浮游菌(airborne microbe)
按照标准（GBT 16293-2010）提及的方法收集悬浮在空气 中的活微生物粒子，通过专门的培养基，在适宜的生长条件下 繁殖到可见的菌落数。
浮游菌浓度（airborne microbe concentration）
单位体积空气中含浮游菌菌落数的多少，以计数浓度表示， 单位是CFU/m3或CFU/L
测试指标
温度和相对湿度的测试。洁净室（区）的温度和湿度应与其生产及 工艺要求相适应（无特殊要求时，温度在18-26℃，相对湿度在4565%为宜）。
静压差的测试。洁净室与非洁净室之间的静压差应大于10 Pa；相邻 不同洁净级别的洁净室之间的压差应大于5 Pa；洁净区与室外压差 应大于12 Pa。 风量、风速的测试 a) 非单向流洁净室系统的各项实测风量及换气次数应大于各自的设 计风量或换气次数，但不应超过20%；室内各风口的风量与各风口 设计风量之差均不应超过设计风量的±15%。 b) 单向流净室实测室内平均风速应大于设计风速，但不应超过15%。
300 000
100
浮游菌测试方法
5 采样注意事项 a) 对于单向流洁净室（区）或送风口，采样器采样口朝向应正对气流方向； 对于非单向流洁净室（区），采样口向上。
b) 布置采样点时，应尽量避开尘粒较集中的回风口。
c) 采样时，测试人员应在采样口的下风侧，并尽量少活动。 d) 应采取一切措施防止采样过程的污染和其他可能对样本的污染。 e) 培养皿在用于检测时，为避免培养皿运输或搬运过程造成的影响，宜同 时进行阴性对照试验，每次或每个区域取1个对照皿，与采样皿同法操 作但不需暴露采样，然后与采样后的培养皿一起放入培养箱内培养，结 果应无菌落生长。 6 测试状态（参照悬浮粒子测试方法） 7 测试时间（参照悬浮粒子测试方法）
次数可以多于1次，且不同采样点的采样次数可以不同。
悬浮粒子测试方法
2 采样点位置 a) 采样点一般在离地面0.8 m高度的水平面上均匀布置。
b) 采样点多于5点时，也可以在离地面0.8-1.5 m高度的区域内分层布置，但每层不 少于5点。
悬浮粒子测试方法
3 采样注意事项 a) 对于单向流洁净室（区），粒子计数器的采样管口应正对气流 方向；对于非单向流洁净室（区），粒子计数器的采样管口宜 向上。 b) 布置采样点时，应尽量避开回风口。 c) 采样时，测试人员应在采样口的下风侧，并尽量少活动。 d) 采样完毕后，宜对粒子计数器进行自净。 e) 应采取一切措施防止采样过程的污染。
洁净环境监测的法规依据
• 温湿度、换气、气流组织
• 第一百九十七条 生产过程中应尽可能采取措施， 防止污染和交叉污染，如设置必要的气锁间和排风； 空气洁净度级别不同的区域应有压差控制；应降低未 经处理或未经充分处理的空气再次进入生产区导致污 染的风险。
洁净室的控制参数
• 1 悬浮离子和微生物：主要影响产品纯度、交叉污染和无 菌程度。 • 2 温度和相对湿度：主要影响产品工艺条件和细菌的繁殖 条件、由操作舒适度带来的对产品质量的影响。 • 3 换气次数：影响洁净度和人员舒适度。 • 4 工作面截面风速：影响洁净度和人员舒适度。 • 5 静压差：影响洁净度。 • 6 照度：影响产品的工艺条件。 • 7 噪声：影响人员舒适度。 • 8 新风量：影响人员舒适度。 • 9 自净时间：代表系统的“ 恢复能力”。
2010版GMP培训
药品生产洁净环境监测
洁净环境监测的内容
• • • • • • • 1、空气洁净度测试（悬浮粒子监测） 2、洁净室内表面空气中微生物测试 3、温湿度测试 4、空气压差测试 5、风速和风量均匀度测量 6、洁净室内空气自净时间测试 7、高效过滤器HEPA完整性测试
相关术语
洁净室状态
洁净环境监测的法规依据
• 温湿度、换气、气流组织 • 第四十八条 口服液体和固体制剂、腔道用药（含直 肠用药）、表皮外用药品等非无菌制剂生产的暴露工 序区域及其直接接触药品的包装材料最终处理的暴露 工序区域，应当参照“无菌药品”附录中D级洁净区的 要求设置，企业可根据产品的标准和特性对该区域采 取适当的微生物监控措施。
动态（operational）：洁净室（区）已处于正常生产状态，设备在指定 的方式下进行，并且有指定的人员按照规范操作。
相关术语
气流形式
单向流（unidirectional airflow）：沿单一方向呈平行流线并且与 气流方向垂直的断面上风速均匀的气流。与水平面垂直的叫垂直 单向流（vertical unidirectional airflow ) ，与水平面平行的叫水平 单向流（horizontal unidirectional airflow ）。 非单向流（non-unidirectional airflow）：具有多个通路循环特性 或气流方向不平行的气流。
洁净环境监测的法规依据
• 新版GMP对药品生产环境的要求
