无限传代
2.2.1 动物细胞培养和核移植技术
2.2.1.1 动物细胞培养
3. 过程:
细胞株：原代细胞一般传至10代左右细胞生长停滞，大部分
细胞衰老死亡，少数细胞存活到40~50代，这种传代细胞为 细胞株。
细胞系：细胞株传代至50代后又出现细胞生长停滞状态，只
有部分细胞由于遗传物质的改变，使其在培养条件下可以无 限制传代，这种传代细胞为细胞系。
2.2.1 动物细胞培养和核移植技术
2.2.1.1 动物细胞培养
5、动物细胞培养与植物细胞培养的重要区别在于（ A.培养基不同； B.动物细胞培养不需要在无菌条件下进行； C.动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能； D.动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能培养成植株。 ）
2.2.1 动物细胞培养和核移植技术
C．原代细胞
D．传代细胞
2.2.1 动物细胞培养和核移植技术
2.2.1.1 动物细胞培养
3、动物细胞工程技术的基础是（ A.动物细胞融合 C.胚胎移植 ） B.单克隆抗体 D.动物细胞培养
4、用于动物细胞培养的组织和细胞大都取自胚胎或出生不久的幼 龄动物的器官或组织，其主要原因是这样的组织细胞 （ A.容易产生各种变异 C.取材十分方便 B．具有更强的全能性 D．分裂增殖的能力强 ）
2.2.1 动物细胞培养和核移植技术
2.2.1.1 动物细胞培养
1、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经
培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓疤细胞融合的是（ A.经过免疫的B淋巴细胞 ）
B.没经过免疫的T淋巴细胞
C.经过免疫的T淋巴细胞 D.没经过免疫的Ｂ淋巴细胞 2、在动物细胞培养过程中遗传物质发生改变的细胞是 （ A．细胞系 B．细胞株 ）
3. 过程:
动物胚胎或幼龄动物的组织、器官 胰蛋白酶 剪碎
（分解弹性纤维）
动物组织细胞间隙中含有 一定量的弹性纤维等蛋白 质，将细胞网络起来形成 具有一定弹性和韧性的组 织和器官。
单个细胞 加培养液 细胞悬浮液 接触抑制 10代细胞 50代细胞 传代培养 原代培养
遗传物质 未改变
细胞株 细胞系
遗传物质 已改变
2.2.1 动物细胞培养和核移植技术
2.2.1.1 动物细胞培养
1、动物细胞培养液的主要成分是什么？较植物组培培养基有何独特之处？ 主要成分：葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。 独特之处有：1、液体培养基 2、成分中有动物血清等 2、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料？ 因为这些组织或器官上的细胞生命力旺盛，分裂能力强 3、为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞？ 成块组织不利培养，分散了做成细胞悬浮液利于培养 4、动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个体？ 不能，动物细胞培养只能使细胞数目增多，不能发育成新的动物个体
2.2.1 动物细胞培养和核移植技术
1. 动物细胞培养
3. 过程:

细胞接触抑制
细胞在贴壁生长过程中，随着细胞分裂，数量不断增加，最后形 成一个单层，此时细胞间相互接触，细胞分裂和生长停止，数量 不再增加。
2.2.1 动物细胞培养和核移植技术
2.2.1.1 动物细胞培养
4. 细胞培养的条件
①无菌、无毒的环境 （添加一定量的抗生素，定期更换培养液）
2.2.1.2 动物细胞核移植技术和克隆动物
问题讨论
1、某植物非常具有观赏价值，你采取什么方法来繁殖后代，
细胞株和细胞系的区别： 细胞系的遗传物质改变，具有癌细
胞的特点，失去接触抑制，容易传代培养。
2.2.1 动物细胞培养和核移植技术
2.2.1.1 动物细胞培养
3. 过程:
原代培养：将动物组织消化后的初次培养称为原代培养。
传代培养：用胰蛋白酶将出现接触抑制的贴壁细胞从培养
瓶壁上脱离下来，制成细胞悬液，分装到多个培养瓶中继 续培养，这个过程叫传代培养。 上述过程中，在第一培养瓶中培养到接触抑制就是原代培养， 之后转移到其它培养瓶中培养就是传代培养。
2.2.1 动物细胞培养和核移植技术
2.2.1.1 动物细胞培养
3. 过程：
动物细胞培养过程示意图
2.2.1 动物细胞培养和核移植技术
2.2.1.1 动物细胞培养
3. 过程：
取动物器官和组织 幼龄动物 剪碎组织
胰蛋白酶处理 单个细胞
细胞培养
2.2.1 动物细胞培养和核移植技术
2.2.1.1 动物细胞培养
问题讨论
烧伤病人的治疗通常是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植， 但对于大面积烧伤病人来讲，健康皮肤很有限，请同学们想一 想如何来治疗该病人？
取该患者的皮肤进行细胞培养,获得足量的细胞后再移植。
2.2.1 动物细胞培养和核移植技术
2.2.1.1 动物细胞培养
1. 概念： 从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单 个细胞，然后，放在适宜的培养基中，让这些 细胞生长和增殖。 2. 原理：细胞增殖
2.2 动物细胞工程
2.2.1 动物细胞培养和核移植技术
2.2 动物细胞工程
复习提问
植物细胞工程常用的技术手段有哪些？ 植物组织培养, 植物体细胞杂交
动物细胞工程常用的技术手段： 动物细胞培养、 动物细胞融合、 动物细胞核移植、 单克隆抗体
动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。
2.2.1 动物细胞培养和核移植技术
培养基特有成分 蔗糖、植物激素 葡萄糖、动物血清
培养结果 培养目的 植物体 细胞株、细胞系
获得细胞 快速繁殖、培育 无病毒植株等 或细胞分泌蛋白
2.2.1 动物细胞培养和核移植技术
2.2.1.1 动物细胞培养
4. 动物细胞培养应用
①大规模培养生产生物制品（病毒疫苗、干扰素、单 克隆抗体） ②作为基因工程中的受体细胞 ③培养的动物细胞可以用于检测有毒物质，判断某种 物质的毒性 ④为治疗和预防癌症及其他疾病提供理论依据
②营养
（葡萄糖、氨基酸、无机盐、微量元素、动物血清、血浆等、 维生素。）
③温度和PH
36.5 +0.5度 ；PH为7.2-7.4。 ④气体环境
O2和CO2（95%空气和5% CO2 ）
2.2.1 动物细胞培养和核移植技术
2.2.1.1 动物细胞培养
5.植物细胞和动物细胞培养比较
比较项目 原理 培养基性质 植物组织培养 细胞的全能性 固体培养 基 动物细胞培养 细胞增殖 液体培养基