胚胎工程（一）
1.某课题组为解决本地奶牛产奶量低的问题，引进了具高产奶基因但对本地适应性差的纯种公牛。

（1）拟进行如下杂交：
♂A（具高产奶基因的纯种）×♀B（具适宜本地生长基因的纯种）→C 选择B作为母本，原因之一是胚胎能在母体内正常。

若C中的母牛表现为适宜本地生长，但产奶量并不提高，说明高产奶是性状。

为获得产奶量高且适宜本地生长的母牛，根据现有类型，最佳杂交组合是，后代中出现这种母牛的概率是（假设两对基因分别位于不同对常染色体上）。

（2）用以上最佳组合，按以下流程可加速获得优良个体。

精子要具有受精能力，需对其进行处理；卵子的成熟在过程中完成。

在过程○4的培养基中含有葡萄糖，其作用是。

为筛选出具有优良性状的母牛，过程○5前应鉴定胚胎的 ________________________ 。

子代母牛的优良性状与过程的基因重组有关。

（3）为了提高已有胚胎的利用率，可采取技术。

2.治疗性克隆对解决供体器官缺乏和器官移植后免疫排斥反应具有重要意义。

流程如下：
（1）过程①采用的是细胞工程的技术，过程②采用的是胚胎工程中
的技术。

（2）体细胞进行体外培养时，所需气体主要有O2和CO2，其中CO2的作用是维持培养液（基）的。

（3）如果克隆过程中需进行基因改造，在构建基因表达载体（重组载体）时必须使
用____________ 和____________ 两种工具酶。

基因表达载体上除目的基因外，还需有基因，以便选出成功导入基因表达载体的细胞。

（4）胚胎干细胞可以来自于囊胚的。

在一定条件下，胚胎干细胞可以分化形成不同的组织器官。

若将图中获得的组织器官移植给个体（填“A”或“B”），则不会发生免疫排斥反应。

3.Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。

科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗。

其技术流程如图：
（1）步骤①中，在核移植前应去除卵母细胞的。

（2）步骤②中，重组胚胎培养到期时，可从其内细胞团分离出ES细胞。

（3）步骤③中，需要构建含有基因Rag2的表达载体。

可以根据Rag2基因的____________设计引物，利用PCR技术扩增Rag2基因片段。

用Hind III和Pst I限制酶分别在片段两侧进行酶切获得Rag2基因片段。

为将该片段直接连接到表达载体，所选择的表达载体上应具有酶的酶切位点。

（4）为检测Rag2基因的表达情况，可提取治疗后小鼠骨髓细胞的，用抗Rag2蛋白的抗体进行杂交实验。

4. 下图表示通过核移植等技术获得某种克隆哺乳动物（二倍体）的流程。

回答下列问题：（1）图中A表示正常细胞核，染色体数为2n，则其性染色体的组成可为
____________。

过程①表示去除细胞核，该过程一般要在卵母细胞培养至适当时期再进行，去核时常采用_______的方法。

②代表的过程是__________。

（2）经过多次传代后，供体细胞中___________的稳定性会降低，因此，选材时必须关注传代次数。

（3）若获得的克隆动物与供体动物性状不完全相同，从遗传物质的角度分析其原因是______ ________________________________________________________________________
（4）与克隆羊“多莉（利）”培养成功一样，其他克隆动物的成功获得也证明了__________。

5.回答下列与哺乳动物精子和卵子发生有关的问题：
（1）精细胞经变形后，高尔基体发育形成精子的顶体，顶体内含有的能协助精子穿过卵母细胞的放射冠和透明带。

（2）某动物排卵时，减数第一次分裂尚未完成，此时卵子处于卵母细胞阶段，当该细胞发育至减数第二次分裂期时，才具备受精能力。

若在卵黄膜和透明带之间看到两个极体，则表明过程已完成。

（3）动物的早期胚胎移植到同种且与供体相同的动物体内，使之继续发育为新个体的技术叫做胚胎移植。

为了获得更多的早期胚胎，常用激素对供体进行处理，其目的是获得更多的，经人工受精后可得到早期胚胎。

用某染料鉴定胚胎细胞是否为活细胞时，发现活胚胎细胞不能被染色，其原因是活细胞膜
________________________________________。

（4）若要通过胚胎移植获得遗传物质完全相同的两个新
个体，可对发育到桑葚期或囊胚期阶段的早期胚胎进行处理，再植入到受体内。

若要对早期胚胎进行长期保存，应将其置于条件下。

胚胎工程（一）
1.【答案】（1）生长发育或胚胎发育隐性♂A×♀C 1/8
（2）获能或增强活力③供能性别、高产奶和适宜生长的基因②（3）胚胎分割2.答案：（1）（体细胞）核移植（早期）胚胎培养（2）pH（或：酸碱度）（3）限制性（核酸）内切酶（或：限制酶）DNA连接酶标记（4）内细胞团 B
3.【答案】（10分）（1）细胞核（2）囊胚（3）核苷酸序列 HindⅢ和PstⅠ（4）蛋白质
4.【答案】（15分）（1）XX或XY 显微操作（去核法）胚胎移植（2）遗传物质
（3）卵母细胞的细胞质中的遗传物质会对克隆动物的形状产生影响
（4）已经分化的动物体细胞核具有全能性。

5、(1)顶体酶 (2)初级中受精 (3)生理状态促性
腺卵母细胞对物质的吸收具有选择透过性 (4)胚胎分
割冷冻(或液氮)。