由于不需要固体支撑体，物质的分离依据其在两相
中分配系数不同而实现，避免了因不可逆吸附而引
起的样品失活、损失、变性等，不仅能使样品全部
回收，更能反映其本来的特性，特别适合于天然生 物活性成分的分离。
具有适用范围广、操作灵活、高效、快速、制备量
大、费用低等优点。
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溶质与固定相作用
上样量 分离效率
操作 费用 危险性
HSCCC
HPLC
液体
固体
液-液分配（简单） 分配、吸附、离子交换、 体积排阻等（复杂）
与液体固定相的整个体 在固定相与固体支撑体
积相接触
的界面相互作用高中等来自低高容易
复杂
便宜
昂贵
高速运转产生机械故障
安全
HSCCC与HPLC是互补的分离技术
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结构组成
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二、基本原理
现代逆流色谱仪器体系： 1. 流体静力学平衡体系
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2. 流体动力学平衡体系（HSCCC体系） 仪器的两个特征：
a 有一个或多个缠绕有多层聚四氟乙烯管的线轴； b 没有旋转密封接头，有一个安装有两个旋转轴的齿轮传动装置，
能产生一个可变的离心力场。
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通过公转、自转（同步 行星式运动）产生的二 维力场，保留两相中的 其中一相作为固定相；
分离时，在螺旋管内首先注入其中的一相(固定相)， 然后从合适的一端泵入移动相，让它载着样品在螺旋 管中无限次的分配。仪器转速越快，固定相保留越多， 分离效果越好，且大大地提高了分离速度，故称高速 逆流色谱。
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高速逆流色谱与高效液相色谱比较
HPLC和HSCCC的固定相体积不同 理论塔板数的工 作范围不同；
到目前为止，逆流色谱的最高分离效率低于5000理 论塔板数。
HSCCC中溶质可以进入并接触到液态固定相的整个体 积；HPLC中，溶质不能进入到固体支撑体内部，仅 涂渍在表面的有机层的液-固界面 HPLC有过载现象；
HSCCC进样体积可达到柱体积的20%，广泛用于制备 性分离。
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参数
固定相 机理
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应用领域与拓展
双水相逆流色谱在蛋白质分离纯化中的应用 离心沉淀色谱在蛋白质等分离中的应用 逆流色谱在手性分离中的应用 逆流色谱在天然药物工业中的应用
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总结
HSCCC利用两相溶剂体系在高速旋转的螺旋管内建立 起一种特殊的单向性流体动力学平衡，其中一相作 为固定相，另一相作为流动相，在连续洗脱过程中 能保留大量固定相。
离心力场的强度和方向 都可以变化；
倾析和混合交替出现， 两相液体在螺旋管柱中 总是处在接触状态，没 有死体积存在；
流体动力学CCC中压力小，
固定相保留值大。
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高速逆流色谱正是利用了两相的这种单向性分布特征， 在高的螺旋管转动速下，如果从尾端送入首端相， 它将穿过尾端相而移向首端，同样，如果从首端相送 入尾相，它将穿过首端相而移向螺旋管的尾端。
高速逆流色谱法
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高速逆流色谱概述 基本原理 技术特点 仪器结构
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高速逆流色谱（HSCCC）
High-speed countercurrent chromatography 建立在一种特殊的流体动力学平衡基础上，利用螺旋
管的高速行星式运动产生的不对称离心力场，实现两 相溶剂体系的充分保留和有效混合及分配，从而实现 物质在两相溶剂中高效分离。