按“run”键，找到设定的程序，
按“start”键启动程序;
5）运行结束后按“stop”键停止运行，取出样品，关 2010
分 子实
闭电源。
生验 物
13 学
如何设置一个PCR程序：
1、预变性：可用94～95℃，2～10min,一般用 5min。
2、变性：一般用94℃，30s~2min,一般45s~1min。
物 3学
微量移液器是连续可调的、计量和转移液体的专用仪器， 其装有直接读数容量计。
微量移液器有多种规格，在移液器量程范围内能连续调 节读数。
0.5～10μl
10～100μl
常见规格 20～200μl
100～1000μl
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物 4学
量液的操作步骤：
第一停点 第二停点
A 保持微量移液器垂直，将按钮压至第一停点；
B 微量移液器头尖端浸入溶液，缓慢释放按钮；
C 保持微量移液器垂直，将微量移液器头与容器壁接触，慢
慢压下按钮至第一停点； D 压至第二停点把溶液完全释放出； E 释放按钮回原状。
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物 5学
量液操作注意问题：
1． 未装吸嘴的微量移液器绝对不可用来吸取任何液体。 2． 一定要在允许量程范围内设定容量，千万不要将读 数的调节超出其适用的刻度范围，否则会造成损坏。 3． 不要横放或倒拿带有残余液体吸嘴的移液器。 4． 不要用大量程的移液器移取小体积样品。
3、退火：温度自定，30s~2min。
4、延伸：72℃，对于(1kb=1min,每增加1kb加1min)。
5、循环数：一般25～35个循环(2,3,4步循环）。
6、最终延伸：72℃，5～15min。
7、保存：4℃，时间设为0。
8、END。
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物 14 学
FR-980生物电泳图像分析系统
3、关闭操作系统
（1）关闭紫外/可见光。
（2）退出软件界面。
（3）关闭紫外与可见分析装置的电源。
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物 19 学
注意事项：
1、 不要戴“脏”手套触摸电脑鼠标、键盘及其它位置； 2、 不要戴“脏”手套触摸仓门和灯箱电源开关； 3、 不要戴“脏”手套触摸外接电源开关； 4、在图像获取过程中，若通过软件打开紫外/可见光，则
（一般情况下在12秒左右），即开始采集。
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物 17 学
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物 18 学
2、图像保存
单击“System 键”选择“另保存图像为”键，实验日期，实验摘要等
信息，按“保存”键完成图像文件登记，同时出现“另保存图
像为”窗口，输入图像名，保存图像至桌面。
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物 15 学
系统简介：
系统可以通过紫外/可见光分析装置及透光扫描仪直接 获得核酸、蛋白质凝胶电泳图像。系统配置有 SmartView生物电泳图像分析软件，可以进行密度扫 描、密度定量、分子量计算等电泳分析。此外，该系统 含有多种图像滤波器，可降低图像的噪音，从而获得较 清晰的图像。
➢基因片段的分离、酶蛋白的沉淀和回收以及其它生物样品
的分离制备实验中都离不开低温离心技术
➢本实验室所用离心机:台式高速离心机（ Thermo ），配有
角式转头：24×1.5ml；极限转速13000rpm ;台式低温高速
离心机（sigma),极限转速20000rpm。
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物 8学
台式高速离心机使用步骤
1、把离心机放置于平面桌或平面台上，检查离心机是否 放置平稳。 2、将离心管对称放入转子内，且要事先平衡。 3、锁紧门盖。 4、插上电源插座，按下电源开关。 5、设置转子号、转速、时间： （常用，最高转速为13000r/min，时间最长为20min）； 注意：对应的转子不可超速使用，否则对试管或转子有损坏。 6、当转子停转后，打开门盖取出离心管，关断电源开关。
5、离心机彻底停止后，才可开盖，取样。
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物 10 学
PCR仪
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物 11 学
PCR仪，也称DNA热循环仪、基因扩增仪，能使 一对寡核苷酸引物结合到正负DNA链上的靶序列两 侧，从而酶促合成拷贝数为百万倍的靶序列DNA片 段，它的每一循环包括DNA变性、复性、延伸三个 反应。
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物 9学
注意事项：
1、离心机在运转时，不得移动离心机，不要打开门盖。
2、安放离心机的台面应坚实平整，四只橡胶机脚都应与 台面接触和均匀受力，以免产生振动。
3、离心管加液要平衡，若加液差异过大运转时会产生大 的振动，此时应停机检查，使加液符合要求，离心试管必 须对称放入。
4、若运转时有离心试管破裂，会引起较大振动应立即停 机处理。
5. 移液器使用完后，将刻度调到最大刻度，收藏。
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物 6学
台式高速离心机
离心机的分类 低速：每分钟几千转 高速：每分钟1 ~ 3万转 超速：每分钟3万转以上
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物 7学
离心机的功能：分离，纯化
低速：细胞等大分子 高速：DNA，蛋白等 超速: 病毒，蛋白，细胞器等
PCR仪主要应用于基础研究和应用研究等许多领域，
如基因分析、序列分析、进化分析、临床诊断、法医
学等。
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物 12 学
操作程序:
1）开机：打开电源，显示主界面；
2）创建程序：使用”create”输入新程序（包括PCR 循
环数，预变性、变性、复性、延伸的时间和温
度），保存程序（包括用户名和方法名）;
实验一
分子生物学实验室常用 仪器设备简介及操作
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物 1学
实验室主要仪器，设备的简介及使用方法
➢ 微量移液器 ➢ 高速台式离心机 ➢ PCR仪 ➢ 凝胶成像系统 ➢ 电泳仪 ➢ 恒温气浴摇床 ➢ 超净工作台 ➢ 灭菌锅
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物 2学
微量移液器
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