高三生物实验总结
细胞内物质或结构的检测方法
1.淀粉：碘液 (越深浓度越大)
2.还原糖: 斐林试剂。
3. CO2：Ca（OH）溶液、溴麝香草酚蓝水溶液
4.脂肪：苏丹Ⅲ
或苏丹Ⅳ染液
5.蛋白质：双缩脲试剂
6.染色体：龙胆紫、醋酸洋红溶液
：甲基绿；：吡罗红
9.线粒体：健那绿
实验药品的用途
:用于吸收CO或改变溶液的pH值 2. Ca（OH）：鉴定CO
：解离或改变溶液的pH值:提供CO
：配制生理盐水及其他不同浓度的盐溶液，可用于测定动物细胞内液浓度或用于提取DNA 6.酒精：用于洗去浮色(50%) 、消毒处理（70%)、色素提取（无水乙醇）、叶片脱色及配
制解离液（95%）
7.蔗糖：配制蔗糖溶液，用于测定植物细胞液浓度或观察质壁分离和复原
不同浓度的酒精在高中生物实验中的应用
（一）体积分数为50%的酒精
1、作用：洗去浮色。
2、应用：脂肪的检测实验
（二）体积分数为95%的酒精1、作用：解离（15%盐酸和95%酒精1∶1混合）
2、应用①观察植物细胞的有丝分裂
（三）体积分数为70%的酒精
1、作用：消毒杀菌
2、应用：微生物的培养技术、植物组织培养
（四）无水酒精1、作用：提取色素2、应用：叶绿体中色素的提取与分离
（五）工业酒精（一般是体积分数为95%的酒精）
1、作用：燃烧加热
2、应用：包括各类必须加热的实验，
(六)盐酸
①酶在不同pH下的活性：提供酸性环境
②15%的HCl和95%的酒精：解离
③观察DNA和RNA在细胞中的分布中，改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞，
同时使染色质中的DNA与蛋白质分离，有利于DNA与染色剂结合
►探究点一显微观察类实验
1．光学显微镜的使用
适用于观察生物的微观结构，如观察细胞质的流动。
(1)使用低倍镜应注意正确对光和调焦(粗、细准焦螺旋的调节)。
(2)高倍镜的使用方法包括：①低倍镜下找到清晰物像并移至视野中央。
②转动转换器，
使高倍物镜正对通光孔。
③调节细准焦螺旋至物像清晰。
2．玻片标本的制作
适用于显微观察，凡需在显微镜下观察的生物材料，必须先制成玻片标本。
包括：(1)压片法(如洋葱根尖细胞的有丝分裂)。
压片的一般过程是：取材→固定→解离(对不易分散的材料用HCl处理)→漂洗→染色→压片→观察。
(2)装片法(如高倍镜下观察叶绿体和细胞质的流动)。
其过程是：将材料放在载玻片
水滴中展平→放盖玻片时应从一侧慢慢盖在水滴上，防止气泡产生→对材料染色或改变溶液浓度→观察。
3．观察细胞质的流动处理实验
该实验需要增强细胞质的流动性，一般有三种方法可加速细胞质的流动，一是光照15～20 min，二是提高盛放黑藻的水温，三是切伤一小部分叶片。
4．观察细胞的有丝分裂实验
(1)注意取材：观察对象应选择分裂旺盛的部位(根尖、茎尖分生区)，取材必须选择在分裂
旺盛的时期，这样才能保证制作的装片可观察到较多的细胞分裂图像。
(2)本实验所用试剂及作用：①解离液：质量分数为15%的HCl和体积分数为95%的酒精
按1∶1混合，目的是使组织中的细胞分散开；②染色剂：g/mL或g/mL的龙胆紫(或醋酸洋红)。
(3)实验步骤：取材、解离、漂洗、染色、制片、观察。
(4)导致实验成败的要素：一是取材，尽量取生长点部位；二是解离时间要适宜，否则细
胞不容易分散开；三是漂洗必须彻底，否则盐酸会影响染色；四是染色时间要适宜，过深或过浅，染色体的形态和数目不易观察清楚。
4．观察植物细胞的质壁分离和复原实验
(1)取材：选取成熟的植物细胞(含有大的液泡)。
(2)试剂：质量浓度为g/mL的蔗糖溶液；质量浓度为g/mL的氯化钠溶液；质量浓度为g/mL的硝酸钾溶液。
►探究点二鉴定类实验
1．生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定
要特别注意的是斐林试剂与双缩脲试剂都由NaOH和CuSO组成，但二者有以下不同：
(1)溶液浓度不同；
(2)使用原理不同[斐林试剂作用原理：还原糖中的醛基在加热条件下能将Cu(OH)2中的Cu2还原成Cu＋，从而生成砖红色的CuO沉淀；双缩脲试剂作用原理：双缩脲在碱性溶液中能与Cu2＋结合生成紫色络合物，蛋白质分子中含有双缩脲结构相似的肽键]；(3)使用方法不同(见下表)。
2．叶绿体中色素的提取和分离
(1)区分色素提取和分离的原理
色素提取的原理——丙酮提取法：绿
叶中的色素能够溶解在有机溶剂丙
酮中，所以，可以用丙酮提取绿叶中的色素。
色素分离的原理——纸层析法：色素在层析液中的溶解度不同，溶解度高的色素随层析液在滤纸上扩散得快；反之则慢。
(2)注意事项
①滤液细线要画得细且直，以防止色素带重叠而影响分离效果；待滤液干燥后要再画一两次，目的是积累更多的色素，使分离后的色素带明显；
②分离色素时层析液不能没及滤液细线，以防止色素溶解于层析液中而无法分离；覆盖烧杯或试管加棉塞，以防止层析液挥发。
3．实验条件的控制方法
①增加水中氧气：泵入空气或吹气或放入绿色植物；
②减少水中氧气：容器密封或油膜覆盖或用凉开水；
③除去容器中CO2：密闭实验装置中放入NaOH溶液或KOH溶液；
④除去叶片中原有淀粉：置于黑暗环境一昼夜；
⑤除去叶片中叶绿素：酒精加热。
⑥避免光合作用对呼吸作用的干扰：给植株遮光；
⑦如何得到单色光：棱镜色散或彩色薄膜滤光；
⑧防止血液凝固：加入柠檬酸钠；
⑨各种细胞器的提取：细胞匀浆离心(差速离心法)
4.鉴定类实验归类比较
►探究点三调查类实验。