第二章基因工程习题一、选择题1. 基因工程的单元操作顺序是【】Ａ增，转，检，切，接Ｂ切，接，转，增，检Ｃ接，转，增，检，切Ｄ检，切，接，增，转Ｅ切，接，增，转，检2. 根据当今生命科学理论，基因工程的用途是【】I 分离纯化基因II 大量生产生物分子III 构建新型物种IV 提高基因重组效率ＡI + II + IIIＢI + II + IVＣI + III + IVＤII + III + IVＥI + II + III + IV3. 根据基因工程的定义，下列各名词中不能替代基因工程的是【】Ａ基因诱变Ｂ分子克隆ＣDNA重组Ｄ遗传工程Ｅ基因无性繁殖4. 下列有关基因的叙述，错误的是【】Ａ蛋白质是基因表达的唯一产物Ｂ基因是DNA 链上具有编码功能的片段Ｃ基因也可以是RNAＤ基因突变不一定导致其表达产物改变结构Ｅ基因具有方向性5. 天然Pst I 限制性内切酶的来源是【】ＡBacillus amyloliquefaciensＢEscherichia coliＣHaemophilus influenzaeＤProvidencia stuartiiＥStreptomyces lividans6. 下列黏性末端属于同种内切酶切割而成的是【】A ①②B ①③C ①④D ②③7. 若载体DNA 用M 酶切开，则下列五种带有N 酶粘性末端的外源DNA 片段中，能直接与载体拼接的是【】M NＡA/AGCTT T/TCGAAＢC/CATGG ACATG/TＣCCC/GGG G/GGCCCＤG/GATCC A/GATCTＥGAGCT/C G/AGCTC8. T4 -DNA 连接酶是通过形成磷酸二酯键将两段DNA 片段连接在一起，其底物的关键基团是【】Ａ2' -OH 和5' -PＢ2' -OH 和3' -PＣ3' -OH 和2' -PＤ3' -OH 和5' -PＥ5' -OH 和3' -P9.下列哪一种酶作用时需要引物？B 末端转移酶C 反转录酶D DNA连接酶10. 下列有关质粒分子生物学的叙述，错误的是【】Ａ质粒是共价环状的双链DNA 分子Ｂ天然质粒一般不含有限制性内切酶的识别序列Ｃ质粒在宿主细胞内能独立于染色体DNA 自主复制Ｄ松弛复制型的质粒可用氯霉素扩增Ｅ质粒并非其宿主细胞生长所必需11. 带有多个不同种复制起始区的质粒是【】Ａ穿梭质粒Ｂ表达质粒Ｃ探针质粒Ｄ整合质粒Ｅ多拷贝质粒12. 下列各常用载体的装载量排列顺序，正确的是【】ＡCosmid > λ-DNA > PlasmidＢλ-DNA > Cosmid > PlasmidＣPlasmid >λ-DNA > CosmidＤCosmid > Plasmid >λ-DNAＥλ-DNA > Plasmid > Cosmid13. 目前在高等动物基因工程中广泛使用的载体是【】Ａ质粒DNAＢ噬菌体DNAＣ病毒DNAＤ线粒体DNAＥ叶绿体DNA14. 若某质粒带有lacZ 标记基因，那么与之相匹配的筛选方法是在筛选培养基中加入【】Ａ半乳糖Ｂ葡萄糖Ｄ5- 溴-4- 氯-3- 吲哚基- b -D- 半乳糖苷（X-gal ）Ｅ异丙基巯基- b - 半乳糖苷（IPTG ）15. 质粒是基因工程中最常用的运载体，它的主要特点是（）①能自主复制②不能自主复制③结构很小④蛋白质⑤环状RNA ⑥环状DNA⑦能“友好”地“借居”A ①③⑤⑦B ②④⑥C ①③⑥⑦D ②③⑥⑦16. 双脱氧末端终止法测定DNA 序列是基于【】ＡDNA 的聚合反应ＢDNA 的连接反应ＣDNA 的降解反应Ｄ特殊的DNA 连接酶Ｅ聚合单体2' 和5' 位的脱氧17. 