血常规标本采集与处理程序1.目的规范血液常规检查标本的采集与处理方法,减少分析前因素对检验结果的影响,保证检验质量。
2.适用范围适用于各种血液常规检测标本的采集。
3.职责3.1 门诊和临床各科护士、门诊检验工作人员负责标本的采集。
3.2 临床护士或检验科后勤组人员负责标本的运送。
3.3 检验科负责标本的接收和处理,负责指导临床各科室如何正确采集标本。
4.程序4.1 标本采集前病人的准备4.1.1 避免剧烈运动及情绪紧张。
建议取血前采取坐位5分钟。
4.2 标本采集4.2.1 静脉采血法4.2.1.1器材:真空采血针、含EDT A·K2(3.0-4.0mg)真空采血管、消毒液、消毒棉球、压脉带。
4.2.1.2标本采集部量:2.0ml。
4.2.1.3采血部位:手臂肘部静脉。
4.2.1.4 操作程序a. 患者坐位或卧位,扎上压脉带消毒皮肤。
嘱病人握紧拳头,暴露静脉。
b.操作者以左手拇指固定静脉穿刺部位的下端,右手持真空采血针,与皮肤呈30度角的位置迅速刺破皮肤,然后适当降低角度穿破静脉壁进入静脉腔中,见回血后,解开压脉带,将针头顺势深入少许。
将采血针另一端插入真空采血管中。
c. 利用真空负压,血液自动注入抗凝管直至所需血量。
嘱患者松拳,用无菌干棉球压住伤口,拔出针头。
d. 立即将采血管轻轻颠倒5-8次,使其充分抗凝,并贴上对应病人及检测项目信息的条码。
2小时内送检。
4.2.1.5 注意事项a. 禁止在输液手臂同侧采血,同时在申请单上注明“输液时采血”。
b. 止血带使用时间应少于1分钟,以免引起血液淤滞,血液成分的改变。
c. 防止溶血,避免采血管过度震荡。
e. 正确选择抗凝管并注意抗凝剂与血液的比例。
4.2.2 毛细血管采血法4.2.2.1 器材:一次性采血针、微量吸管、小试管、玻片,75%乙醇棉球、消毒干棉球、无菌镊子。
4.2.2.2 采血量:20ul。
4.2.2.3采血部位:成人以左手无名指指端内侧为宜,半岁以上儿童以中指为好,半岁以下婴幼儿通常选择足跟或拇指采血。
4.2.2.4操作程序a. 操作者轻轻按摩采血部位,使其自然充血,用75%乙醇棉球消毒局部皮肤,自然待干。
b. 紧捏刺血部位,用一次性采血针迅速刺破皮肤,深度约2-3mm。
c. 擦去第一滴血,吸取从穿刺处自然流出的血液或从远端向指尖方向轻轻挤压的血液20ul,迅速轻轻注入已加入稀释液的小试管里。
d.用无菌玻片沾取末梢血一滴推制血片一张,用消毒干棉球压住伤口。
4.2.2.5注意事项a. 末梢采血时,挤压力不能过大,以免过多组织液混入。
b. 避开冻疮、发炎、水肿部位,以免影响结果。
4.3 标本的处理4.3.1 检测前的标本处理对临床标本进行验收,对有凝块、溶血、采血量不符合要求、无条码或无标识等不合格标本,按照《标本采集与管理程序》处理。
合格标本,常温放置,4小时内完成检测。
4.3.2 检测后标本的处理按照实验室规定,血常规标本保存3天,对超过保存期的标本,由实验室工作人员放置于专门的污物间废弃标本箱中,再由医院专门工作人员统一处理。
血液常规检验规程1.目的检测分析血液中红细胞、白细胞、血小板、血红蛋白的数量和质量,对感染、炎症、血液系统疾病等进行辅助诊断、监测治疗效果等。
2.检测项目红细胞计数、血红蛋白、红细胞比积、平均红细胞体积、平均红细胞血红蛋白含量、平均红细胞血红蛋白浓度、白细胞计数、白细胞分类、血小板计数。
3.标本的采集与运送3.1 标本类型:静脉血或手指末梢血。
3.2标本要求:标本用EDTA-K2 抗凝;静脉血标本量应达到2ml;末梢血20µl。
