雷公藤内酯醇抗生育作用有效性和安全性的研究研 究 生：徐 元 萍指导老师：章汉旺 教授中文摘要目的：研究雷公藤内酯醇对雄性大鼠的抗生育作用，探讨其作用部位、有效性和毒副作用。
方法：选用健康雄性Wistar大鼠观察雷公藤内酯醇对其精子生成及对睾丸、附睾和心、肝、肾等内脏器官的影响，实验分两个阶段，第一阶段实验组给大鼠喂服雷公藤内酯醇0.05mg/kg·d，每周6d，连续8周, 用1%的二甲基亚砜DMSO 配制，对照组喂服1%二甲基亚砜DMSO，2ml/kg·d，第二阶段实验组给大鼠饲服雷公藤内酯醇0.1mg/kg·d，0.05mg/kg·d，0.03mg/kg·d，每周6d，连续4周，对照组喂服1%DMSO，每周称取体重，取材观察睾丸生精细胞凋亡情况，附睾精子活力及对心、肝、肾、睾丸的影响。
结果：实验组的精子活力明显下降，剂量≥0.05mg/kg·d的大鼠精子活力为0，睾丸切片中，高剂量组有不同程度睾丸生精细胞的损伤，其靶细胞主要为精子细胞和精母细胞，精原细胞未见损害，精子发育停滞，生精小管破坏。
睾丸内曲细精管生精上皮有损伤，管腔内上皮有脱落，对照组大鼠形态学观察未见明显异常。
应用流式细胞术检测睾丸生精细胞凋亡，实验组与对照组无显著差异，不同剂量的雷公藤内酯醇对实验组和对照组的体重影响并无显著差异。
病理切片对照2组及雷公藤内酯醇低、中、高剂量组HE及PAS染色，形态学观察心、肾未见异常，对照2组及雷公藤内酯醇中、低剂量组HE染色，形态学观察肝未见异常，仅大剂量组可见肝细胞少量空泡变性。
结论：雷公藤内酯醇是一种有效的抗生育药，对组织器官的毒性小，且避孕作用是可逆性的，但长时间的使用可引起一定的睾丸及肝脏损伤，作为避孕药推广时尚需对它的成分作进一步的改进研究。
关键词 雷公藤内酯醇 生育力 避孕 大鼠The Potency and Safety ofTriptolide in Antifertility ActionPostgraduate: Xu YuanpingSupervisor: Prof. Zhang HanwangAbstractObjective To perform further approach on the site of action and safety of triptolide alcohol in antifertility action.Methods:Heal thy male Wistar rats were selected to observe the impact of triptolide alcohol on the gonepoiesis and testicle, epididymis and the internal organs, eg.heart, liver and kidney and etc., the experiment was categorized into two phases, in the first phase, the rats of the experimental group were fed with triptolide alcohol 0.05mg/kg·d，6d per week，and continued for 8w, 1% dimethyl sulfoxide DMSO-made，1% dimethyl sulfoxide DMSO was fed in the control group，2ml/kg·d，in the second phase,the rats of the experimental group were fed with triptolide alcohol0.1mg/kg·d，0.05mg/kg·d，0.03mg/kg·d，6d per week，and continued for 4w，the rats of the control group were fed with 1%DMSO，and weighed every week, and draw the materials to observe the state of testicle androgone apoptosis, epididymis azzospermia and the impacts on the heart, liver, kidney and testicle.Results ：A zzospermia in experimental group was significantly declined, rat azzospermia (dosage≥0.05mg/kg·d) was 0，in vivo testicle contorted seminiferous tubules seminiferous epithelium was damaged, invivo lumensepithelium had some abation, no morphological anomaly was observed in the rats of control group. testicle androgone apoptosis was detected by flow cytometer, no marked difference was present between experimental group and control group，no significant deviation was found in triptolide alcohol with different dosage in the murine weights of experimental group and control group.Conclusion：Triptolide was shown to be an effective drug in antifertility and with trivial tissue toxicity,and its contraceptive effect is secure.Key words Triptolide Fertility Contraception Rats缩略词表DMSO dimethyl sulfoxide 二甲基亚砜rpm rounds per minute 每分钟转数PI Kirkegaard&PerryLaboratories 碘化丙啶Triton X-100 聚乙二醇辛基苯基醚FCM flow cytometry 流式细胞术ＮＯＳ nitric oxide synthetase 一氧化氮合成酶ＧＴＷ 雷公藤多甙PAS-H染色 para-amino salicylic acid 染色 对氨基水杨酸染色 GnRH gonadotropin-releasing hormone 促性腺激素释放激素 GTH gonadotropic hormone 促性腺激素FSH follicle stimulating hormone 卵泡刺激素LH Luteinizing Hormone 黄体生成素TNBP basic basic protein 总碱性蛋白ALP alkaline phosphatase 碱性磷酸酶Lpo lactoperoxidase 乳过氧化物酶独创性声明本人郑重声明，本学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果的总结。
尽我所知，除文中已经标明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果。
对本文的研究做出贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。
本人完全意识到本人将承担本声明引起的一切法律后果。
学位论文作者签名：徐元萍日期： 2007年 4 月 20 日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。
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（请在以上方框内打“√” ）学位论文作者签名： 徐元萍 指导教师签名：章汉旺日期： 2007 年 4 月 20 日日期： 2007年4月 20日前 言雷公藤最早见于《本草纲目拾遗》,其记载“出江西者力大,土人采之毒鱼,凡蚌螺之类亦死,性暴烈。
”清代吴其浚的《植物名实图考》中也有记载。
现所用雷公藤植物来源为卫矛科植物TripterygiumwilfordiiHook.以及同属植物昆明山海棠T.hypoglacum(Leve.)Hutch.黑蔓T.regeliSpragueetTakeda.主产于云南、贵州、浙江、安徽、湖南、福建等地,雷公藤在云南民族民间应用广泛,历史悠久。
有祛风除湿,舒筋活络,消肿止痛,杀虫解毒等功效。
近年来发现雷公藤在临床上对器官移植的排斥反应、自身免疫性疾病、肾病综合征、癌症等方面疗效显著。
临床用于风湿性关节炎、类风湿性关节炎、跌打损伤、肾小球肾炎、红斑狼疮、肾病综合征等疑难病证。
还发现有抗炎、免疫抑制、抗生育、抗肿瘤、抗菌、止痛等活性[1]。
化学成分研究雷公藤是我国重要的有毒天然药物资源,自1936年首次报道从雷公藤根部分离得到萜类色素雷公藤红素至今,国内外许多学者已从雷公藤属植物中分离出七十多种化学成分,主要类型为生物碱、二萜、三萜、倍半萜、多糖和木脂素类化合物,雷公藤中主要活性成分为二萜类和生物碱类。
雷公藤甲素(triptolide,T10单体,TP)即雷公藤内酯醇是雷公藤的主要活性成分之一,属活性最高的环氧化二萜内酯化合物。
1983年国内首次报道患者服用雷公藤后可有死精子症及少精子症，提示可能有抗生育活性。
而研究证明在雷公藤抗生育作用中，雷公藤内酯醇起着非常重要的作用。
睾丸是精子生长的部位,精子的发生主要包括精原细胞的增殖分化,精母细胞的减数分裂及精子细胞的变态过程。
附睾是精子成熟的部位,睾丸和附睾内的微环境对于精子生长、发育和成熟以及功能完成至关重要[2]。
精子在通过附睾头、体、尾运行的过程中，进一步发生形态结构的变化、物质代谢的变化、精子膜的变化，并获得运动能力、固着于透明带的能力、精卵识别的能力和与卵子结合的能力。