下列三种方法中，能有效区分重组子与非重组子的是【】I 限制性酶切II PCR 扩增III 抗药性筛选ＡIＢI + IIＣI + IIIＤII + IIIＥI + II + III18. 鸟枪法克隆目的基因的战略适用于【】Ａ原核细菌Ｂ酵母菌Ｃ丝状真菌Ｄ植物Ｅ人类19. cDNA 第一链合成所需的引物是【】ＡPoly AＢPoly CＣPoly GＤPoly TＥ发夹结构20. Taq DNA 聚合酶的发现使得PCR 技术的广泛运用成为可能，这是因为【】ＡTaq DNA 聚合酶能有效地变性基因扩增产物ＢTaq DNA 聚合酶催化的聚和反应不需要引物ＣTaq DNA 聚合酶具有极强的聚和活性ＤTaq DNA 聚合酶能使多轮扩增反应连续化ＥTaq DNA 聚合酶能使扩增反应在DNA 变性条件下进行21. 为了利用PCR 技术扩增下列染色体DNA 片段上的虚线部分，应选用的引物顺序是【】ＡI + IIＢI + IIIＣI + IVＤII + IIIＥII + IV22. 构建基因文库一般使用的载体是【】I 质粒IIλ-DNA III CosmidＡIＢIIＣIIIＥI + II + III23. 强化基因转录的元件是【】Ａ密码子Ｂ复制子Ｃ启动子Ｄ内含子Ｅ外显子24. 启动子的特征之一是【】ＡGC 富积区ＢTATA BoxＣ转录起始位点Ｄ长度平均1 kbＥ含有某些稀有碱基25. 下列基因调控元件中属于反式调控元件的是【】Ａ阻遏蛋白Ｂ启动子Ｃ操作子Ｄ终止子Ｅ增强子26. 包涵体是一种【】Ａ受体细胞中难溶于水的蛋白颗粒Ｂ大肠杆菌的亚细胞结构Ｃ噬菌体或病毒DNA 的体外包装颗粒Ｄ用于转化动物细胞的脂质体Ｅ外源基因表达产物的混合物27. 外源基因在大肠杆菌中以融合蛋白的形式表达的优点是【】I 融合基因能稳定扩增II 融合蛋白能抗蛋白酶的降解III 表达产物易于亲和层析分离ＡIIIＢI + IIＣI + IIIＥI + II + III28. 第二代基因工程是指【】Ａ途径工程Ｂ代谢工程Ｃ蛋白质工程ＤRNA 基因工程Ｅ细胞器基因工程29. 基因工程菌中重组质粒的丢失机制是【】Ａ重组质粒渗透至细胞外Ｂ重组质粒被细胞内核酸酶降解Ｃ重组质粒在细胞分裂时不均匀分配Ｄ重组质粒杀死受体细胞Ｅ重组质粒刺激受体细胞提高其通透性30. 利用毛细管作用原理，将凝胶电泳分离后的DNA片段转移至硝酸纤维素膜上并根据核酸杂交原理进行分析的技术是【】ＡWestern 印迹转移技术ＢNorthern 印迹转移技术Ｃ基因的表现型分析法ＤSouthern 印迹转移技术31. 在翻译过程中．mRNA必需首先与核糖体相结合才能进行蛋白质合成。
在原核生物中，mRNA分子上有两个核糖体结合位点，一个是起始密码AUG，另一个是【】Ａ启动子Ｂ调节基因ＣSD序列Ｄ终止子1、Ⅱ型限制性内切酶可特异性地识别并进行切割。
如Bst BⅠ(TT CGAA）消化可产生末端，PstⅠ（CTGCA G）消化可产生末端，而SmaⅠ（CCC GGG）消化产生末端。
2、识别顺序相同但切割位点不同者称酶，识别顺序与切割方式均相同者称酶，来源与识别顺序均不同，但切割后形成的限制性片段有相同的粘性末端，称酶。
3、受体细胞经过一些特殊方法（如：CaCl2等化学试剂法）的处理后，细胞膜的通透性发生变化，成为能容许有外源DNA的载体分子通过，这种细胞称为。
4、在翻译过程中，mRNA必需首先与核糖体相结合才能进行蛋白质合成。
在原核生物中，mRNA分子上有两个核糖体结合位点，一个是，另一个是。
5、在提取分离DNA的过程中，加入酚-氯仿、去垢剂或酶的目的是，使用金属离子螯合剂如EDTA等的原因是。
在小批量碱变性提取质粒过程中加入醇溶液的目的是，加入Rnase的目的是。
6、PCR的全称是，它是一种在体外模拟DNA复制方式选择性地扩增DNA特殊区域的技术。
