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ABO血型鉴定操作规程

ABO血型鉴定操作规程
1.目的:
为准确鉴定ABO血型
2.要求:
要求全科人员熟练掌握原理及操作,对有疑问的结果能够做出解释及妥善解决。

3.原理:
根据红细胞上有无A抗原和/或B抗原,将血型分为A型、B型、O型和AB型四种。

可利用红细胞凝集试验,通过正、反定型准确鉴定ABO 血型。

正定型是用已知抗A和抗B分型血清来测定红细胞上有无相应的A抗原和/或B抗原;反定型是用已知的A型红细胞和B型红细胞来测定血清中有无相应的抗A和/或抗B。

反定型中使用O细胞是为了检测抗A、抗B以外的不规则抗体。

4.试剂和材料
4.1 A、抗B分型血清,效价1:128以上
4.2 2%~5%A、B、O标准红细胞。

4.3 受检者血样
5.方法.(试管法)
5.1 取洁净小试管2支,分别标明抗A、抗B,分别滴加抗A、抗B分型血清1滴于试管底部,再分别加入受检者2%~5%红细胞1滴,混合。

5.2 另取洁净小试管3支,标明A C、B C、O C,各加入受检者血清2滴
于试管底部,再分别加入A、B和O型2%~5%标准红细胞1滴,混匀。

5.3 以1000g离心15秒,将试管轻轻摇动,使沉于管底的红细胞浮起,以肉眼观察有无凝集或溶血现象。

观察结果时既要看有无凝集,更要注意凝集强度,这将有助于A、B亚型、类B、或CisAB的发现。


6.结果判断:
血型抗A血

抗B血

A细

B细

O细胞
A + - - + -
B - + + - -
O - - + + -
AB + + - - -
7.正反定型不一致的原因:
有技术问题或红细胞和血清本身问题,常见者有以下数种:
7 1 分型血清效价太低,亲和力不强。

7.2 红细胞悬液浓度过高或过低,抗原抗体比例不适当(出现前带或
后带现象),使反应不明显误判为阴性反应
7.3 受检者红细胞上抗原位点过少(如亚型)或抗原性减弱(见于
白血病或恶性肿瘤)以及类B或CisAB等。

7.4 受检者血清蛋白紊乱(高球蛋白血病)或实验时温度过高,常引起红细胞呈缗钱状排列。

7.5 受检者血清中缺乏应有的抗A或抗B抗体,如丙种球蛋白缺乏
症。

7.6 各种原因引起的红细胞溶解,误判为不凝集。

7.7 由细菌污染或遗传因素引起,多凝集和全凝集,往往是正反定型不符的原因。

7.8 血清中有以外抗体,如自身抗I,常干扰定型。

7.9 老年人血清中抗体水平大幅度下降。

如发现ABO正反定型不一致,首先要重复做试验一次(必须用试管法),严格执行操作规程,使用质量合格的试剂以及细心观察和解释试验结果,就可以解决问题,对一些疑难问题必须进一步研究。

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