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乳酸脱氢酶 医学生用的生化学习


乳酸脱氢酶
由于红细胞和血小板中含有大量的LD,故 由于红细胞和血小板中含有大量的LD,故 严禁使用溶血标本,在采用血浆标本时必 须3000转/分离心15分钟除去血小板。 3000转 分离心15分钟除去血小板。 LD活性能被巯基试剂所抑制,硼酸、丙二 LD活性能被巯基试剂所抑制,硼酸、丙二 酸、草酸以及EDTA都是竟争性抑制剂。 酸、草酸以及EDTA都是竟争性抑制剂。
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逆向反应的最适PH为7.4-7.8,其显著的优点在于 逆向反应的最适PH为7.4-7.8,其显著的优点在于 NADH用量少,仅为正向反应的3%左右,而反应 NADH用量少,仅为正向反应的3%左右,而反应 速度比前者快3 速度比前者快3倍,灵敏度高 但丙酮酸与NADH的稳定性较差,过量的丙酮酸 但丙酮酸与NADH的稳定性较差,过量的丙酮酸 对LD活性的抑制作用较大。 LD活性的抑制作用较大。 LD活性测定正反都可应用,但检验学会酶学组专 LD活性测定正反都可应用,但检验学会酶学组专 家推荐选择正向反应。
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按照LD同工酶的分布将组织分为3 按照LD同工酶的分布将组织分为3类: 以LD1为主,这类组织以心肌为代表 以LD5为主,这类组织以肝脏肌代表 以LD3为主,以肺、脾为代表 当组织损伤时,其中所含同工酶释放到血 液中,引起同工酶活性变化。
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常用于急性心肌梗死的鉴别诊断。 在急性心肌梗死LD 在急性心肌梗死LD1和LD2活性均升高,但 LD1升高更早更明显,导致LD1/ LD2比例增 升高更早更明显,导致LD 大。
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LDH在AMI诊断中的评价 LDH在AMI诊断中的评价 1)总LDH不能单独诊断AMI,LDH单独诊断AMI的特异性只 LDH不能单独诊断AMI,LDH单独诊断AMI的特异性只 不能单独诊断AMI 单独诊断AMI 有53%,可用于AMI的排除诊断。 53%,可用于AMI的排除诊断。 AMI的排除诊断 2)LDH在胸痛后8-12h出现,7-12天恢复正常,时间长, LDH在胸痛后 12h出现, 12天恢复正常,时间长, 在胸痛后8 出现 天恢复正常 可以用于就诊较迟的患者 可以用于就诊较迟的患者。 用于就诊较迟的患者。 3)如果CK-MB和cTn等已经有阳性结果,没有必要检测LDH。 如果CK MB和cTn等已经有阳性结果,没有必要检测LDH CKLDH。 等已经有阳性结果 4)LDH不能用于溶栓治疗的监测。 LDH不能用于溶栓治疗的监测。 不能用于溶栓治疗的监测
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LD由 型和H型亚单位构成5种同工酶,H LD由M型和H型亚单位构成5种同工酶,H4 (LD1)、MH3(LD2)、M2H2(LD3)、 )、MH )、M M3H1(LD4)、和M5(LD5)。 )、和M 不同组织有其特征性同工酶。心肝肾脏和 红细胞所含LD同工酶比例相近,以LD 红细胞所含LD同工酶比例相近,以LD1和 LD2为主。
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LD几乎存在于各种组织中,心、肺、肝、 LD几乎存在于各种组织中,心、肺、肝、 肾、红细胞、骨骼肌和皮肤的急性损伤, 以及恶性肿瘤等疾患均致此酶增高,故其 特异性差。LD活性增高主要见于心肌梗死、 特异性差。LD活性增高主要见于心肌梗死、 肺梗死、病毒性肝炎、肝硬化、肾脏疾病、 某些恶性肿瘤、白血病以及非恶性疾病如 传染性单核细胞增多症、贫血、肌营养不 良,胰腺炎等。一些肿瘤转移所致的胸膜 水中LD活性往往有升高。目前临床主要用 水中LD活性往往有升高。目前临床主要用 于心肌梗死,肝病和恶性肿瘤的辅助诊断。
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不同的LD同工酶以温度的敏感性是不同的, 不同的LD同工酶以温度的敏感性是不同的, 组织提取液若放于-20℃过夜,LD4和LD5将 组织提取液若放于-20℃过夜,LD4和LD5将 丧失全部的活性。血清标本应放于室温下。 如果血清标本需要存放较长时间,应加入 10mg/ml的 10mg/ml的NAD+或3.1mg/ml的谷胱甘肽后 3.1mg/ml的谷胱甘肽后 于4 ℃保存。 LD活性测定也可用抗凝血浆,但不同的抗 LD活性测定也可用抗凝血浆,但不同的抗 凝剂对LD测定的影响不同,草酸盐和 凝剂对LD测定的影响不同,草酸盐和 EDTA能抑制LD活性,而肝素影响不大。 EDTA能抑制LD活性,而肝素影响不大。
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是糖酵解和糖异生的一个重要酶。含有锌 离子,能可逆催化乳酸(L)和丙酮酸(P 离子,能可逆催化乳酸(L)和丙酮酸(P) 之间的氧化还原反应。 乳酸+NAD 丙酮酸+NADH+H 乳酸+NAD+→丙酮酸+NADH+H+ 其中L P为正向反应, 其中L → P为正向反应, P → L为逆向反应。 L为逆向反中正向为 正反两向反应的最适PH不同,其中正向为 8.8-9.8。其优点是乳酸和NAD 8.8-9.8。其优点是乳酸和NAD+稳定性好, 且NAD+纯品易得,价格较低,过量乳酸对 LD活性抵制较小,反应线性较好,缺点是 LD活性抵制较小,反应线性较好,缺点是 需要较高的底物浓度,反应速度较慢。
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