微生物许可检验项目 问题3
检验项目
特殊用途化妆品
非特殊用途 育 化妆品 发 类
染 发 类
烫 发 类
脱 毛 类
美 乳 类
健 美 类
除 臭 类
祛 斑 类
防 晒 类
菌落总数
SCDLP培养基
配培 养基 和稀 释液
供试 液的 制备
十六烷三甲基 溴化铵琼脂
增
菌 18~24h 培 36±1℃ 养
分 离 18~24h 纯 36±1℃ 化
无菌落或无特征菌落
灰白色、扁 平、周围有 水溶性蓝绿 色素
特征菌落
镜检
书写检验 记录单
最终结 果判断
★铜绿假单胞菌检查流程图
革兰染色、镜检→ 氧化酶试验 绿脓菌素试验
金黄色葡萄球菌 检验操作流程
未检出2天，检出3天
金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）为革兰氏阳性球菌，呈葡萄状排
该列菌，是葡无萄球芽菌中胞对人，类无致病荚力最膜强的，一种能，分能引解起人甘体局露部醇化脓，性病血灶，严重 时浆可凝导致固败血酶症。阳性。
SCDLP培养基或 7.5%NaCl肉汤
外部审核时） • 相互协作； • 测试结果的证明。
• 日常维护： • 设备的计量与保证； • 超净台及时清洁与杀菌（操作前后半
小时）； • 检验后材料的及时处理； • 环境卫生（沉降菌的检测每周）。
问题2
油性样品如何处理
稀释液生理盐水-极性溶剂、液体石蜡-非极性溶剂、吐温80-非离子型表面活性剂， 分子一端是亲水基团，一端是亲油基团，常用作增溶剂和油/水乳化剂。决定了加 入的顺序。
• 本方法根据霉菌和酵母菌特有的形态和
革兰氏染色操作流程
保证检验结果正确
• 设备： • 恒温培养设备 • 高压灭菌器（验证） • 超净工作台（生物安全柜） • 均质器(旋涡混合器) • 天平（0.1g） • 显微镜（可要可不要无硬性要求）
常规洁净工作台设置
目前大部分微生物实验室布局
• 人员操作方面： • 无菌操作，避免污染； • 一定专业技术或工作经验（招聘与
氧革兰氏阴性无芽胞杆菌，在44.5℃培 养24h—48h能发酵乳糖产酸并产气。 • 该菌主要来自人和温血动物粪便，可作 为粪便污染指标来评价化妆品的卫生质 量, 推断化妆品中有否污染肠道致病菌的
双倍胆盐乳糖
产酸：黄色 产气：气泡
EMB琼脂
镜检
配培 养基 和稀 释液
供试 液的 制备
增
菌 44.5±0.5℃ 检查
配培 养基 和稀 释液
供试 品的 处理
耐盐分
Baird Parker’s 或血琼脂
增 菌 24±2h 培 36±1℃ 养
分
离 24~48h 纯 36±1℃ 化
镜检
特征菌落
无菌落或无特征菌落
书写检验 记录单
最终结 果判断
革兰染色、镜检→ 生化试验:血浆凝固酶试验
甘露醇发酵试验
金黄色葡萄球菌检查流程图
灰/黑色
接种阳性菌计算回收率
• 推荐了解： • 人员培训能力掌握的检验重要指标。 • 有条件可做视具体样品测试结果。 • 在膏霜类化妆品中,微生物都是吸附或附着
于颗粒状的原料中,检测时不易洗脱下来,因 此,需要验证检测方法的有效性。
耐热大肠菌群 检验操作流程
• 未检出2天，检出3-4天
• 耐热大肠菌群 Thermotolerant coliform bacteria系一群需氧及兼性厌
培 养
24-48h
结果 判断
不产酸不产气
书写检验 记录单
最终结 果判断
★粪大肠菌群检查流程图
分离培养
产酸产气
36±1 ℃
18~24h
蛋白胨水
培养
特
44.5±0.5℃ 24±2h
征 菌
落 靛基质
液面玫瑰红色
紫黑色
结果报告
根据发酵乳糖产酸产气，平 板上有典型菌落，并经证实 为革兰氏阴性短杆菌，靛基 质试验阳性，则可报告被检 样品中检出耐热大肠菌群。
化妆品微生物五项检验
菌落总数检验
• 菌落总数（Aerobic bacterial count）：化妆
品检样经过处理，在一定条件下培养后（如培 养基成分、培养温度、培养时间、pH值、需氧 性质等），1g（1mL）检样中所含菌落的总数。 所得结果只包括一群本方法规定的条件下生长 的菌嗜落总中数温的的测定需便氧于性判明和样兼品性被细厌菌氧污菌染的落程总度数，是。对样品
Baird Parker’s平板 血浆凝固酶试验
血浆凝块
甘露醇高盐琼脂
液态血浆
结果报告
凡在上述选择平板上有可疑菌落生长，经染 色镜检，证明为革兰氏阳性葡萄球菌，并能 发酵甘露醇产酸，血浆凝固酶试验阳性者， 可报告被检样品检出金黄色葡萄球菌。
霉菌和酵母菌 检验操作流程
• 霉菌和酵母菌数测定（Determination of molds and yeast count）化妆品检 样在一定条件下培养后，1g或1mL化妆 品中所污染的活的霉菌和酵母菌数量， 以判明化妆品被霉菌和酵母菌污染程度 及其一般卫生状况。
铜绿假单胞菌 检验操作流程
• 未检出2天，检出4天
• 铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）属于假单胞菌属，为革兰
氏阴性杆菌，氧化酶阳性，能产生绿脓 该菌对人菌有致素病。力，此可使外伤处还化脓能，液引起化败血明症等胶。，在自还然界原中分硝布甚酸广盐，空气、 水、土壤为亚硝酸盐，在 42℃±1℃条件下能生长。
进行卫生学总评价的综合依据。
测试液 的制备
混合平板 的制备
细菌的培 养
书写检验 记录单
数据 处理
检查结果、 观察与计数
TTC亦不可多加会抑制菌落生长
• 为便于区别化妆品中的颗粒与菌落，可在每 100mL 卵磷脂吐温 80 营养琼脂中加入 1mL 0.5％的 TTC 溶液，如有细菌存在，培养后 菌落呈红色，而化妆品的颗粒颜色无变化。
生化试验 硝酸盐还原试验 42℃生长试验 明胶液化试验
黄绿色 菌膜
灰白色 湿润
十六烷三甲基溴化铵平板
粉红/ 紫红色
SCDLP培养基
氧化酶试验
盐酸层呈粉紫色 氯仿层呈蓝绿色
绿脓菌素试验
明胶液化 试验
N2
硝酸盐还原产气试验 明胶液化 明胶培养基（高层）
结果报告
被检样品经增菌分离培养后，经证实为革兰 氏阴性杆菌，氧化酶及绿脓菌素试验皆为阳 性者，即可报告被检样品中检出铜绿假单胞 菌；如绿脓菌素试验阴性而液化明胶、硝酸 盐还原产气和42℃生长试验三者皆为阳性时， 仍可报告被检样品中检出铜绿假单胞菌。