• 第四十六条 为降低污染和交叉污染的风险，厂房、生 产设施和设备应当根据所生产药品的特性、工艺流程及 相应洁净级别要求合理设计、布局和使用。 • • 无菌药品，附录1 第三十八条 无菌药品生产的洁净 区空气净化系统应当保持连续运行，维持相应的洁净度 级别。因故停机再次开启空气净化系统，应当进行必要 的测试以确认仍能达到规定的洁净度级别要求。
洁净工作台 （clean bench）
一种工作台或者与之类似的一个封闭围挡工作区。其特点是 自身能够供给经过过滤的空气或气体，按气流形式分为垂直单向 流工作台、水平单向流工作台等。
相关术语
洁净度 （cleanliness）
洁净环境内单位体积空气中含大于或等于某一粒径悬浮粒 子的统计数量来区分的洁净程度。
洁净环境监测的法规依据
• 温湿度、换气、气流组织
• 第五十三条 产尘操作间（如干燥物料或产品的取 样、称量、混合、包装等操作间）应保持相对负压或 采取专门的措施，防止粉尘扩散、避免交叉污染并便 于清洁。
• 第一百九十条 在干燥物料或产品，尤其是高活性、 高毒性或高致敏性物料或产品的生产过程中，应采取 特殊措施，防止粉尘的产生和扩散。
悬浮粒子（airborne particle）
用于空气洁净度分级的空气悬浮粒子尺寸范围在0.1-1000 mm的固体和液体粒子。对于悬浮粒子计数测量仪，一个微粒球 的面积或体积产生一个响应值，不同的响应值等价于不同的微 粒直径。
相关术语
菌落（colony forming units）
微生物培养后，由一个或几个微生物繁殖而形成的微生物 集落，简称CFU。
洁净环境监测的法规依据
• 新版GMP对药品生产环境的要求
•
无菌药品生产级别
洁净环境监测的法规依据
• 新版GMP对药品生产环境的要求 • 洁净区微生物监测的动态标准
洁净环境监测的法规依据
• 温湿度、换气、气流组织
第四十二条 厂房应有适当的照明、温度、湿度和通风，确保 生产和贮存的产品质量以及相关设备性能不会直接或间接地受到影 响。 第四十八条 应当根据药品品种、生产操作要求及外部环境状况 等配置空调净化系统，使生产区有效通风，并有温度、湿度控制和 空气净化过滤，保证药品的生产环境符合要求。 洁净区与非洁净区之间、不同级别洁净区之间的压差应不低于10 帕斯卡。必要时，相同洁净度级别的不同功能区域（操作间）之间 也应保持适当的压差梯度。
悬浮粒子测试方法
4 测试状态
a) 空态、静态和动态三种状态均可进行测试。 b) 空态或静态时，室内测试人员不得多于2人。
5 测试时间
a) 在静态测试时，对单向流洁净室（区），测试宜在生产操作人员撤离 现场并经过10 min自净后开始；对非单向流洁净室（区），测试宜在生 产操作人员撤离现场并经过20 min自净后开始； b) 在动态测试时，则须记录生产开始的时间以及测试时间。
悬浮粒子测试方法
6 采样 按照粒子计数器的操作规程，选择合适的粒径、采样量、采样 时间及每个采样点的采样次数进行采样。 7 结果计算 a）计算每个采样点的平均悬浮粒子浓度（粒/m3） b）计算洁净室的平均粒子浓度（粒/m3） c）计算标准差SE 8 结果评定 判断悬浮粒子的洁净度级别应同时满足以下两个条件： a) 每个采样点的平均悬浮粒子浓度必须不大于规定的级别界限；
沉降菌测试方法
1 2 3 4 最少采样点数目（参照悬浮粒子测试方法） 采样点的位置（参照悬浮粒子测试方法） 采样次数（参照悬浮粒子测试方法） 最少培养皿数 在满足最少采样点数目的同时，还宜满足最少培养皿数。 最少培养皿数 洁净度级别 最少培养皿数
100
10 000 100 000 300 000 5 采样注意事项（参照悬浮粒子测试方法）
空态（as-built）： 洁净室（区）在净化空气调节系统已安装完毕且功能 完备的情况下，但是没有生产设备、原材料或人员的状态。
静态 (at-rest） 静态a：洁净室（区）在净化空气调节系统已安装完毕且功能完备的 情况下，生产工艺设备已安装、洁净室（区）内没有生产人员的状态。 静态b：洁净室（区）在生产操作全部结束，生产操作人员撤离现场 并经过20 min自净后。
悬浮粒子测试方法
在空态或静态测试时，悬浮粒子采样点数目及其布置应力 求均匀，并不得少于最少采样点数目；在动态测试时，悬浮粒 子采样点数目及其布置应根据产品的生产及工艺关键操作区设 置。 1 采样次数的限定 对任何小洁净室（区）或局部空气净化区域，采样点数目 不得少于2个，总采样点次数不得少于5次。每个采样点的采样
浮游菌测试方法
8 采样及培养 按照浮游菌采样器的操作规程进行采样。全部采样结束 后，将培养皿倒置于恒温培养箱中培养。采用大豆酪蛋白琼脂 培养基（TSA）配置的培养基经采样后，在30-35℃培养箱中 培养，时间不少于2 d；采用沙氏培养基（SDA）配置的培养
基经采样后，在20-25℃培养箱中培养，时间不少于5 d。