PCR技术
一、例题：PCR是一种体外迅速扩增DNA片段的技术，下列有关PCR过程的叙述，不正确的是
A．变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键
B．复性过程中引物与DNA模板链的结合依靠碱基互补配对原则完成
C．延伸过程中需要RNA聚合酶、ATP、四种核糖核苷酸
D．与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度较高
【答案】C
【解析】变性过程是打开DNA双链之间的氢键，A正确。

复性过程是引物与DNA 模板根据碱基互补配对而形成氢键，B正确。

延伸过程需要的是Taq DNA聚合酶、ATP和四种脱氧核糖核苷酸，C错误。

与细胞内DNA复制相比，PCR需要的酶的温度较高，D正确。

二、知识归纳
PCR技术：
（1）概念：PCR全称为多聚酶链式反应，是一项在生物体外迅速扩增DNA片段的技术。

（2）原理：DNA复制。

（3）条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、DNA聚合酶
（4）过程：①高温变性：DNA解旋过程（PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开）；②低温复性：引物与两条单链DNA结合；③中温延伸：合成子链。

三、练习题
1．下列关于PCR的描述中，正确的是
①PCR是一种酶促反应
②引物决定了扩增的特异性
③扩增DNA利用了热变性的原理
④扩增的对象是氨基酸序列
A．①②④ B．②③④
C．①③④ D．①②③
2．下列关于PCR反应体系中所加物质的作用的描述，错误的是
A．DNA聚合酶催化合成DNA子链
B．引物使DNA聚合酶能从引物的5＇端开始连接脱氧核苷酸
C．四种游离的脱氧核苷酸是用于合成子链的原料
D．DNA母链提供DNA复制的模板
【答案】1．D【解析】PCR是一种体外迅速扩增DNA片段的技术，在高温条件下，把DNA的双链打开，缓慢冷却后，又重新结合，需要耐高温的DNA聚合酶，同时，还需要引物，从引物的3′端连接脱氧核苷酸。

2．B【解析】PCR反应体系中，DNA聚合酶催化合成DNA子链；引物使DNA聚合酶能从引物的3＇端开始连接脱氧核苷酸；四种游离的脱氧核苷酸是用于合成子链的原料；DNA母链提供DNA复制的模板。

故选B。