3.3标本运送:室温运送,4小时内完成检测。
3.4标本拒收标准:严重溶血、凝固、血量少、无条码、无标识的血液标本不能进行检测。
4.标本的检测仪器及试剂4.1 仪器:深圳mindrary公司BC—5500、BC—5300全自动血液细胞分析仪。
试剂:由mindrary公司提供包括LH溶血剂、LEO(Ⅰ)溶血剂、LBA溶血剂、LEO(Ⅱ)溶血剂、清洁液、稀释液、探头清洁液等配套试剂。
4.1.1 检测原理采用流式细胞技术,通过检测光学信号进行白细胞计数及白细胞分类测定;双鞘流电阻原理进行红细胞与血小板测定;HiCN-HGB法检测血红蛋白。
4.1.2 操作步骤4.1.2.1开放-全血模式a. 在仪器主界面点击“计数”,进入计数界面。
b. 点击计数界面“模式”,在弹出的对话框中选择“开放全血模式”。
输入分析标本的试管号,点击“CBC+5DIFF测量模式”。
c. 上下颠倒试管将试管内容物充分混匀,轻轻取下盖子,防止血液溅出。
d. 将试管放到采样针下,按吸样键,蜂鸣器响后移走试管,仪器自动执行样本分析。
e. 分析结束,结果显示在屏幕的分析结果区同时自动传入电脑LIS系统。
4.1.2.2自动-全血模式a. 在仪器主界面点击“计数”,进入计数界面。
b. 点击计数界面“工作模式”,在弹出的对话框中点击模式项的“自动—全血”按钮,进样模式为自动进样,血样模式为全血。
点击“CBC+5DIFF”测量模式。
c. 在“管架号”、“试管号”编辑框中输入起始样本的对应管架号和试管号。
点击“确定”按钮,保存输入内容并返回计数界面。
c. 将分析标本试管放入对应的试管位,将试管架放入进样器右槽。
d. 点击计数界面“开始计数”,至分析结束。
e. 分析完毕,结果直接传入电脑LIS系统。
4.1.3 室内质量控制4.1.3.1 质控品:由mindrary公司提供的配套质控品。
4.1.3.2 操作方法:选择“开放—全血”模式,质控品编号9000,计数状态为绿色图标。
将充分混匀的质控品放到采样针下,使采样针可吸入混匀后的质控物。
按吸样键,听到蜂鸣器响后移开质控物。
质控分析结束后,质控结果自动传入电脑LIS系统。
4.2 仪器:Sysmex 1800i试剂:由日本希森美康公司提供的包括稀释液、FFS、EPK、SLS、FFD、FBA的配套试剂。
4.2.1 检测原理采用电阻抗技术进行红细胞、血小板计数。
采用半导体激光器,以核酸荧光染色及流式细胞术原理进行白细胞及白细胞分类计数。
SLS-HGB原理检测血红蛋白4.2.2 操作步骤4.2.2.1 手工模式a. 检查系统是否在READY状态,点击主控程序上的手动键,在弹出的对话框中准确输入相应的标本ID号及检查组合。
b. 上下颠倒试管将试管内容物充分混匀,轻轻取下盖子,防止血液溅出。
c. 将试管放入手工吸引管,按开始键标本开始吸取。
d. 当READY LED 暗(并发出两声短音),移开试管。
e. 当READY LED 再次亮起时,准备下一个标本,重复上述步骤。
4.2.2.2 进样器模式a. 检查系统是否在READY状态,点击主控程序上的“自动进样”。
b. 在弹出的对话框中准确输入相应的标本ID号、试管架编号、试管位置编号及检查组合。
c. 将试管架放在进样器的右侧槽中,单击“进样器开始”,至分析结束。
4.2.3 质量控制确认主机上的READY LED闪烁。
将充分混匀的质控品编号9000,再按照正常标本随机插入进行分析。
结果自动传入LIS系统进行处理。
