9期
王英娟, 等: 蛹虫草中虫草素、虫草多糖综合提取工艺研究
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草素的提取, 故对蛹虫草虫草素、虫草多糖的综合提 取应选择水热回流提取法. 2. 2 虫草素、虫草多糖综合提取条件选择
用水热回流提取法进行 L 9( 34 ) 正交试验, 结果
见表 4; 虫草素、虫草多糖得率直观分析结果分别见 表 5、表 6; 方差分析结果见表 7、表 8.
表 1 正交试验条件 因素
T able 1 T he co ndit ions of the or thog onal test
水平编号 Level code
1 2 3
A 提取温度 A Ext ract ion t emperat ure
( ℃)
60
80
100
B 提取次数 B Ext ract ion
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西 北 植 物 学 报
25 卷
用提供有价值的参考数据.
液, 用水定容至 200 m L .
1 材料与方法
超声波醇提法: 取蛹虫草粉末 2. 50 g, 用 50 mL 50% 乙醇, 超声波提取 30 min, 重复提取 3 次, 合并
1. 1 材料和仪器
滤液, 用 50% 乙醇定容至 200 mL .
3. 256 667 3. 830 000 4. 020 000 372. 916 6 124. 305 5 0. 947 789
m L 蒸馏水, 超声波提取 30 min, 重复提取 3 次, 合
1. 2. 2 单因素确定虫草素最佳提取方法 水热回 并滤液, 以下同上.
流提取法: 取蛹虫草粉末 2. 50 g , 用 50 mL 蒸馏水
超声波醇提法: 取蛹虫草粉末 10. 00 g, 用 100
于 95～100℃热回流提取 2 h, 重复提取 3 次, 合并 m L 50% 乙醇, 超声波提取 30 min, 重复提取 3 次,
摘 要: 以蛹虫草为材 料, 采用超 声波水提法、超声波 醇提法、水热回流 法和醇热回 流法 4 种提 取方法选 择虫草素 和虫草多 糖的最优提取方法, 并用正交 试验方法考 察水热回 流法中提取 温度、提取次数、提取时 间、料液 比 4 个因 素对虫草素、虫草多糖综合提取效率的影响, 以确定从 蛹虫草中综合提取虫草素、虫草多糖最佳工艺. 结果表明, 水 热回流法 是提取虫草多糖和 虫草素的最优提取方 法, 其最佳 工艺条件为: 用 10 倍量 的水于 80℃ 热回流提取 3 次, 每次 90 min. 关键词: 蛹虫草; 虫草素; 虫草多糖; 提取工艺; 正交试验法 中图分类号: Q 949. 325 文献标识码: A
1525 型高效液相色谱系统( 美国 Wat ers 公司) 1. 2. 3 单因素确定虫草多糖最佳提取方法 水热
由 1525 型液压恒波泵、2487 双通道紫外检测器和 回流提取法: 取蛹虫草粉末 10. 00 g 用 10 倍量蒸馏
Br eeze 系统 软 件 组成; 三 用 恒 温 水 浴箱 ( 北 京) ; 水 95～100℃热回流提取 2 h, 重复提取 3 次, 合并
合并滤液, 用 50% 乙醇定容至 200 m L .
度 A、提取次数 B、提取时间 C 及料液比 D) , 分别取
超声波水提法: 取蛹虫草粉末 2. 50 g , 用 50 m L 3 水平对虫草素、虫草多糖综合提取的影响, 以确定
蒸馏水, 超声波提取 30 min, 重复提取 3 次, 合并滤 最佳提取条件. L 9( 34) 正交试验条件因素见表 1.
X 收稿日期: 2004-11-05; 修改稿收到日期: 2005-08-11 基金项目: 陕西省科技攻关项目[ 2004, K -G 12( 7) ] ; 西北大学校基金资助项目( 2005, N W 0036) 作者简介: 王英娟( 1971- ) , 女, 陕西泾阳人, 讲师, 硕士研究生, 从事生物技术研究工作.
