(2)测含量(用样品与内标物)
含量(C x ) f
Ax
' ' AS / CS
As’：内标物质峰面积或者峰高 Ax: 供试品的峰面积或者峰高 Cs’: 内标物质浓度 f：校正因子
示例一
炔诺酮的含量测定
照高效液相色谱法(附录ⅤD测定) 色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键 合硅胶为填充剂；以甲醇-水(65:35)为流动相， 检测波长为244nm。理论塔板数按炔诺酮峰计算 不低于1500，炔诺酮峰与内标物质峰的分离度及 主成分峰后一杂质峰与主成分峰的分离度均应符 合要求。 内标溶液的制备 取黄体酮约25mg，精密称定， 置25ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度。

葡萄糖酸钙 富马酸亚铁 葡萄酸锑钠
EDTA配位滴定 邻二氮菲-硫酸铈滴定 间接碘量法
(二)、经水解后测定法
第二节 定量分析样品的前处理方法 1、碱水解法 适用范围：含卤素有机药物结构中卤素原子结合不
牢固的药物。
CCl 3 C (CH 3 )2 OH 4 NaOH 回流 (CH 3 )2 CO 3NaCl HCOONa 2H2O
第一节 定量分析方法 容量分析法有 关计算
T(滴定度):1ml滴定液(m mol/L)相当于被测药物的毫克数 例:用碘量法测定维生素C的含量 时，《中国药典》规定：每1ml碘 滴定液（0.05mol/L）相当于 8.806mg的维生素C（C2H8O6）
滴定度的 计算
aA bB cC dD
含量(C x ) f
Ax
' ' AS / CS
第二节 定量分析样品的前处理方法 直接测定
配位滴定法 氧化还原滴定法
不经有 酸水解 机破坏 水解后测定 经还原分解后测定 经有机 破坏
碱水解
湿法破坏——凯氏定氮法
干法破坏
高温灼烧法 氧瓶燃烧法
第二节 定量分析样品的前处理方法 (一)、直接测定法 适用范围：金属原子不直接于碳原子相连或某些CM键结合不牢固的有机金属药物。
度
计算步骤
0.1332样品中VitC含量(W测)
W测= N F T V 0.05014 = 1×———×8.806×10-3 ×15.02=0.13263(g) 0.05 VitC的百分含量(%) W测 0.13263 VitC% = W = 0.1332 样 =99.57%
又例
非那西丁含量测定
测定法 取本品约25mg，精密称定，置25ml量瓶中， 加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取此溶 液2ml与内标溶液3ml，置10ml量瓶中，加甲醇稀 释至刻度，摇匀，取20μl注入液相色谱仪，记录 色谱仪，记录色谱图；另取炔诺酮对照品适量， 精密称定，同法测定。按内标法以峰面积计算， 即得。
As / A r 样品 测得量 W对照品 A s / A r 对照品
需做空白试验的计算公式
W测= N F T （V-V0）
例:萘普生的含量测定：精密称取本品0.4960g，加甲醇 45ml溶解后，再加水15ml与酚酞指示剂3滴，用NaOH 滴定液（0.1078mol/L）滴定，同时用空白试验校正，求 萘普生百分含量。《中国药典》规定每1ml NaOH滴定 液（0.1mol/L）相当于23.03mgC14H14O3。按干燥品计算， 含C14H14O3不得少于98.5%。滴结果如下：V=19.85ml， V0=0.10ml，干燥失重=0.40%。
R x R xb Cx Cr Rr Rrb
(三)色谱分析法 1.HPLC
1.1 内标法
两步: (1)测f;
(2)测含量
(1)测f (用标准品与内标物)
A s / Cs 校正因子f A R / CR
As：内标物质峰面积或者峰高 AR: 对照品的峰面积或者峰高 Cs: 内标物质浓度 CR：对照品浓度
1.简便易行：本法使用的仪器价格比较低廉，操 作简单，易于普及 2.灵敏度高：适用于低浓度试样分析 3.准确度较高：本法误差在2%~5%之间，适用 于对测定结果的准确度要求较高的样品 4.专属性较差：本法通常不受一般杂质的干扰， 但对结构相近的有关物质缺乏选择性。
紫外可见分光度 法含量测定方法
3种 方 法
a a 3 T =m× ×M=0.01667× ×137.14=3.429(mg/ml) b 2
b
滴定含量计算
取用 倍数 浓度校 正因数 滴定 度 消耗 体积
F=
实际C
规定C
浓度校 正因数
W测 = N F T V
例:VitC的含量测定:精密称取本品0.1332g,置锥形 瓶中,加稀醋酸与新沸过的冷蒸馏水的混合液 消耗 (1:10)110ml, 加淀粉批示液1ml,用碘滴定液 体积 (0.05014mol/L)滴定至蓝色,用去15.02ml,每1ml的 碘液(0.05mol/L)相当于8.806mg C6H8O6，计算本 品是否符合药典规定的含量限度。药典规定含 C6H8O6 不得低于99.0%。 滴定
