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细胞遗传学实验一X染色体观察
3、X染色体的失活是随机性的: 父源的和母源X染色体失活的机会各 占1/2,一旦某一特定细胞内失活的X 染色体是父源的,那么,由这个细胞 所克隆的细胞群内,每一个细胞的X 染色质都是父源的,反之都是母源 的;
Lyon假说(Lyon hypothesis)
4、杂合体雌性在伴性基因的作用上是 嵌合体(mosaic):某些细胞中来自父方 的伴性基因表达,有些细胞中来自母 方的伴性基因表达,这两类细胞随机 地镶嵌存在; 5、在形成生殖细胞时,失活的X染色 体重新激活。
性染色质(sex
chromatin)
Lyon假说(Lyon hypothesis)
1961年Lyon提出: 1、雌性哺乳动物体细胞内的两条X 染色体,仅有一条有活性,另一条无 转录活性,在间期异固缩成为X染色 质; 2、失活发生于胚胎早期(人胚第16 天);
Lyon假说(Lyon hypothesis)
二、实验原理
相同表型的一种遗传机制的观点。 1949年Barr等人发现在猫的雌性个体 内,神经细胞核膜内缘有一染色很深 的小体,而雄性个体细胞中则没有。 后发现在哺乳动物雌性间期细胞核内 均有这一小体而雄性则没有,而称为 X染色质(或Barr小体)。
X染色质(X-chromatin)
Barr小体,在雌性哺乳类间期细胞中 都有这种特征性小体; 在人类女性口腔上皮细胞中X小体一 般为1~1.5μm,呈三角形或椭圆形; X染色质数=X染色体数-1
三、试验材料
人体口腔上皮细胞 人体毛囊细胞
四、试剂与器材
1、试剂 0.85%生理盐水;1mol/L或 5mol/L盐酸或浓盐酸和95%乙醇1:1的 混合液;品红染液。 2、器材 显微镜;载玻片;盖玻片; 吸水纸;无菌牙签;计数器等。
五、试验过程
1、口腔粘膜细胞Barr小体显示法 取材前食用水漱口→以无菌牙签刮取口 腔颊部黏膜(第一次的刮取物弃去) →将 刮取物均匀涂在载玻片上,空气干燥→ 品红染色10~15分钟→倾斜玻片倒掉染液 →吸水纸拭干多余染液→显微镜下观察。
实验一 人体Barr小体观察
授课教师 邢沈阳
一、实验目的与要求
1、学习人类X染色体的检测方法。 2、认识雌性哺乳动物X染色体失活 假说和剂量补偿效应的机制
二、实验原理
在XY型性别决定的生物个体中,雌 性个体的细胞中有两条X染色体,而雌 性个体的细胞中仅有一条X染色体。由 于在两性个体中X染色体的数量是不相 等的,因而雌雄个体X染色体上的基因 产物也可能是不相等的。 针对这一现象Muller于1932年提出 剂量补偿效应,说明可以使具有两份基 因的个体和具有一份基因的个体表现出
五、试验过程
2、发根毛囊细胞Barr小体显示法 1)取带有发根的头发,2~3cm,围绕发 根部的1圈长2~3cm的白色物体即是毛 囊团,将其放置于载玻片上; 2)在毛囊细胞处滴加一滴浓盐酸和95% 乙醇1:1的混合液,约10分钟后可使毛 囊细胞得到充分软化;
五、试验过程
2、发根毛囊细胞Barr小体显示法 3) 以清水冲洗2~3次,将酸解液冲洗干 净; 4)拿起发根得到梢部,将其上毛囊细胞 轻轻蹭于另一干净载玻片上(一根发根 的毛囊细胞可以转移到3~4张载玻片 上); 5)滴加1滴染液染色10分钟后镜检。
Байду номын сангаас
六、试验结果
观察100个细胞,统计X小体的出镜率
七、注意事项
1、取材不要来回刮,要向着一个方向 刮一次; 2、涂片不要太厚; 3、不要让毛囊细胞堆积,要充分转移 毛囊细胞; 4、染色液不要滴多,以免细胞丢失。
七、试验报告
1、你统计的X小体的频率如何?解释 为什么不是所有的细胞都有X小体? 2、找以典型的X小体图像拍照。