·论著·2012年12月第9卷第34期多发性硬化（mulitple sclerosis，MS）是一种以中枢神经系统白质脱髓鞘为主要病理特点的自身免疫性疾病，MS产生的免疫反应多认为是自身免疫细胞被激活后对髓鞘碱性蛋白（MBP）的免疫反应[1]。
MBP是构成中枢神经系统髓鞘的一种特殊蛋白质，在髓鞘形成和脑分化发育过程中起着重要作用[2]。
MS患者体内中枢神经系统的自身抗原-MBP暴露与免疫活性细胞相互作用诱导了特异的免疫应答，导致炎性髓鞘病理性脱失，游离的MBP就会进入血液中导致血液中含量升高[3]。
目前临床对MS进行脑脊液免疫学检查项目较多，但尚无一满意的特异性检查，因此，临床一般将周围血和脑脊液同时进行检查[4]。
他克莫司（FK506）是一种免疫抑制剂，除了在抑制器官移植排斥反应方面具有显著疗效外，还广泛应用于斑秃、银屑病、鱼鳞病、糖尿病、白塞病、变应性皮炎、类他克莫司对多发性硬化大鼠髓鞘碱性蛋白的动态变化及影响赵丽波张健莉付宏娟黄月萍黑龙江省医院老年神经内科，黑龙江哈尔滨150036[摘要]目的探讨他克莫司（FK506）对多发性硬化（MS）大鼠髓鞘碱性蛋白检测的动态变化及影响。
方法将试验动物随机分为两组，对照组（10只）予以实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）+生理盐水组；研究组（12只）在EAE诱导的第1～7天，每日腹腔内注射剂量为1mg/kg的FK506，其中急性发作期8只，缓解期4只。
检测研究组和对照组周围血和脑脊液髓鞘碱性蛋白（MBP）的水平，并动态观察应用他克莫司治疗前及治疗后不同时间MBP的变化情况。
结果研究组血清和脑脊液中的MBP水平均显著高于对照组（P＜0.05）。
且两组脑脊液中的MBP水平均显著高于血清中MBP水平（P＜0.05）。
研究组大鼠急性发作期及缓解期血清及脑脊液中MBP水平分别明显高于对照组（P＜0.01），且大鼠急性发作期MBP水平血清及脑脊液中均分别显著高于MS缓解期（P＜0.01）。
且大鼠脑脊液MBP和血清MBP水平呈正相关（r=0.562，P＜0.01）。
12只大鼠予以他克莫司腹腔注射后，治疗后的第3天及治疗后第7天血清和脑脊液MBP水平均较治疗前明显降低，且脑脊液MBP水平较血清MBP水平降低更明显（P＜0.01）。
结论通过检测周围血和MBP的水平，并动态观察应用他克莫司治疗前及治疗后MBP的变化情况，一方面对判断MS 预后、病情严重程度和临床诊断具有重要的临床意义，另一方面可能为预防多发性硬化的临床复发提供一种有效的新药提供指导依据。
[关键词]多发性硬化；髓鞘碱性蛋白；血液；脑脊液；大鼠[中图分类号]R744.5[文献标识码]A[文章编号]1673-7210（2012）12（a）-0016-03Influence of FK506on dynamic change of myelin basic protein in rats with multiple sclerosisZHAO Libo ZHANG Jianli FU Hongjuan HUANG YuepingDepartment of Old Age Neurology,Heilongjiang Province Hospital,Heilongjiang Province,Harbin150036,China[Abstract]Objective To explore the impact of the dynamic changes of tacrolimus for multiple sclerosis rat myelin basic protein detection.Methods Experimental animals were randomly divided into two groups,the control group were given the EAE+saline group,a total10,study group in EAE induced daily intraperitoneal injection dose for1mg/kg FK506from1 to7days,a total of12acute exacerbation of8rats,4rats in remission.We examined the level of the blood and cere-brospinal fluid myelin basic protein(MBP)and dynamic observation for12cases MS rats(study group)and10normal healthy subjects(control group).Results MBP(research group)in serum and cerebrospinal fluid were significantly higher than that of the normal control group(P<0.05).And MBP in the cerebrospinal fluid of two groups were significantly higher than the serum MBP