淫羊藿苷提取转移率/ % 88114 79157
淫羊藿为叶类药材 ,质地疏松 。水煎法和乙醇回流法提取 , 溶剂用量大 ,提取过程中需加热 ;试验中发现 ,提取液中含大量 杂质 , 不利于淫羊藿苷的纯化精制 。因此 , 另选渗漉法进行考 察。
21213 渗漉法 : 称取淫羊藿药材 Ⅱ粗粉 105 g , 共 4 份 , 室温 下分别用 30 %、50 %、70 %、90 %乙醇润湿 , 装入渗漉筒中 , 加 入相应浓度乙醇适量 ,浸渍过夜 ,进行渗漉 。分段收集渗漉液 , 照上述色谱条件测定各段渗漉液中淫羊藿苷的含量 , 并计算淫 羊藿苷提取转移率 ,结果见表 2 。
ABSTRACT OBJ EC T IV E : To optimize t he ext ractio n technology of icariin f ro m Her ba Epimedii1 M E T HODS : Wit h t he ext ractio n t ransfer rate of icariin as index , t he different ext ractio n met hods and ext ractio n co nditio ns were investigated1 R E2 SUL TS : The percolatio n met ho d was co nfir med to be t he op timal ext ractio n technology in w hich 60 %～75 % alco hol was used as solvent and t he amount of t he collected percolate was 8 times t hat of t he medicinal material1 U nder t he above co nditio n , t he ext ractio n t ransfer rate of icariin was as high as 90 %1 CON CL U S ION : The ext ractio n technology is highly efficient , re2 source - saving and p racticable1 KEY WO RDS Icariin ; Ext racting technology ; Percolatio n met ho d
21111 对照品溶液的制备 :精密称取淫羊藿苷对照品 10 mg , 置于 25 mL 容量瓶中 ,以甲醇定容至刻度 ,摇匀 ,即得 。 21112 提取物溶液的制备 :精密称取淫羊藿提取物 10 mg ,置 于 50 mL 容量瓶中 ,以甲醇定容至刻度 ,摇匀 ,即得 。 21113 药材样品溶液的制备 : 精密称取淫羊藿药材 011 g , 置 于 50 mL 容量瓶中 , 加甲醇适量 , 超声 30 min , 以甲醇定容至 刻度 ,摇匀 ,即得 。 21114 色谱条件 [4 ～6 ] : 色谱柱为 Dia mo nsil ( 钻石) C 18 ( 250 mm ×416 mm , 5μm) , 流动相为甲醇 - 水 ( 60 ∶40) , 流速为 110 mL ·mi n - 1 , 波长为 270 nm , 柱温为 25 ℃, 进样量为 20 μL 。色谱见图 1 。
淫羊藿苷对照品 (中国药品生物制品检定所 , 批号 : 110737 - 200312) ; 淫羊藿药材 Ⅰ购于重庆市中药材市场 ,淫羊 藿药材 Ⅱ采自四川省达州市宣汉县 , 均经重庆市中药研究院生 药室李全生副研究员鉴定为巫山淫羊藿 ; 淫羊藿提取物 (重庆 市中药研究院自制 ,批号 : 051201 、051202 、051203) ;甲醇 、乙腈 为色谱纯 ,水为重蒸馏水 ,其余试剂均为分析纯 。
表 1 水煎法与乙醇回流法提取效果比较
Ta b 1 Extract ion results of water decoct ion vs1 ethanol
ref l ux extract ion
提取方法 水煎法 乙醇回流法
提取液体积/ L 41106 32127
提取液中淫羊藿苷含量/ g 6116 5156
1 材料
111 仪器 U V - 2000 型可见 - 紫外分光光度仪 (日本日立公司) ;
2695 型高效液相色谱仪 、2996 型 DAD 检测器 、Empower 工作 站 (美国 Waters 公司) ; A E G - 45 SM 型十万分之一电子天平 (日本岛津公司) ; KQ 5200 型超声波清洗器 (昆山市超声仪器 有限公司) 。 112 试药
淫羊藿中淫羊藿苷提பைடு நூலகம்工艺研究
王 欣 * ,王婷婷 ,王海军 ,翁代群 ,阳 勇 ,李 青 ,罗维早 # (重庆市中药研究院 ,重庆市 400065)
中图分类号 R28412 ; R943
文献标识码 A
文章编号 1001- 0408 (2009) 09 - 0670 - 02
