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全血乳酸检测试剂盒(乳酸脱氢酶微板法)

全血乳酸检测试剂盒(乳酸脱氢酶微板法)
简介:
乳酸(Lactic acid ,LD)又称2-羟基丙酸是一种化合物,是一种含有羟基的羧酸,分子式是C 3H 6O 3,参与生物化学很多反应过程。

乳酸检测有化学氧化法、酶催化法、电化学法、酶电极感应器法。

全血乳酸检测试剂盒(乳酸脱氢酶比色法)其检测原理是在NAD 存在条件下,乳酸脱氢酶(LDH)催化乳酸生成丙酮酸,同时生成NADH 。

在碱性条件下显色剂与丙酮酸生成复合物,并使平衡偏向乳酸氧化为丙酮酸的方向,驱动反应完成,生成的NADH 与乳酸为等量摩尔。

通过酶标仪测定340nm 处吸光度,据此通过比色分析就可以计算出全血或血浆中LD 水平。

该试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。

组成:
操作步骤(仅供参考):
1、 配制蛋白沉淀工作液:取1瓶蛋白沉淀剂,直接加入蒸馏水至100ml ,充分混匀,即
为蛋白沉淀工作液。

4℃避光保存1周有效。

该试剂有一定腐蚀性,请小心操作。

2、 配制空白对照液:取配制好的蛋白沉淀工作液蒸馏水,混匀,即为空白对照液。

4℃避
光保存1周有效。

3、 制备无蛋白上清液:抽血前,取试管或离心管编号,分别称重(W t )并记录,加入6ml
蛋白沉淀工作液,再次分别称重(W m )并记录,冰浴或4℃保存备用。

4、 全血LD 加样操作:按照下表设置空白孔、标准孔、测定孔,溶液应按照顺序依次加入,
并注意避免产生气泡。

如果样品中的LD 浓度过高,可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。

样品的检测最好能设置平行孔。

编号 名称
TC0737 100T Storage
试剂(A): 乳酸标准(1mmol/L) 0.5ml 4℃ 避光 试剂(B): 蛋白沉淀剂 6瓶 RT 避光 试剂(C): LD Assay buffer 25ml -20℃ 避光 试剂(D): LD 显色液 D1: LD 显色液A 0.4ml -20℃ 避光 D2: LD 显色液B
2ml
-20℃ 避光
使用说明书
1份
加入物(μl)
空白孔 标准孔 测定孔 空白对照液
10


乳酸标准(1mmol/L) —10 —
无蛋白上清液——10
LD Assay buffer 200 200 200
充分混匀
LD显色液23 23 23
5、全血LD检测:室温放置,用酶标仪检测,以空白孔调零,标准孔、测定孔的340nm
吸光度(A标准、A测定),一般应数小时内检测完毕。

计算结果:
血清、血浆乳酸(mmol/L)=(A测定/A标准)×1.0×D
式中:A测定=测定管的吸光度值
A标准=标准管的吸光度值
D=(W b-W t)/(W b-W m)
也可根据NADH毫摩尔吸光度计算:血清、血浆乳酸(mmol/L)=A测定×(2.33/6.22)×(D/0.1)
参考区间:
全血乳酸0.5~1.7mmol/L(5~15mg/dl)
血浆乳酸0.54~1.82mmol/L(5.4~16mg/dl)
脑脊液乳酸0.5~1.7mmol/L(5~15mg/dl)
成年人尿液乳酸排出量 5.5~22mmol/d
注意事项:
1、本法适用于自动分析仪,分别监测测定管和标准管的吸光度升高速率,计算乳酸的浓
度。

2、如果没有分光光度计,也可以使用酶标仪测定。

3、抗凝剂用肝素钠-氟化钠较好。

抗凝血样品置于冰浴中送检,尽快分离出血浆等。

4、草酸抗凝剂对LDH有一定的抑制作用。

5、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

有效期:6个月有效。

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