1目得规范Waters e2695液相色谱仪得操作规程，正确使用本仪器保证检测工作顺利进行以及操作人员、设备、周围环境得安全。
2适用范围本指导书适用于Waters e2695液相色谱仪、2489紫外检测器及随机工作站。
3职责3、1操作人员按本规程操作仪器，对仪器进行日常维护,作使用登记。
3、2保管人员负责监督仪器操作就是否符合规程，对仪器进行定期维护,保养。
3、3科室负责人负责对仪器综合管理。
4仪器性能指标4、1、Alliance e2695 系统4.1.1泵/溶剂管理系统:相互独立控制得线性双柱塞驱动装置，双压力传感器反馈回路, 无脉动，无需混合器与阻尼器。
4.1.1、1溶剂数:44.1.1、2流速范围:0、001-10. OOOml/min,以0、001ml 为增量4.1.1、3流速精度:±0、075%RSD4.1.1、4流速准确度:±1、0%RSD4.1.1、5操作压力:0-6000psi(0-410bar)，可设上，下限4.1.1、6混合范围:0、0-100. 0%,以1%増量4.1.1、7梯度准确度:土0、5%,不随反压变化4.1.1、8梯度精度:±0、15%,不随反压变化4.1.1、9压缩补偿:自动，连续4.1.1、10梯度曲线多种梯度曲线：线生凸线与凹线等11种4.1.1、U系统体积:v 650pL,不随反压变化4.1.2自动进样器/样品管理系统：4.1.2、1样品盘数:120位，分5个样品盘，每个样品盘可放置24个2ml样品瓶4.1.2、2进样次数:每个样品可进样1到99次4.1.2、3进样精度:<0、5%RSD4.1.2、4样品污染度:<0、1%4.1.2、5进样准确度:±luL4.1.2、6进样体积:0、1 to 100 uL4.1.2、7进样线性度:> 0、999 coefficient of deviation4.1.3在线柱塞清洗装置：可在线清洗柱塞杆，可防止因缓冲盐溶液结晶而造成得堵塞，延长密封圈得使用寿命。
4.1.4在线脱气装置：4.1.5柱温箱：4.1.5、1温度设定范围:室温至65°C4.1.5、2温度稳定tt：±0.15°C4.1.5、3柱容量:4 根7、8X300 柱4、2检测器：4、2、1 2489双波长紫外检测器双通道紫外检测器，可进行双波长同时测定;最新专利梯形狭缝池设计，确保低噪音，高灵敏度，宽线性范围jMaxplotRatioplot优化灵敏度，检测共流出物杂质，可作简单峰纯度鉴定。
421、1 波长范E：190-700nm421、2灯:氛灯，具有灯优化软件，可以延长灯得使用寿命,可编程控制灯得开关421、3波长准确度:±1、Onm4.2.1、4波长重现性:±0、lnm421、5光谱带宽:5nm4.2.1、6 噪音:5X10-6AU421、7 漂移:"X lCHAU/hr4.2.1、8 线性范围:<5% at 2、5 AU421、9流通池:池长10mm,池体积10ul421、10采集速率:80Hz5操作规程5、1操作前准备5.1.1色谱柱得检查与安装首先打开柱温箱门瞧就是否就是所需用得色谱柱，若不就是则旋下色谱柱螺母，卸下色谱柱，马上用死堵堵上。
取出所需色谱柱，两端用螺母旋紧，固定在卡槽上，注意色谱柱得方向，不能装反。
5.1.2溶剂得准备。
5.1.2、1甲醇或乙睛必须用HPLC纯,其她无机试剂也最好用HPLC纯，且需经过0、45ym滤膜溶剂过滤装置过滤。
试剂得纯净非常重要。
必须要采用超纯水,可以用哇哈哈纯净水替代。
5、2主机操作5.2.1灌装及清洗系统521、1当真空脱气机第一次使用或当真空管就是空得,或当改变溶剂，且当前溶剂与真空管中溶剂不相溶时，应当灌装清洗系统。
5.2.1、2如果使用易挥发得混合溶剂或改变溶剂时，若系统长时间关机（比如，隔夜）灌装系统推荐将泵得流速控制在高水平（3-5ml/min）o5.2.1、3使用注射器灌装系统（干灌装）:点击仪器面板上"Menu/status"按钮，选择"Direct Function"撚后点击"d「y prime"选择欲灌装得通道并逆时针方向旋开灌装 /排放阀，将专用注射器插入灌装/排放阀入口内，拉动注射器活塞吸入大约10毫升灌装液或直到管路中不在有气泡为止。
灌装完成后顺时针方向拧紧灌装/排放阀。
5.2.1、4首次灌装系统时,使用干灌装并使用异丙醇、甲醇、乙醇作为灌装溶剂。
5.2.1、5置换管路中得流动相，使用湿灌装:点击仪器面板"Menu/status”按钮，选择"Direct Function”，然后点击"wet prime"选择欲灌装得通道。
5.2.1、6如果当前管路中溶剂就是有机得或水而当前流动相也为有机溶剂或为水，在能互相溶解得情况下，用流动相作为灌装溶剂。