二、光谱分析法
光谱分析法 药典 收载
红外分光 度法 火焰光度 法 紫外可见 分光度法 荧光分析 法
原子吸收分 光光度法
基于物质对紫外区 (200~400nm)和可见光 区(400~760nm)的单色 光辐射建立起来的光谱 分析法 紫外可 见分光 度法
基 础
朗伯-比尔定律
1 A lg Ecl T
1
a 1 T =m× ×M=0.05× ×176.13=8.806(mg/ml) b 1
1
M=176.13
a T(mg / ml) m M b
示例二 异烟肼的滴定度 溴酸钾法测定异烟肼含量[M(C6H7N3O)=137.14]， C溴酸钾=0.01667mol/L
3C6H7 N3O 2KBrO3 3C6H5 NO2 3N2 2KBr 3H2O
例HPLC法测定磺胺嘧啶的含量
对照品+内标溶液配制：精密称取对照品50.0mg，置50ml量瓶 中，加甲醇稀释至刻度,摇匀。精密量取5ml,置25ml量瓶中, 精 密加内标溶液(0.20mg/ml)5ml,加流动相至刻度,摇匀。 供试品+内标溶液配制：精密称取本品50.5mg，照上法配制。 取上述两种溶液各10μl进样，测得对照品和内标峰分别为1350 和1040，供试品峰和内标峰分别为1313和1013。求SD的含量。 解：由于对照品和供试品稀释倍数相同，所以直接按质量代 替浓度计算
紫外可见分光度 法含量测定方法
2.吸收 系数法
吸收系数法:引入吸光系数 的含量计算方法
Cx
Ax
1% E1cm
100
药典 记载
（ E 含量% = ————— （ E 1% ）标
1cm
1% ）供 1cm
[例] 已知VitB12在361nm处的百分吸收系数为 207，现测得其水溶液的吸收度为0.414，吸收 池厚度为1cm，求其浓度。
用A算出（ E
1% 1cm）供 ，再用其与已知（
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
E
1% 1cm ）标
比值
解：C= m/V = 25×10-3/1000（g/ml）= 2.5×10- 3 （g/100ml） (E
1% 1cm ) 供=
A / CL = 0.507 / (2.5×10-3×1) = 202.8
（ E 1% ）供 1cm VitB12% = ———— = 202.8/207 = 97.97% 1% ） （ 标
4 g/100ml） 解：C= m/V = 8.2×10- （
(E
1% 1cm ) 供=
A / CL = 0.580 / 8.2×10-4 = 707.3
（ E 1% ）供 1cm VitB12% = ———— = 707.3/715 = 98.93% 1% ） （ 标
E 1cm
(二)荧光分析法
特点： 灵敏度高，可达10-10～10-12g/ml 要求低浓度下测定 须做空白测定 荧光弱的药物可衍生化后测定
As/Cs
Ar/mr
As/Cs
1040/0.20 1350/50.0
1013/0.20
=f=
Ax/mx
=f=
1313/mx
解之,得: mx=49.924(mg)
SD%=49.924/50.5=98.86%
2.外标法
Ax 含量(Cx)=CR × A R
(二 )
GC
内标法
A s / Cs 校正因子f A R / CR
第四章 药物的含量测定方法
药物的含量测定
定 义
是指测定药物中所含的主成分的量， 目的:判断药物的优劣。
化学分析法
重量分析 容量分析
含量测 定
可见紫外分光
仪器分析法
高效液相色谱法 气相色谱法
效价测定（生物学法）
适用于准确 度与精确度 要求较高的 样品测定
药物的含量测定 三种 分析 方法 光谱分 析法 特点
滴定液 被测药物 滴定液 浓度 药物分 子量
a T(mg / ml) m M b
a T(mg / ml) m M b
示例一 计算VitC的滴定度T 碘量法测定VitC含量M(C6H6O6)=176.13， C(I2)=0.05mol/L m=0.05 mol/L
C6 H8O6 I 2 C6 H 6O 6 2HI
将已知浓度的滴定液，由滴定管滴加到被 测药物的溶液中，直至滴定液与被测药物 反应完全，然后根据滴定液消耗的浓度和 被消耗的体积，按化学计量关系式计算出 被测药物的含量。
特点
1.方法简便易行：仪器价廉易得，操作简便快速
2.方法耐用性高：影响测定的试验条件与环境因素少
3.测定结果准确：误差低于0.2% 4.方法专属性差：对相近杂质干扰缺少选择，适用 于主成分含量较高的样品(如原料药)分析