实验七鱼粉中组胺含量的测定
1、实验目的：通过本实验，使学生掌握鱼粉中组胺测定方法。

2、基本技能训练内容：了解组胺含量对鱼粉品质评价的意义；鱼粉中组胺测定方法。

3、主要仪器设备和药品：正戊醇、三氯乙酸溶液(100g/L)、碳酸钠溶液(50g/L)、氢氧化钠溶液(250g/L)、盐酸(1＋11)、组织胺标准溶液（准确称取0.2767g于100±5℃干燥2h的磷酸组织胺，溶于水，移入100mL 容量瓶中，再加水稀释至刻度。

此溶液每毫升相当于1.0mg组织胺）、磷酸组织胺标准使用液（吸取1.0mL 组织胺标准溶液，置于50mL容量瓶中，加水稀释至刻度。

此溶液每毫升相当于20μg组织胺）、偶氮试剂：甲液（称取0.5g对硝基苯胺，加5mL盐酸溶液溶解后，再加水稀释至200mL，置冰箱中）、乙液（亚硝酸钠溶液(5g/L)，临用现配）甲液5mL、乙液40mL混合后立即使用。

4、实验方法：
4.1样品处理
称取5.00～10.00g切碎样品，置于具塞锥形瓶中，加入15～20mL三氯乙酸溶液(100g/L)，浸泡2～3h，过滤。

吸取2.0mL滤液，置于分液漏斗中，加氢氧化钠溶液(250g/L)使呈碱性，每次加入3mL正戊醇，振摇5min，提取三次，合并正戊醇并稀释至10.0mL。

吸取2.0mL正戊醇提取液于分液漏斗中，每次加3mL 盐酸(1＋11)振摇提取三次，合并盐酸提取液并稀释至10.0mL。

备用。

4.2测定
吸取2.0mL盐酸提取液于10mL比色管中。

另吸取0、0.20、0.40、0.60、0.80、1.0mL组织胺标准使用液(相当于0、4、8、12、16、20μg组织胺)，分别置于10mL比色管中，加水至1mL，再各加1mL盐酸(1＋11)，样品与标准管各加3mL碳酸钠溶液(50g/L)，3mL偶氮试剂，加水至刻度，混匀，放置10min 后用1cm比色杯以零管调节零点，于480nm波长处测吸光度，绘制标准曲线比较，或与标准系列目测比较。

4.3计算
式中：X1——样品中组织胺的含量，mg/100g；
V1——加入三氯乙酸溶液(100g/L)的体积，mL；
m1——测定时样品中组织胺的质量，μg；
m2——样品质量，g。

结果的表述：报告算术平均值精确至小数点后一位。

4.4允许差：相对相差≤10%。