华南某种鸡场禽白血病病毒感染对4种免疫抗体水平的影响司兴奎1，尹庆亮2，张济培1，陈建红1（1.佛山科学技术学院，广东佛山528231；2.化州市丽岗中学，广东化州525100）摘要：采用ELISA方法对华南某种鸡场4群种鸡直肠拭子进行禽白血病病毒p27（ALV-p27）抗原检测，同时采集相应种鸡血清样品并对新城疫（ND）、禽流感（AI）H5、H9亚型、减蛋综合征（EDS-76）、传染性支气管炎（IB）的免疫抗体水平进行检测，并按照相应标准计算对应免疫抗体合格率。
结果表明：A、B、C、D群种鸡直肠拭子中ALV-p27抗原检出率分别为86％（12/14）、77%（23/30）、37％（11/30）和56％（10/18）；与其它3群种鸡相比ALV-p27抗原检出率最高的A群种鸡其对应的ND、EDS-76、AI H5及H9亚型抗体水平最低，分别为7.26log2、4.74log2、7.32log2及6.21log2；ALV-p27抗原检出率最低的C群种鸡其AIV H5亚型及IB抗体水平最高，分别为8.65log2和7012log2，且C群与其它3群相比AI H5亚型、ND及IB抗体合格率/阳性率最高，分别为90％（18/20）、95％（19/20）和100％（20/20）。
结果表明，ALV感染的严重程度与4种免疫抗体水平呈负相关。
关键词：种鸡；禽白血病病毒感染；免疫抗体水平Effects of Avian Leukosis Virus Infection on Four Immunized Antibody Levels inOne Chicken Breeder Farm in South ChinaSI Xingkui1，YIN Qingliang2，ZHANG Jipei1，CHEN Jianhong1（1.Foshan Science and Technology University，Foshan，Guangdong528231；2.Huazhou Ligang Middle School，Huazhou，Guangdong525100）Abstract：ELISA was used to detect the p27antigen of avian leukosis virus（ALV-p27）in fecal swabs of four flocks in one chicken breeder farm in south China，and serum samples of corresponding flock were collected for detection immunized antibody level and satisfied immunization rate of four infectious diseases i.e.newcastle disease（ND），avian influenza（AI）subtype H5or H9，egg dropping syndrome-76（EDS-76），infectious bronchitis（IB）.The results showed that the detection rate of ALV-p27antigen of A，B，C，D flock was86%（12/14），77%（23/30），37%（11/30）and56%（10/18），respectively.The immunized antibody level of ND，AI（H5），AI（H9）and EDS-76of A flock which had the highest ALV-p27antigen detection rate in comparison with that of the other three flocks was the lowest，which was7.26log2，4.74 log2，7.32log2and 6.2log2，respectively；C flock which had the lowest ALV-p27antigen detection rate had the highest immunized antibooly level of AI（H5）and IB，which was8.65log2and7012log2，and the satisfied immunization rate收稿日期：2008-04-01修回日期：2009-02-24of AI（H5），ND and IB was the highest，i.e.90%（18/20），95%（19/20）and100%（20/20）.The results showed that ALV infection rate was negative corresponding with the four immunized antibody levels.Key words：chicken breeder；avian leukosis virus infection；immunized antibody level禽白血病是由禽白血病病毒（ALV）引起的以造血细胞恶性增生并形成肿瘤为特征的一类多病型的渐进性传染病，包括淋巴细胞白血病、成红细胞白血病、成髓细胞白血病等多种病型，以淋巴细胞白血病最为常见。
