花粉活力测定
一、实验原理:
TTC 染色法—— TTC (2, 3, 5-三苯基氯化四氮唑的氧化态是无色的,可被氢还原成不溶性的红色三苯甲潛(TTF 。

用 TTC 的水溶液浸泡花粉,使之渗入花粉内,如果花粉具有生命力,其中的脱氢酶就可以将 TTC 作为受氢体使之还原成为红色的TTF ;如果花粉死亡便不能染色; 花粉生命力衰退或部分丧失生活力则染色较浅或局部被染色。

因此, 可以根据花粉染色的深浅程度可鉴定花粉的生命力。

培养基萌发法——常的成熟花粉粒具有较强的活力, 在适宜的培养条件下便能萌发和生长,在显微镜下可直接观察计算其萌发率,以确定其活力。

二、实验仪器:载玻片、盖玻片、显微镜、镊子、毛笔、滤纸、培养皿、三角瓶、天平、烧杯、恒温箱、量筒、吸管
三、实验药品:0.5%TTC溶液、琼脂、硼酸、氯化钙、蒸馏水、蔗糖 (浓度分别为 5%、 10%、 15%、 20%
四、实验步骤:
TTC 法:将采集到的花粉 (虞美人、三色堇 , 取少许放在干洁的载玻片上, 加
1~2滴 0.5%TTC溶液,搅匀后盖上盖玻片,并用清水做对照,置 37℃恒温箱中, 30min 后镜检,凡被染为红色的花粉活力强,淡红次之,无色者为没有活力或不育花粉。

每片取 3个视野,统计花粉的染色率,以染色率表示花粉的活力百分率。

培养基萌发法:
1. 将培养基熔化后,用吸管蘸少许,涂布在载玻片上
2. 将花粉(虞美人、三色堇洒落在涂有培养基的载玻片上,然后将载玻片放置于垫有湿滤纸的培养皿中,置于 25℃左右的恒温箱中, 24小时后在显微镜镜检,每片取3个视野,统计其萌发率。

五、实验结果:
TTC 法:虞美人花粉活力—— 26.1%
三色堇花粉活力—— 23%
培养基萌发法:蔗糖浓度 5% 10% 15% 20%
虞美人花粉活力 1.3% 0.79% 2.2% 9.6%
三色堇花粉活力 8.7% 22.2% 46.9% 32.8%
六、结果分析:
1、 TTC 法:三色堇花粉染色在 30分钟时观察时基本没有染色, 50分钟左右观察,才有明显染色的划分出现,原因可能是花粉对 TTC 的敏感度不同
2、培养基萌发法:不同糖浓度下花粉的萌发率不同,虞美人花粉在 20%的糖浓度下活力最强,三色堇花粉在 15%的糖浓度下活力最强。