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气相色谱-质谱法检测鱼肉中脂肪酸含量

气相色谱-质谱法检测鱼肉中脂肪酸含量
摘要:本实验通过气相色谱-质谱联用技术检测鱼肉中脂肪酸的组分并通过面积归一化法对各组分进行百分含量测定。

关键词:梭鲈鱼;气相色谱-质谱联用;脂肪酸
实验部分
1、仪器:气相色谱—串联质谱仪(Agilent 安捷伦,7890B-7000B);
2、试剂与标准品:正己烷、甲醇(Fisher Scientific 飞世尔);三氯甲烷、氢氧化钾(天津光复试剂厂)。

3、样品前处理:称取10g左右的鱼肉置于索式提取器中,加入40mL氯仿回流4h,取出后旋转蒸发浓缩近干,加入5mL乙醚-正己烷(1:2)溶液,溶解脂肪后倒入25mL试管中,继续加入5mL氢氧化钾-甲醇溶液(甲酯化),振摇后加入5mL正己烷静置10min后,吸取上层正己烷过滤膜后放入自动进样瓶中待测。

4、色谱与质谱条件:
色谱柱:HP-5MS(30 m×0.25 mm×0.5 μm);载气:氦气(99.999%);恒流模式流速:1.0 mL/min;进样:1.0 μL,不分流;进样口温度:250 ℃;程序升温:80 ℃保持1min,以10 ℃/min升温至180 ℃,以5℃/min升温至260 ℃,以20℃/min升温至280 ℃;离子化方式:电子轰击(EI);离子化能量:70 eV;离子源温度:230 ℃;传输线温度270 ℃;Q2碰撞气:氮气;溶剂延迟:3 min;扫描方式:多反应监测(MRM)。

扫描范围:50~300 amu;定量方式:面积归一化法。

结果与分析
表1 鱼肉中脂肪酸甲酯化学组分及含量(n=5)
序号保留时间
(min)
化学成分
(脂肪酸甲酯)
相对百分比
(%)
RSD
%
1 12.509 肉豆蔻酸甲酯 3.78
2 13.915 十五碳酸甲酯0.36
3 15.097 棕榈油酸甲酯* 5.19
4 15.404 棕榈酸甲酯28.15
5 16.285 十七碳一烯酸甲酯0.72
6 18.102 亚油酸甲酯* 5.50
7 18.189 反油酸甲酯* 19.17
8 18.283 油酸甲酯* 4.17
9 18.607 硬脂酸甲酯 5.14
10 20.802 花生四烯酸甲酯* 0.93
11 20.916 EPA* 4.03
12 21.473 花生一烯酸甲酯* 1.11
13 23.924 DHA*20.84
14 24.144 DPA*0.88
*为不饱和脂肪酸
图1 鱼肉中脂肪酸甲酯TIC图
讨论:
本次试验选取新疆地区的梭鲈鱼肉进行分析研究。

其中不饱和脂肪酸超过60%,大部分不饱和脂肪酸的碳链较长,具有降低胆固醇的作用。

由于仅对一个品种进行分析检测,后续还需要进行不同种类的鱼肉脂肪酸含量对比,以完善该研究。

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