题目：石蜡切片技术实验报告
学院：农学院，专业：植物学，姓名：张永丰，学号：2011202010目的
掌握石蜡切片技术，为以后的科研中切出合格的实验装片做准备。

并观察植物叶的横切面内部结构。

材料：已经固定好的女贞叶
方法与操作步骤
一、脱水：依次使用下列浓度的乙醇脱水
50%乙醇一70%乙醇一85%乙醇一95%乙醇一100%乙醇一100%乙醇每步两个小时。

二、透明：依次通过下列试剂进行透明
1、1/2无水乙醇1/2二甲苯（加少许番红粉末，对材料进行附染）两个小时
2、二甲苯两个小时
3、二甲苯一个小时
三、浸蜡：浸蜡步骤如下
1、将材料瓶中的二甲苯取出1/2,加入剩余二甲苯的体积3/2倍的石蜡液于36C 温
箱中处理35小时
2、换用纯石蜡液于60 T温箱中处理2小时，再换一次纯石蜡液处理2小时
四、包埋与切片
1、在提前准备好的纸盒中放入少量蜡液。

2、片刻后放入材料，避免形成断层还要注意材料摆放的位置和方向。

3、及时将蜡块冷却，防治形成结晶。

4、修块与粘连：将多余的石蜡切除，使蜡块成为梯形；将蜡块一正确的方向粘连
在枕木上。

5、切片：利用切片机将蜡块切成薄片。

切片厚度为8〜10卩m,以每分钟40〜
50转为宜。

6、粘片与展片：在载玻片上滴一滴黏贴剂和一滴蒸馏水用牙签涂匀，将蜡带光面
朝下固定于载玻片上，放到展片台上经加温使其充分展开。

7、干燥：将展好的片放于36 E温箱中干燥16小时
五、脱蜡：切片分别经过下列步骤进行脱蜡
二甲苯30min 1/2二甲苯1/2无水乙醇5min无水乙醇5min 95%乙醇5min
85%乙醇5min 70%乙醇5min
六、染色：染色分为番红染色和固绿染色两步
1、番红染色：将载玻片放入盛有番红染液（1%番红，70%乙醇）的染缸中染色
22小时
2、固绿复染：载玻片依次经过一下处理
70% 1min 85% 1min 95% 1min 固绿染液（0.1%固绿，95%L醇）20 秒
3、脱水：95% 1min 100% 1min 100%1min
4、透明：1/2二甲苯1/2无水乙醇1min二甲苯1min二甲苯
七、封片
中性树胶封片，干燥
八、镜检
将封好的装片在显微镜下观察，并挑选清晰的具有叶横切面典型结构特征的部位拍照。

结果与分析
一、结果分析
二、方法分析
1、包埋是材料放置的位置不正确加之材料较大，为切片带来较大困难，以致切
片效果不理想。

2、番红染色时间短，观察结果中应该是红色的部位不明显。

3、固绿复染时间短，表皮细胞染色不清晰。

4、材料固定时间过长，或者处理过程中使得材料变脆，切片时把叶的远轴面表皮
与叶片脱离，使得观察结果中的很多叶片没有远轴面表皮。