5.血细胞的显微镜检查5.1 镜检标准5.1.1 医生明确要求涂片镜检;5.1.2 仪器提示有原始或幼稚细胞、变异淋巴细胞、有核红细胞等异常需镜检;5.1.3 新生儿标本需涂片镜检;5.1.4 WBC≥20×109/L或≤2.0×109/L;5.1.5淋巴细胞≥45%,需做涂片镜检,1-4岁儿童且血细胞计数及他结果正常者除外;5.1.6 单核细胞≥15%;5.1.7 嗜酸性粒细胞≥10%;5.1.8 嗜碱性粒细胞≥3%5.1.9 PLT>500×109/L或<60×109/L;5.2.0 提示有PLT聚集,需涂片镜检;5.2 镜检步骤5.2.1 血涂片的制备5.2.1.1 在距载玻片一端1cm的位置滴加约5µl的抗凝血;末梢血直接用干净玻片蘸取。
5.2.1.2 用推片使血液沿其边缘展开,与载玻片30~40度角进行推片。
5.2.1.3 涂片完成后在空气中自燃晾干。
5.2.2 血涂片的染色5.2.2.1 染色试剂:本实验室自行改良配制的快速染液。
5.2.2.2 染色步骤a. 加干后的血涂片于伊红染液中,染色约10秒。
用清水冲洗。
b. 再把玻片加入美蓝染液中,染色1分钟。
c. 清水冲洗后,镜检。
5.2.2.3 镜检观察要求a. 将湿片在高倍镜下观察涂片、染色是否良好,否则重新涂片染色。
b. 选择涂片体尾交界、细胞分布均匀不重叠部分进行镜检。
c. 在高倍镜下辨认细胞不清楚时,必须待玻片干后用油镜观察。
5.2.2.4 镜检观察的处理a. 根据仪器报警提示的内容,确认镜下观察结果是否与仪器提示一致。
b. 发现原始及幼稚白细胞,则必须进行手工分类;如不能确定细胞种类,则报告异常细胞的比例。
c. 如果镜下发现有核红细胞,则必须对白细胞进行校正。
d. 如果镜下观察有血小板聚集,则必须手工冲池计数血小板;如果是EDT A﹒K2引起的血小板聚集,可用109mmol/L枸橼酸钠抗凝剂采集标本,结果需要进行换算。
e. 多发性骨髓瘤、冷球蛋白血症引起的红细胞聚集,可将血液用仪器稀释液稀释3倍,然后37℃水浴箱中10分钟后,立即上机检测,结果需要进行换算。
6.生物参考区间测定项目男女新生儿WBC(×109/L) 4.0~10.0 4.0~10.0 15.0~20.0RBC(×1012/L) 4.0~5.5 3.5~5.0 6.0~7.0Hb(g/L)HCT(%)MCV(fl)MCH(pg)MCHC(g/L)PLT(×109/L)120~16040.0~50.080~10027.0~34.0320~360100~360110~150 170~20035.0~45.080~10027.0~34.0320~360100~3607.白细胞分类计数参考值分类百分率(%)绝对值(×109/L)中性粒细胞50~70 2~7淋巴细胞20~40 0.8~4.0单核细胞3~8 0.12~0.80嗜酸性粒细胞嗜碱性粒细胞1~50~10.05~0.500~0.18.危急值测定项目小于或等于大于或等于WBC(×109/L) 1.0 40Hb(g/L)50 180PLT(×109/L)20 6009.临床意义9.1 中性粒细胞:中性粒细胞增多分生理性和病理性增多。
病理性增多可见于急性感染或炎症、急性失血、急性中毒及恶性肿瘤等;中性粒细胞减少可见于病毒感染、慢性理化损伤、自身免疫性疾病等。
9.2 淋巴细胞:淋巴细胞病理性增多见于某些慢性感染、肾移植手术后、白血病、再生障碍性贫血、粒细胞缺乏症等;淋巴细胞减少可见于接触放射线,应用肾上腺皮质激素或促肾上腺皮质激素,严重化脓性感染等情况。