5.2.1、7如果当前管路中溶剂就是有机得或水而当前流动相也为有机溶剂或为水，但不能互相溶解得情况下，使用异丙醇灌装系统。
5.2.1、8如果管路中溶剂为有机得而当前流动相为缓冲盐或管路中为缓冲盐而流动相为有机溶剂时，使用10%异丙醇、甲醇、乙醇灌装系统。
5、3优化泵得性能531总就是把存放溶剂瓶得溶剂瓶架放在泵得顶部（或在相对于泵较高得位置）。
5、3、2当使用盐溶液得时候，常需要用水冲洗所有流路。
这样就可以将阀门端口得沉淀得盐冲洗掉。
在运行泵之前，用至少两倍体积（30ml）得水冲洗真空脱气机，特别就是当泵关闭较长时间时或者通道中使用易挥发混合溶剂时。
533当基线长时间不能处于稳定状态时，通常情况下应考虑溶剂进口过滤器就是否堵塞。
当溶剂过滤器堵塞时，应将其从溶剂瓶中取出并将其放入30%硝酸溶液中超声清洗30min o在将其重新装入溶剂瓶之前，必须用MilIQ水对其进行彻底得清洗。
长期处于水或缓冲液中得过滤器常因为溶剂中藻类等微生物得生长，造成过滤器得堵塞。
因此建议在使用完此类流动相后，用50%乙睛清洗溶剂过滤器。
5.3.4当使用缓冲溶液时,在关闭系统前必须将通道中得溶剂置换成50%乙購，以防止藻类等微生物得生长。
5、4使用Empower色谱工作站5.4.1双击电脑桌面上得Empower快捷图标，出现Empower登陆窗口。
输入用户名与密码，默认账号为"system"'密码为"manager"，点击"OK"进入Empower•工作站。
单击高级键，选择用户类型与QuickStart界面。
542•选择QuickStart界面，点击“确定:然后选择待选定得操作项目以及色谱系统（仅查瞧数据可选择色谱系统中得"没有系统单击“确定”。
543编辑仪器方法与方法组543、1监视区单击方法组编辑向导5.4.3、2选择新建按钮，弹出仪器方法编辑器。
543、3单击2690/5,弹出2695编辑界面。
543、4 Alliance系统（包括2695、2795与2695D）通用编辑页面中,可选择单次输送体积。
查瞧脱气选项，确认设置正确。
流量选项中设置泵模式、总流量以及流动相配比。
选择等度或者梯度。
543、5单击2489,弹出2489编辑界面。
在波长模式中选择相应得波长模式。
单波长或者双波长，输入所需得波长，选择相应得采样速率,一般为2点/秒。
TUV检测器滤波常数" 快速"选项仅适用于单波长模式;采样速率以一个色谱峰上得采样点不少于15个点为准。
543、6点击"文件；选择"另存为；输入仪器方法名称，点击"保存";点击"文件"，选择"退出IIO5.4.3、7在被选项中选择所需得仪器方法名称，点击"下一步"。
5.4.3、8在下拉菜单中选择所需得处理方法与报告方法（如果没有合适得方法选择"无处理"、”无报告"），点击"下一步"。
543、9输入方法组名称，单击"完成"。
544进样单击平衡系统按钮进入平衡系统/监视基线界面，选择相应得仪器方法，点击平衡/监视器, 在监视窗口监视基线至系统平衡,停止系统监视状态，点击停止按钮。
单击样，点击参数编辑快捷方式进入定义单进样参数编辑界面，输入样品名、功能、方法组等参数。
点击"进样"。
5.4.5使用向导建立样品组与样品组方法545、1选择"运行样品"任务栏，然后单击"样品队列"，进入样品列表。
单击新建样品组向导,建立样品组。
选择创建样品组方法类型为"LC或PDA/MS；然后点击"定义样品板"，在"选择标准进样在那里开始"中选择合适得选项。
检查开始加载样品瓶得位置就是否正确，点击“下一步”。
5.4.5、2在描述标样中需要设置一下内容:样品组中得标样数:x;每瓶标样进样次数：X；进样体积：x ;行时间：XX；方法组xxx;点击"选项"：输入下一进样延迟时间x ;点击"下一^"。
样品数:x;每瓶样品进样次数:x;进样体积：x ; 行时间:x方法组x;点击"选项"。
输入下一进样延迟时间x;点击"下一^"。
545、3在识别标准样界面中，输入标样名称,增量后缀使用1。
在识别样品界面中，输入样品名称,增量后缀使用a。
点击"下一步"。
运行模式选项中选择"只测试"。
查瞧摘要，点击"下一步"。
［注：弹出组分编辑器,输入标样中每个组分得名称（内标不需要输入含）。
可以直接关闭该窗口，在处理数据得时候再添加。
点击"完成"，5、4、5、4在菜单栏中选择文件。
为方法组命名并保存样品组方法。
单击"样品队列"，打开运行样品窗口，点击运行当前样品组方法键，选择"运行"。
选择需运行得样品组名称，点击"运行"。
样品组运行过程中，在"正在运行"栏中正在运行以及运行完毕得样品以红色显示。
注:以向导建立得样品组首行功能一般为清除校正,一般在运行样品前删除该行或改为"平衡"。
5.4.6建立数据处理方法。
546、1单击"浏览项目"键，在"样品组"中选择目标样品组。