level(P<0.05).The serum and CSF MBP level of acute exacerbation and remission period of MS rats in the research group were significantly higher than that in the control group(P<0.01),and MBP in serum and cerebrospinal fluid of acute exacerbation MS were respectively significantly higher than MS rats in remission(P<0.01).In addition to the conventional basis for symptomatic12MS rates after admission tacrolimus treatment,after treatment3days and7days, MBP level in the serum and CSF was significantly lower than before treatment,compared with serum，MBP levels in the cerebrospinal significantly decreased(P<0.01).Conclusion Dynamic observation MBP the change by detecting the level of peripheral blood and MBP and the application of tacrolimus the secretary before treatment and after treatment on the one hand,to judge MS prognosis,the severity of the disease and the clinical diagnosis has importantthe clinical significance,on the other hand,it may be an effective new drug for the prevention of multiple sclerosis clinical recurrence provide the basis for guiding.[Key words]Multiple sclerosis;Myelin basic protein;Blood;Cerebrospinal fluid;Rats[基金项目]黑龙江省科技计划项目（课题编号：GC12C305-1）。
风湿性关节炎以及多发性硬化病等自身免疫疾病的治疗，在对脊髓损伤的模型中具有保护神经，营养神经和促进神经再生和抑制T细胞增生、活化的作用。
本研究旨在通过观察利用髓鞘碱性蛋白作为抗原，复制MS的动物模型实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）豚鼠周围血和脑脊液MBP的水平，并动态观察应用他克莫司治疗前及治疗后不同时间MBP的变化情况，从而可能为预防MS的临床复发提供一种有效的新药提供指导。
1材料与方法1.1实验动物及方法豚鼠22只，雌雄各半，7~8周龄，体重200g左右，利用髓鞘碱性蛋白作为抗原，复制MS的动物模型EAE，在每只大鼠的双侧后足跖一次性皮下注射含有豚鼠MBP25μg的弗氏完全佐剂（FCA）200μL，模型制备成功的表现为急性、严重的单向病程，可自发缓解。
将试验动物随机分为两组，对照组予以EAE+生理盐水，共10只，研究组在EAE诱导的第1～7天，每日腹腔内注射剂量为1mg/kg的FK506，共12只，其中急性发作期8只，缓解期4只。
1.2统计学方法数据采用SPSS13.0进行统计学处理，计量资料采用均数±标准差（x±s）表示，组间比较采用t检验或进行方差分析，以P＜0.05为差异有统计学意义。
2结果2.1大鼠及对照组血清和脑脊液中MBP水平比较研究组大鼠血清和脑脊液中的MBP水平均显著高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。
且两组脑脊液中的MBP 水平均显著高于血清中MBP水平，差异有统计学意义（P＜0.05）。
见表1。
表1两组大鼠血清和脑脊液中MBP水平比较（x±s，ng/mL）注：与同组血清MBP比较，#P＜0.052.2大鼠急性发作期及缓解期MBP在血清及脑脊液中的变化情况比较研究组MS大鼠急性发作期及缓解期血清及脑脊液中MBP水平分别明显高于对照组，差异有高度统计学意义（P＜0.01），且MS急性发作期MBP水平血清及脑脊液中均分别显著高于MS缓解期，差异有高度统计学意义（P＜0.01），且MS大鼠其脑脊液MBP和血清MBP水平呈正相关（r= 0.562，P＜0.01）。
见表2。
2.3研究组大鼠血清和脑脊液治疗前后不同时间MBP水平的变化情况比较12只大鼠予以他克莫司注射后，结果显示，治疗后的第3天及治疗后第7天血清和脑脊液MBP水平均较治疗前明显降低（P＜0.01），且脑脊液MBP水平较血清MBP水平降低更明显，差异有统计学意义（P＜0.01），见表3。