⑶.析出含DNA的粘稠物： 在上述溶液中缓缓加入蒸馏水，并沿一个方向轻轻搅 拌，出现丝状物；当丝状物不在增加时，停止加水 （此时NaCl溶液的浓度相当于0.14mol/L）。
⑷.滤取含DNA的粘稠物： 用多层纱布过滤，含DNA的粘稠物留在纱布上。 在20mL烧杯中轻缓搅拌 3min，使尽可能多的 DNA溶解在NaCl溶液。 ⑹.过滤含有DNA的NaCl溶液： 用放有两层纱布的漏斗过滤步骤⑸所得的溶液，滤液中 含有DNA。 ⑸. DNA粘稠物的再溶解： 20mL2mol/L的NaCl溶液 步骤⑷含DNA的粘稠物
⑺.提取含有杂质较少的DNA： 步骤⑹所得的滤液＋体积分数为95%的冷却酒精50mL， 用玻棒沿一个方向轻缓搅拌，溶液中（析出）出现乳 白色丝状物，用玻棒将丝状物卷起，并用滤纸吸取上 面的水分。
3.DNA的鉴定： 加入二苯胺试剂4mL，用玻棒搅拌使DNA溶解，沸水 浴5min，观察溶液是否出现浅蓝色。
为了纯化提取的 DNA需要 将滤液作进一步处理
讨论：此步骤获得的滤液中可 能含有哪些细胞成分？
答：可能含有核蛋 白 、 多 糖 和 RNDNA ， 能够去除杂质
（四） DNA的析出与鉴定
1 、以血液为实验材料时，每 100ml 血 液中需要加入 3g 柠檬酸钠，防止血液 凝固。 2、加入洗涤剂后，动作要轻缓、柔和， 否则容易产生大量的泡沫，不利于后 续步骤的操作。加入酒精和玻璃棒搅 拌时，动作要轻缓，以免加剧 DNA 分 子的断裂，导致 DNA 分子不能形成絮 状沉淀。 3、二苯胺试剂要现配现用，否则会影 响鉴定的效果。
三、实验小结 1.共有“三次过滤，两次析出，七次搅拌”
2. 加入“两次蒸馏水， 三次 NaCl 溶液 ，一次酒精”
四、实验原理拓展介绍。 1.DNA的释放。 DNA主要在鸡血细胞的细胞核内，正常情况下不会释 放出来，蒸馏水对于鸡血细胞是一种低渗液，水分可以 大量进入血细胞，使之胀破，同时加上玻璃棒快速搅拌 的机械作用，加速血细胞的细胞膜和核膜的破裂。但释 放出来的大量DNA与RNA、蛋白质结合在一起，即释放 的不是纯净的DNA，常称为DNA核蛋白。 2.DNA与蛋白质分离。 在高浓度（2mol/L）的氯化钠溶液中，核蛋白易溶解， 析出DNA并溶解在高浓度的氯化钠溶液中 3.DNA的析出与获取。 因为DNA在低浓度（ 0.14mol/L ）的氯化钠溶液中溶解 度小，而蛋白质的在其中的溶解度大。所以在向含DNA 的高浓度的氯化钠溶液中加入大量蒸馏水稀释氯化钠溶 液，从而使DNA溶解度下降，蛋白质溶解度增高。
讨论 1 ：构成生物体的遗 传物质是什么？
讨论 2 ：如何证明 他们是遗传物质？
讨论 3 ：怎样才能将细胞内的这 些物质分离出来？
提取DNA的方法 1、提取生物大分子的基本思路
选用一定的物理或化学方法分离具有
2、生物大分子
主 要 指 蛋白 质 、 酶和核酸
不同物理或化学性质的生物大分子
3、提取DNA的基本思路
4.DNA的再溶解。 用高浓度（2mol/L）的氯化钠溶液再溶解DNA粘稠物。 5.DNA的沉淀和浓缩。 对于除去了蛋白质的DNA的氯化钠溶液，必须再进 一步沉淀和浓缩，常用酒精沉淀法。即往含有Na＋的 DNA溶液，加入体积分数为95%的冷却酒精，混匀后可 以使DNA沉淀、浓缩，形成含杂质较少的DNA丝状物， 悬浮于溶液中。若丝状物较少，可将混合液再放入冰 箱中冷却几分钟即可。浓缩后的DNA丝状物可以用玻棒 （玻棒有吸附DNA的作用）缓缓旋转的方法卷起。 6.DNA的鉴定。 100℃ DNA＋二苯胺 蓝色物 鉴定时蓝色的深浅与溶液中DNA的含量多少有关。
7、DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性
①蛋白酶能水解蛋白质， 但是对DNA没有影响 ②大多数蛋白质不能忍受 60 － 80°C 的 高 温 ， 而 DNA 在80°C以上才会变性 ③洗涤剂可以溶解细胞的 细胞膜，去除脂质和蛋白 质,但对DNA没有影响
（一）实验材料的选取
（二）破碎细胞，获取含DNA的滤液
讨论：为什么加 入蒸馏水能使鸡 血细胞破裂？
2、植物细胞 ①植物细胞需要先 用一定的洗涤剂和 食盐溶解细胞膜
②实例：提取洋葱 DNA 时 ， 在 切 碎 的 洋 葱中加入一定的洗涤 剂和食盐，进行充分 的搅拌和研磨，过滤 后收集研磨液
讨论：如果研磨不充分，会 对实验结果产生怎样的影响？
（三）去除滤液中的杂质
三、实验步骤
1.制鸡血细胞液（活鸡鲜血经分离或沉淀获得）
0.1g/mL柠檬酸钠100mL 500mL烧杯中，玻棒搅拌， 离心、分离或静置沉淀。 活鸡鲜血180mL 2.提取DNA。 ⑴.提取血细胞核物质： ①取血细胞5-10mL＋20mL蒸馏水，用玻棒沿一个方向 快速搅拌。 ②纱布过滤：滤液中含DNA和其他核物质，如蛋白质。 ⑵.溶解核内的DNA： 滤液＋2mol/L的NaCl溶液40mL，玻棒沿一个方向轻缓 搅拌。
利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的
差异，提取DNA，去除其他成分
在 NaCl 溶 液 浓 度 低 于 0.14 4、DNA的溶解性 当氯化钠的物质的量浓度为
2 mol/L 时 ， DNA 的 溶 解 度 随 mol ／ L 时， DNA 的溶解度最大， DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的 NaCl溶液中溶解度不 NaCl溶液浓度的增加而逐渐 浓度为 0．14 mol／L时，DNA 降 低 ； 在 0.14 mol/L 时 ， 的溶解度最低。利用这一原理， 同，利用这一特点，选择适当的盐浓度就能使 DNA充分溶解， DNA 溶解度最小；当 NaCl 溶 可以使 DNA 在盐溶液中溶解或 液浓度继续增加时， DNA 的 析出 而使杂质沉淀，或者相反 溶解度又逐渐增大。
①根据DNA在NaCl溶液中的溶 ②如何通过控制 NaCl溶液的浓 解度曲线图，思考在什么浓 度使 DNA 在盐溶液中溶解或析 度下 ， DNA 的溶解度最小？ 出？ DNA在NaCl溶液中的溶解度是 如何变化的？
6、DNA在酒精溶液中的溶解性
DNA 不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些物质则可以 溶于酒精。利用这一原理，可以将 DNA 与蛋白质进一 步分离