Integrated Extracting Technology of Cordycepin and Polysaccharides in Cordycep s militaris
WA NG Ying -juan, L I Duo-w ei, WANG Yi-chao, ZHENG T ing -t ing
蛹虫 草[ Cordy cep s mil itar is ( F r. ) Link. ] , 别 名北虫草, 属子囊菌 亚门( Ascomyx ot inae ) 麦角菌 科 ( Clavicipitaceae) 虫草属[ 1] , 与冬虫夏草 同属,草多糖具有独特的药理及保健功效: 虫草素具 有抗病毒、抑菌、明显抑制肿瘤生长, 与环磷酰胺有
( College of Lif e S ciences, N ort hw es t U n ivers ity , X ipan 710069, Chin a)
Abstract: Supersonic w at er ex t ract ion, supersonic et hanol ex tract io n, hy drot hermal ref lux ing ext ract ion and ethanol t hermal ref lux ing ex t ract ion were screened w it h Cordy cep s mili tari s t o f ind out w hich of t hem w ould be t he opt im al m et hod t o ex tr act cordy cepin and poly saccharides and an ort hogo nal ex periment w as carr ied out t o study t he integr at ed ef fect s of the t em perat ure, number , period, raw mat er ial -ex tr act ing solutio n rat io of hydr ot herm al ref luxing ext ract io n on t he ex tr act ing r ates o f cordycepin and po lysaccharide and t hus f ind out t he best int eg rat ed t echno logy t o ex t ract cordycepin and po lysaccharide f rom Cordycep s militar is. T he result s show ed t hat hydrot her mal r ef luxing ex t ract ion w as t he best ex t ract ion m et hod of cordycepin and poly saccharide and it s opt imal t echnolo gical condit io ns w ere t hat t he ex tract io n w ere run t hr ee t imes w it h t he raw m at erial-w at er ratio at 1/ 10 and it last ed 90 minut es each t im e. Key words: Cordy cep s mil itar is; cor dycepin; pol ysaccharide; ext racting technolo gy; ort ho gonal ex periment
滤液, 用水定容至 200 m L .
合并滤液, 以下同上.
醇热回流提取法: 取蛹虫草粉末 2. 50 g , 用 50 1. 2. 4 虫草素、虫草多糖最佳提取条件 用正交试
mL 50% 乙醇 80℃热回流提取 2 h, 重复提取 3 次, 验法 L 9( 34) 对水热回流提取法中 4 个因素( 提取温
超声萃取器.
馏水溶解, 并定容于 50 mL 容量瓶中( 用于测定虫
蛹虫 草由江 苏虫 草种植 基地 提供, 样品 均于 草多糖) . 所有乙醇上清液合并, 并用水定容至 200
70 ℃干 燥后研 成粉 末待 用.
m L ( 用于测定虫草素) .
虫草素对照品为 Sigm a 公司产品; 所有化学试
醇热回 流提取 法: 取 蛹虫草 粉末 10. 00 g, 用
明显的协同作用, 并有降血糖的作用; 虫草多糖具有 提高机体免疫功能, 抑制肿瘤作用[ . 2～ 5] 近年来蛹虫 草受到了广泛关注, 并大面积地种植开发, 已有大量 药品、保健食品上市. 为了更好地开发利用蛹虫草资 源, 本研究采用正交试验对蛹虫草中虫草素、虫草多 糖综合提取工艺进行了深入研究, 为进一步开发利
剂均为分析纯.
100 mL 50% 乙醇 80℃热回流提取 2 h, 重复提取 3
1. 2 方 法
次, 合并滤液, 以下同上.
1. 2. 1 分析测 试方法 用 HP L C 法测虫 草素含
超声波水提法: 取蛹虫草粉末 10. 00 g, 用 100
量[ 6] , 用苯酚-硫酸法测虫草多糖含量[ 7] .
SHZ-95 型循环水真空泵( 河南) ; UV -265 型分光光 滤液, 减压浓缩至 1∶1( w / v) , 冷却后加入 3 倍量乙
度计( 日本 Shimadzu 公司) ; RE-52A 型旋转薄膜蒸 醇使其沉淀, 浸出上清液, 沉淀再加少量水溶解, 加
发器( 上海) ; JA2003 型电子天平( 上海) ; HS3120 型 入 2 倍量使其沉淀, 重复 3 次, 将最后的沉淀物用蒸
西北植物学报, 2005, 25( 9) : 1863—1867 Acta Bot. Boreal. -Occident . Sin.