ALV鸡体分离株可分为6个，即A、B、C、D、E和J亚群。
其中A、B、C、D亚群均为外源性病毒，具有完整的病毒颗粒和传染性，主要引起3月龄以上鸡发生肿瘤；E亚群为常见的内源性致瘤病毒；J亚群为导致肉用型鸡骨髓样细胞瘤为主的白血病。
自1868年Roloff 首次报道本病以来，世界上多个国家都有该病发生和流行的报道［1］。
我国在20世纪50年代在甘肃首次报道可疑禽白血病病例以来，几乎每个省（市、区）均发现该病存在［2～4］。
禽白血病对鸡的危害主要体现在以下几个方面：可引发肿瘤造成一定死亡率，造成亚临床感染进而影响鸡群的生产性能和免疫力下降，ALV可通过水平和垂直传播成为污染以鸡胚为原料的人和动物疫苗等，给养鸡业造成严重的经济损失［4～6］。
某种鸡场，在开产前后开始出现死亡和淘汰增加，且存在长期腹泻、产蛋量下降，不能达到产蛋高峰，畸形蛋和软壳蛋增多，种蛋的受精率及孵化率降低等生产异常现象。
对该场病鸡进行现场剖检结果发现肝脏、脾脏、肾脏及腺胃有增生性肿胀，怀疑为禽白血病病毒感染。
为澄清该种鸡场生产性能下降及鸡增生性肿胀的原因，采用IDEXX公司生产的ELISA试剂盒对ALV-p27抗原进行检测，同时测定4种免疫抗体水平，通过将抗体水平与ALV感染情况比较以明确ALV感染的程度及其对机体免疫功能的影响。
1材料与方法1.1被检血清与直肠拭子取自华南某种鸡场育成期及产蛋期鸡，共4群，每群的饲养数量约在8000～10000只，其中A和D群为育成期，分别为35和19周龄，B和C 群为开产后种鸡分别为43和62周龄（产蛋时间为38周龄）。
A、B、C和D群的样品采集情况为：直肠拭子分别为14、30、30和18份，血清样品采自已取直肠拭子的个体，其数量分别为19、19（20）、20和18份。
1.2检测试剂盒禽白血病抗原检测ELISA试剂盒（09254-EB116）及传染性支气管炎抗体检测ELISA试剂盒（09262-AC302）由IDEXX公司生产；禽流感H5N1亚型标准抗原、标准阴性及阳性血清均购自中国农业科学院哈尔滨兽医研究所；禽流感病毒H9亚型、新城疫病毒La Sota株及减蛋综合征病毒均为本实验室保存。
1.3禽白血病抗原的检测按公司试剂盒说明书进行，所检测的ALV为A、B、C、D、E和J亚群的p27抗原。
1.4传染性支气管炎抗体检测按公司试剂盒说明书进行，采用其提供x-Check软件分析血清的效价。
1.5禽流感H5亚型抗体水平检测按《高致病性禽流感疫情处置技术规范（试行）》（2004）进行［1，7］。
1.6ND、禽流感H9亚型及减蛋综合征抗体水平检测参照上文1.5方法，按照微量HI试验方法进行。
2结果2.1禽白血病抗原的检测结果采用ELISA试剂盒对A、B、C和D群种鸡直肠拭子分别进行检测，结果表明感染率分别为86％（12/14）、77%（23/30）、37％（11/30）和56％（10/18），见表1及图1。
2.2禽流感H5、H9亚型抗体水平检测结果2.2.1禽流感H5亚型抗体水平检测结果按照《高致病性禽流感疫情处置技术规范（试行）》对4群种鸡血清中禽流感H5亚型抗体表1各群种鸡直肠拭子检测禽白血病抗原的结果阳性率（％）867737561.55±0.891.40±0.910.52±0.840.80±1.06阳性样本（份）12231110阴性样本（份）27198被检样本（份）14303018A群B群C群D群组别S/P值注：S/P>0.2判定为阳性。
水平检测结果表明，按照抗体效价达到6log2为免疫合格的判定标准，A 、B 、C 和D 群的免疫合格率分别为74％（14/19）、84％（16/19）、90％（18/20）和78％（14/18），见表2及图1。
2.2.2禽流感H9亚型抗体水平检测结果对4群种鸡血清中禽流感H9亚型抗体水平检测结果表明，按照抗体效价达到6log2为免疫合格的判定标准，A 、B 、C 和D 群的免疫合格率分别为58％（11/19）、90％（18/20）、70％（14/20）和94％（17/18），见表3及图1。
2.3新城疫抗体水平检测结果对4群种鸡血清中新城疫（ND ）抗体水平检测结果表明，按照抗体效价达到6log2为免疫合格的判定标准，A 、B 、C 和D 群的免疫合格率分别为84％（16/19）、90％（18/20）、95％（19/20）和94％（17/18），见表4及图1。
2.4减蛋综合征抗体水平检测结果对4群种鸡血清中减蛋综合征（EDS-76）抗体水平检测结果表明，按照抗体效价达到6log2为免疫合格的判定标准，A 、B 、C 和D 群的免疫合格率分别为42％（11/19）、70％（18/20）、65％（14/20）和61％（17/18），见表5及图1。
2.5传染性支气管炎抗体水平检测结果按照IDEXX 公司试剂盒的判定标准对4群种鸡血清中传染性支气管炎（IB ）抗体水平检测结果表明，A 、B 、C 和D 群的抗体阳性率分别为89％（17/19）、84％（16/19）、100％（20/20）和89％（16/18），见表6及图2。