取3支试管，编号后按下表加入试剂：
管号
1
2
3
淀粉溶液（mL）
稀释唾液（mL）
煮沸过的.5
1
-
1.5
-
1
摇匀后，将1、3号两试管放入37℃恒温水浴中，2号试管放入冰水中。10分钟后取出（将2号管内液体分为两半），用碘化钾一碘溶液来检验1、2、3号管内淀粉被唾液淀粉酶水解的程度。记录并解释结果，将2号管剩下的一半溶液放入37℃水浴中继续保温10分钟后，再用碘液实验，观察并记录结果如何？
—
—
—
0.5
(四)、酶的专一性
（1）淀粉酶的专一性
管号
1
2
3
4
5
6
1%淀粉溶液（滴）
4
1
4
—
4
—
2%蔗糖溶液（滴）
—
4
—
4
—
4
稀释唾液（mL）
—
—
1
1
—
—
煮沸过的稀释（mL）
—
—
—
—
—
—
蒸馏水（mL）
1
—
—
—
1
1
37℃恒温水浴15分钟
Benedict试剂（mL）
1
1
1
1
1
1
沸水浴2~3分钟
观察现象。
(四)、酶的专一性
酶具有高度的专一性。本实验以唾液淀粉酶和蔗糖酶对淀粉和蔗糖的作用为例，来说明酶的专一性。
淀粉和蔗糖无还原性，唾液淀粉酶水解淀粉生成有还原性的麦芽糖，但不能催化蔗糖的水解。蔗糖酶能催化蔗糖水解产生还原性葡萄糖和果糖，但不能催化淀粉的水解。用Benedict试剂检查糖的还原性。
【实验器材】
淀粉酶是水解淀粉的糖苷键的一类酶的总称，按照其水解淀粉的作用方式，可分为α-淀粉酶和β-淀粉酶等。α-淀粉酶和β-淀粉酶是其中最主要的两种，存在于禾谷类的种子中。β-淀粉酶存在于休眠的种子中，而α-淀粉酶是在种子萌发过程中形成的。
α-淀粉酶活性是衡量小麦穗发芽的一个生理指标,α-淀粉酶活性低的品种抗穗发芽,反之则易穗发芽。目前,关于α-淀粉酶活性的测定方法很多种,活力单位的定义也各不相同,国内外测定α-淀粉酶活性的方法常用的有凝胶扩散法、3 ,5-二硝基水杨酸比色法和降落值法。这3种方法所用的材料分别是新鲜种子、萌动种子和面粉,获得的α-淀粉酶活性应该分别是延迟(内源)α-淀粉酶、萌动种子α-淀粉酶和后熟面粉的α-淀粉酶活性
(3)0.1mol/L磷酸氢二钠溶液600 mL
(4)0.1mol/L柠檬酸溶液400 mL
(5)碘化钾-碘溶液50 mL
(6)pH试纸pH=5、pH=5、pH=6.8、pH=8四种
(三)、唾液淀粉酶的活化和抑制
1、器材
(1)恒温水浴
(2)试管及试管架
2、试剂和材料
(1)0.1%淀粉溶液150 mL
蓝色
黄色
黄色
黄色
(3)、唾液淀粉酶的活化和抑制
编号
1
2
3
4
条件
37℃恒温水浴、保温10分钟
碘化钾-碘溶液(滴)
2~3
2~3
2~3
2~3
现象
深蓝色
无色
浅蓝
蓝色
(四)、酶的专一性
（1）淀粉酶的专一性
编号
1
2
3
4
5
6
第一步
37℃恒温水浴15分钟
第二步Benedict试剂（mL）
1
1
1
1
1
1
第三步
沸水浴2~3分钟
现象
浅蓝色
浅蓝色
砖红色沉淀
浅蓝色
浅蓝色
浅蓝色
（2）蔗糖酶的专一性
编号
1
2
3
4
5
6
第一步
37℃恒温水浴15分钟
第二步Benedict试剂（mL）
1
1
1
1
1
1
第三步
沸水浴2~3分钟
现象
浅蓝色
浅蓝色
浅蓝色
浅蓝色
砖红色沉淀
浅蓝色
【实验结论】
通过几个实验的实验结果，我们可以知道：
（1）温度能够影响酶的活性，在一定温度范围内，酶的活性会随温度升高而升高，但是一旦温度过高，酶的活性就会散失。
无水硫酸铜17.4g溶于100 mL热水中，冷却后稀释到150 mL。取柠檬酸钠173g，无水碳酸钠100g和600 mL水共热，溶解后冷却并加水至850 mL。再将冷却的150 mL硫酸铜溶液倾入。本试剂可长久保存。
【实验步骤】
(一)、温度对酶活力的影响
淀粉和可溶性淀粉遇碘呈蓝色。糊精按其分子的大小，遇碘可呈蓝色、紫色、暗褐色或红色。最简单的糊精遇碘不呈颜色，麦芽糖遇碘也不呈色。在不同温度下，淀粉被唾液淀粉酶水解的程度可由水解混合物遇碘呈现的颜色来判断。
(2)稀释200倍的新鲜唾液150 mL