它是在四种存在下，以寡聚核苷酸为引物及为模板，经DNA聚合酶催化合成DNA互补链的过程，其基本反应步骤为、和，并循环n次，达到扩增目的。
7、采用光导原位合成或微量点样等方法，将大量生物大分子或其他生物样品有序地固化于支持物表面，然后与已标记的待测生物样品中靶分子杂交，通过特定仪器对杂交信号的强度进行快速、并行、高效地检测分析，从而判断样品中靶分子的数量的技术称为，根据固定的探针不同，可分为、、和组织芯片。
该技术具有高通量、快速高效、高度灵敏等特点。
10、根据Southern blot的结果可以说明，Northern blot 则用于，而Western blot的结果可以说明。
11、基因工程中用来获得有功能的异源蛋白质的体系称为。
12、用火药爆炸或者高压气体加速将包裹了DNA的球状金粉或者钨粉颗粒直接送入完整的植物组织或者细胞中，这一方法称为。
1、基因工程的操作过程的主要步骤包括哪些？2、什么是限制性核酸内切酶？第二型限制酶有何特点？3、分析影响限制性内切酶酶切的因素有哪些？4、一个典型的原核表达质粒的主要元件有哪些？5、以人工构建的pBR322质粒为例说明基因工程载体的特点。
6、小批量碱变性提取质粒DNA的原理与基本过程如何？7、什么是基因文库？基因组文库与cDNA文库制备方法有何区别？8、PCR的定义、原理、方法？在生命科学领域有何具体用途？9、琼脂糖凝胶电泳分离DNA的原理是什么？10、什么是原位杂交技术？其基本过程如何？11、什么是启动子?什么是SD序列？12、什么是操纵子？请用简图表示操纵子的基本结构并以乳糖操纵子负调控系统（阻遏蛋白调控作用）为例说明其功能。
13、为什么用原核表达系统表达真核生物的蛋白质时，克隆的真核基因不能来自基因组文库？真核基因应如何获得？14、如何提高真核基因在原核宿主中的表达效率？15、什么是基因诊断？基因诊断中常用的方法有哪些？试简述其中一种方法的原理。
16、名词解释：基因探针基因芯片蛋白质工程17、简述包含体形成的原因和包含体蛋白复性的主要步骤。
18、列表比较大肠杆菌、酵母、昆虫细胞、哺乳动物细胞表达系统的优缺点。
19、利用基因工程菌生产有哪些特点？有什么优势？常用的宿主菌有哪些？20、在基因工程菌培养过程中为什么质粒会丢失？21、基因工程菌高表达的障碍是什么？22、与大肠杆菌相比酵母作为宿主菌有什么优点？23、现有一段A基因序列：ATG G GT CGA GAT CGT GAT ACA GAT AAT AAT TTC TCA AAG GAC CAT GGT TGG TAT TTA GCT TAT TCT ATA CCT GAC ACA GGG GGA TCC CAA A TA AGA AAA TTT TCA GCA TTA GCT AGA TAT CAT GTT AAG TTT GAG ACT TTT GCA GAG GAA AGA AAA GAA CAG TAT AAA ATA AAC ACA GCA TGG TCA AAA GAA TAT GCA AGA GGT TTT GCT AAA ACA GGA AAA TCA GTA GCT TAT GAA TTC已知：①限制性核酸内切酶识别的碱基序列如下：Nco I: CCATGG，Bam HI: GGA TCC，Eco RI: GAA TTC②上述3种限制性核酸内切酶的5’端保护性碱基情况如下：Nco I: CATG，Bam HI: CGC, Eco RI: CCG③载体pET-28 含有Nco I、Bam HI、Eco RI、Hin dⅢ、Sac I单一限制性核酸内切酶识别序列。