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制备液相色谱仪操作规程

制备液相色谱仪操作规程
1.样品准备:溶剂应使用“HPLC”级试剂、应对试样有适宜的溶解度。

进样前,配制的
溶液须用0.45µm或更小孔径的过滤头过滤。

2.依次打开A泵、B泵电源、控制器电源、PDA检测器电源。

3.打开电脑电源,至WINDOWS界面出现。

双击图标,打开软件进入操作界面。

此时
会出现一个Shimadzu CLASS-VP 窗口,双击Instrument1图标,仪器会发出“嘟”的响声,以表示建立了与计算机的连接。

随即出现主操作界面。

4.建立分析方法参数:点击图标,或用“Method/Instrument Setup”进入分析方法参数
设定画面(Instrument Setup),设置各项参数。

Pumps页面: 设定流动相的流速和组成百分比。

A相的百分比由B相算出。

参数设置结束后,点击“Download”。

5.点击PDA检测器图标或(PDA setup),进入PDA检测器参数设定对话框,设
置检测波长等参数。

6.在主菜单上选择File > Method > Save as或Save保存方法文件。

7.点击Rinse autosampler图标,清洗自动进样器2~3次,然后点击Purge Autosampler图
标,进行约25分钟的清洗。

每天第一次进样之前或每次更换流动相,都应清洗autosampler并进行Auto purge。

8.点击图标“Instrument On/Off”、“Turn pumps On/Off”和“Turn SPD-M10Avp Lamp On/Off”,启动仪器、泵和PDA检测器的灯源。

9.点击图标(Preview)预览基线。

待基线平稳,点击图标(Autozero SPD-M10Avp)和(zeros detectors)调零。

10.进样:将样品放进样品架。

○1单个进样:点击Single Run键,此时出现一对话框,在Vial中输入样品所在位置编号,自动进样架上有。

在Injection中输入所需的进样量,单位:µL。

○2连续进样:在主菜单上选择Sequence > Edit,在随即出现的对话框内输入各个样品的位置编号、重复次数、方法文件、保存路径等,编辑进样程序。

然后点击Sequence Run 键,开始测试。

11.测试结束后,用流动相以5ml/min的流速冲洗30分钟,然后点击图标“Instrument On/Off”、“Turn pumps On/Off”和“Turn SPD-M10Avp Lamp On/Off”,关闭仪器、泵和PDA检测器的灯源。

12.退出软件,关闭电脑电源,然后依次关闭PDA检测器电源、控制器电源、A泵和B泵电源。

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