(3)1%氯化钠溶液50 mL
(4)1%硫酸铜溶液50 mL
(5)1%硫酸钠溶液50 mL
(6)碘化钾-碘溶液100 mL
(四)、酶的专一性
1、器材
(1)恒温水浴
(2)沸水浴
(3)试管及试管架
2、试剂和材料
(1)2%蔗糖溶液150 mL
(2)溶于0.3%氯化钠的1%淀粉溶液(需新鲜配制)150 mL
(1)、温度对酶活力的影响
编号
1
2
3
2#
条件
37℃恒温水浴10分钟
冰水浴10分钟
37℃恒温水浴10分钟
先冰水浴10min,再37℃恒温水浴10分钟
现象
黄色
蓝色
深蓝色
黄色
(2)、pH对酶活性的影响
编号
1
2
3
4
条件
37℃恒温水浴10分钟
37℃恒温水浴10分钟
37℃恒温水浴10分钟
37℃恒温水浴10分钟
现象
（2）蔗糖酶的专一性
管号
1
2
3
4
5
6
1%淀粉溶液（滴）
4
—
4
—
4
—
2%蔗糖溶液（滴）
—
4
—
4
—
4
蔗糖酶溶液（mL）
—
—
1
1
—
—
煮沸过的蔗糖酶溶液（mL）
—
—
—
—
1
1
蒸馏水（mL）
1
1
—
—
—
—
37℃恒温水浴5分钟
Benedict氏试剂（mL）
1
1
1
1
1
1
沸水浴2~3分钟
观察现象。
【实验结果与数据处理】
【实验原理】
本实验由温度对酶活力的影响；PH对酶活力的影响；酶的激活剂及抑制；酶的专一性4组实验组成。
(一)、温度对酶活力的影响
酶的催化作用受温度的影响。在最适温度下，酶的反应速度最高。大多数动物酶的最适温度为37~40℃，植物酶的最适温度为50~60℃。
酶对温度的稳定性与其存在形式有关。有些酶的干燥制剂，虽加热到100℃，其活性并无明显改变，但在100℃的溶液中却很快地完全失去活性。
化学与生物工程学院生物工程系
生物化学实验报告
课程名称：生物化学
实验项目：酶的特征
实验室名：生物化学实验室
实验时间：2012-11-8
任课老师：杨艳
专业班级：生物工程1142学生姓名：髙晔
学号：2组别：第五组
实验内容
【实验目的】
酶是高效催化有机体新陈代谢各步反应的活性蛋白，几乎所有的生化反应都离不开酶的催化，所以酶在生物体内扮演着极其重要的角色，因此对酶的研究有着非常重要的意义。酶的活力是酶的重要参数，反映的是酶的催化能力，因此测定酶活力是研究酶的基础。酶活力由酶活力单位表征，通过计算适宜条件下一定时间内一定量的酶催化生成产物的量得到
3
7.72
2.28
6.8
4
9.72
0.28
8.0
从4个锥形瓶中各取缓冲液3 mL，分别注入4支带有号码的试管中，随后于每个试管中添加0.5%淀粉溶液2 mL和稀释200倍的唾液2mL。向各试管中加入稀释唾液的时间间隔各为1分钟。将各试管中物质混匀，并依次置于37℃恒温水浴中保温。
待向第4管加入唾液2分钟后,每隔1分钟由3管取出一滴混合液，置于白瓷板上，加1小滴碘化钾一碘溶液，检验淀粉的水解程度。待混合液变为棕黄色时，向所有试管依次添加1~2滴碘化钾一碘溶液。添加碘化钾-碘溶液的时间间隔，从第1管起，亦均为1分钟。
（2）PH能够影响酶的活性，只有在最适的PH条件下，酶的活性才是最好的，一旦超过某个范围，酶就会失活。
（3）加入一些金属离子或者一些阴离子会抑制和活化酶的活性。
酶是具有专一性的。
指导教师批阅意见：
成绩评定：
指导教师签字：
年月日
(3)稀释200倍的新鲜唾液100 mL
(4)蔗糖酶溶液100 mL
将啤酒厂的鲜酵母用水洗涤2~3次(离心法),然后放在滤纸上自然干燥.取干酵母100g，置于乳钵内，添加适量蒸馏水及少量细沙，用力研磨提取约1小时，再加蒸馏水使总体积约为原体积的10倍。离心，将上清液保存于冰箱中备用。
(5)Benedict氏试剂
低温能降低或抑制酶的活性，但不能使酶失活。
(二)、pH对酶活性的影响
酶的活力受环境pH的影响极为显著。不同酶的最适pH值不同。本实验观察pH对唾液淀粉酶活性的影响，唾液淀粉酶的最适pH约为6.8。
(三)、唾液淀粉酶的活化和抑制
酶的活性受活化剂或抑制剂的影响。氯离子为唾液淀粉酶的活化剂，铜离子为其抑制剂。