复杂的多态性更加显现，亦推动了HLA与群体 及自然选择关系的研究，更促进了人们对疾病 本质的认识。
（一）血清学分型法
应用一系列已知抗 HLA 的特异性标准分 型血清与待测淋巴细胞混合，借助补体的 生物学作用介导细胞裂解的细胞毒试验。
操作简便易行 节约试剂、结果可靠、重复性好 无需特殊设备
耗时长 不同批号抗血清结果 常有不同
2. PCR-SSO分型法
序 列 特 异 性 寡 核 苷 酸 - 聚 合 酶 链 反 应 （ PCR-
sequence specific oligonucleotide, PCR-SSO）是以
PCR 为基础，将凝胶上扩增的 HLA基因 DNA 转移
至硝酸纤维膜或尼龙膜，进而用放射性核素或酶、
地高辛等非放射性物质标记的寡核苷酸探针与之 进行杂交，从而对扩增产物作出HLA型别判断。
1.移植器官或组织的抗原性异物属性
2.排斥移植物的记忆特性
3.负向免疫调节的必要性
二、HLA是诱导排斥反应最强的靶抗原
主要组织相容性复合体（major histocompatibility
complex,MHC）编码的人类白细胞抗原（human
leukocyte antigen,HLA），是不同个体间进行器官或组织
lymphocyte reaction, MLR）为基本技术的HLA分
型法。能用本法测定的抗原称为LD抗原（
lymphocyte defined antigen）,包括HLA-D、-DP。 MLC分为单向MLC和双向MLC
1. 单向MLC
将已知HLA型别的分型细胞用丝裂霉素C或X线照射预处
理，使其失去增殖能力仅作为刺激细胞；而以具有增殖能
分类： 斑点或印渍法 反向斑点或印渍法
PCR-SSO是Ⅱ类HLA分型应用最广泛的方法， 能够鉴定所有已知序列的HLA-DR、－DQ、－ DP等位基因
技术，使HLA分型得以在更精密的水平上进行。
1. RFLP与PCR-RFLP分型法
限制性片断长度多态性（ restriction fragment length polymorphism, RFLP）分析：最早建立
的研究HLA多态性的DNA分型技术
PCR-RFLP 分型法：对 DNA 片段进行体外扩 增，然后再用限制性内切酶进行酶切分析，可 使限制性长度分析的敏感度大大增加
移植的类型
自体移植 同系移植 同种异体移植 异种移植 原位移植
根据移植物来源分类
根据移植部位分类
异位移植 器官移植
移植物种类分类
支架组织移植 细胞移植
移植种类和命名
移植名称
自体移植
供者、受者关系
同一个体
举例
自体皮片移植
同系或同基因移植
同系或同基因 的个体间
同种不同基因 的个体间 异种动物间
人的单卵双生子间的器官移植 同品系小鼠的皮片移植
用于HLA分型的微量细胞毒试验
微量细胞毒试验判定标准
死（着染）细胞（%）
记分
结果判断
0～10
1
阴性
11～20
21～50 51～80 >80
2
4 6 8 0
可疑阴性
弱阳性 阳性 强阳性 未试验或不能读数
（二）细胞学分型法
以混合淋巴细胞培养（mixed lymphocyte
culture, MLC）或称混合淋巴细胞反应（mixed
在三类HLA分子中，Ⅰ、Ⅱ类分子是触发移植排斥 反应的首要抗原，尤其是HLA-DR位点的抗原分子 HLA发挥双重作用：
介导宿主抗移植物反应(HVGR);
参与移植物抗宿主反应(GVHR)。 HLA的识别方式： 直接识别
间接识别
第二节 HLA配型与应用分析
一、HLA配型
HLA分型方法的改进和不断完善，使得HLA
人与人之间的肾移植 不同品系小鼠间的皮片移植 狗的器官移植给猩猩 猪的器官移植给狗
同种异基因移植
异种移植
第一节 器官移植与移植免疫的特点
移植手术后移植物能否存活取决于： 1.移植器官在移植过程中活力的保存； 2.手术时血管吻合和血液循环重建的质量； 3.移植排斥反应的控制。
一、器官和组织移植的一般规律
力的受检者外周血单个核细胞为反应细胞。两者混合培养 时，反应细胞可对刺激细胞发生应答而增殖，用3H-TdR掺 入法测定细胞增殖强度，从而判断受检细胞的HLA型别。
根据选用的刺激细胞类型分为：
1．阴性分型法 2．阳性分型法
2. 双向MLC
遗传型不同的两个个体淋巴细胞在体外混合培 养时，由于两者HLA不同，能相互刺激导致对方淋 巴细胞增殖，故称双向MLC。在此试验中，各自 的淋巴细胞既是刺激细胞，又是反应细胞可通过形态法
计数转化细胞 。
本法不能判断型别，只能说明供、受体HLA抗原配合程度
（三）分子生物学分型法
分子生物学技术的迅速发展，使得HLA的
DNA分型技术应运而生，并在开展DNA限制性
片段长度多态性分析、DNA指纹图、等位基因特
异性寡核苷酸杂交等基础上，引入多聚酶链反应
第二十六章 移植免疫及其免疫检测
移植（transplantation）是指将健康细胞、组 织或器官从其原部位移植到自体或异体的一定部位、 用以替代或补偿机体所丧失的结构和（或）功能的 现代医疗手段。被移植的细胞、组织或器官称移植 物（graft），提供移植物的个体称为供体(donor)， 接受移植物的个体称为受体（recipient）。
细胞移植时发生排斥反应的主要成分，这种代表个体特异
性的同种抗原又称组织相容性抗原(histocompatibility)或
移植抗原(transplantation antigen)。
HLA的遗传特征
HLA是人体多态性最丰富的基因系统。
HLA分型要比ABO血型复杂的多，每个人不是从父母分别得到一个 基因，而是得到一串基因 (HLA单倍型)。每人遗传到二串“冰糖葫芦 ，其上的“红果”(基因)以A、B、C、D、DR、DQ和DP为序。 A有28种红果(分别记为A1、、A2、A3、A9...)， B有61种(记为B5、B7、B8、B12...)， DR有24种(记为DR1、DR2、DR3、DR4...)等。 七彩红果共有164种编号，如不同遗传排列的红果随机组合，按理论推 算，“冰糖葫芦”有五亿多种变化，能组合33亿多种HLA分型。 理论推测的HLA分型数量巨大，但对一个具体的民族来说并非如此。