摘 要 目的 :优选淫羊藿中淫羊藿苷的提取工艺 。方法 :以淫羊藿苷提取转移率为考察指标 ,对不同提取方法和提取条件进行考 察 。结果 : 最佳提取工艺为采用渗漉法 ,用 60 %～75 %乙醇作溶媒 ,收集渗漉液的量为药材的 8 倍 。此时 ,淫羊藿苷提取转移率为 90 %。结论 :该提取工艺效率高 、节约能源 ,方法可行 。 关键词 淫羊藿苷 ;提取工艺 ;渗漉法
·670 · China Phar macy 2009 Vol . 20 No . 9
中国药房 2009 年第 20 卷第 9 期
21117 稳定性试验 : 取淫羊藿苷对照品溶液 ( 010453 mg · mL - 1) ,照上述色谱条件 ,于 0 、2 、4 、8 、16 h 测定 。结果 ,淫羊藿 苷峰面积积分值的 R S D = 1103 % ( n = 5) ,表明对照品溶液在 16 h 内稳定性较好 ,能满足测定要求 。 21118 重现性试验 : 精密称取 6 份淫羊藿提取物 ( 批号 : 051201) 约 01005 g , 分别置于 50 mL 容量瓶中 , 按“21112”项 下方法制备 ,照上述色谱条件测定 。结果 ,提取物中淫羊藿苷的 平均含量为 55100 % , R S D = 1119 % ,表明方法重现性较好 。 21119 加样回收率试验 : 精密称取 6 份已知含量的淫羊藿提 取物 (批号 : 051201 , 含量为 55100 %) 约 01005 g , 置于 50 mL 容量瓶中 , 分别加入淫羊藿苷对照品溶液 ( 01255 8 mg ·mL - 1) 8 、8、10、10、12、12 mL ,按“21112”项下方法制备 ,照上述色谱条 件测定 。结果 , 平均加样回收率为 99131 % , R S D = 2125 % ( n = 6) 。 211110 样品含量测定 : 分别精密称取淫羊藿提取物 (批号 : 051201 、051202 、051203) 约 01005 g ,置于 50 mL 容量瓶中 ;淫 羊藿药材 Ⅰ和淫羊藿药材 Ⅱ各约 01100 g , 置于 50 mL 容量瓶 中 , 按“21111”项下方法制备 , 照上述色谱条件测定 , 计算淫羊 藿苷含量 。结果 , 3 批淫羊藿提取物 、淫羊藿药材 Ⅰ、淫羊藿药 材 Ⅱ中 淫 羊 藿 含 量 依 次 为 55108 % 、56118 % 、54189 % 、 0170 %、1197 %。 212 淫羊藿苷提取方法筛选 [7 ～9 ] 21211 水煎法 : 称取淫羊藿药材 Ⅰ粗粉 1 kg , 加水煎煮 3 次 (分别加 20 、16 、16 倍量水) ,每次 1 h ,分别收集提取液 ,照上述 色谱条件测定淫羊藿苷含量 , 按下式计算淫羊藿苷提取转移 率 :转移率 = 提取液中淫羊藿苷量/ (药材用量 ×药材中淫羊藿 苷含量 ×1 000) ×100 %。 21212 乙醇回流法 : 称取淫羊藿药材 Ⅰ粗粉 1 kg , 加 70 %乙 醇回流 3 次 (分别加 14 、12 、12 倍量 70 %乙醇) ,每次 115 h ,分 别收集提取液 , 照上述色谱条件测定提取液中淫羊藿苷的含 量 , 并计算淫羊藿苷提取转移率 。水煎法和乙醇回流法提取效 果比较见表 1 。
淫羊藿为小檗科植物淫羊藿 Epi medi u m brev icor n u m Maxim1、 箭 叶 淫 羊 藿 Epi m edi u m sagit tat um ( Sieb1 et Zucc1) 、巫山淫羊藿 Epi medi u m w ushanense T1S1 Ying 等 的干燥地上部分 ,又称仙灵脾 。其药用历史悠久 ,历代本草书籍 均有记载 ,为《中国药典》收载品种之一 ,具有补肾壮阳 、祛风除 湿等功效 , 用于治疗阳痿遗精 、小便淋漓 、盘骨痿软 、风湿痹痛 等证 , 为常用补虚壮阳中药 [1 ]。淫羊藿苷是淫羊藿的主要活性 成分之一 。现代药理学研究表明 ,淫羊藿苷具有免疫调节 、抗肿 瘤 、影响内分泌和心血管系统等多种重要生物活性 , 是一种很 有应用前景的中药单体 [2 ,3 ]。本试验以淫羊藿苷提取转移率为 考察指标 ,对淫羊藿苷提取工艺进行研究 。
表 2 渗漉法考察结果
Ta b 2 Results of percolat ion method
乙醇浓 渗漉液中含淫羊藿苷的量/ g (收集的各段渗漉液体积/ mL ) 淫羊藿 淫羊藿苷提 度/ % 第1段 第2段 第3段 第4段 第5段 苷总量/ g 取转移率/ %
30 0117(375) 0(180) 0(240) 0(205) 0(215) 0117
2 方法与结果
211 淫羊藿苷含量测定
* 助理研究员 ,硕士 。研究方向 :中药化学 。电话 :023 - 89029050 。
E - mail :wangxin cq386 @sina 1co m # 通讯作者 :研究员 。研究方向 :中药化学及新剂型 。电话 :023 -