比较项目 细胞融合的 原理 植物体细胞杂交 细胞膜的流动性 动物细胞融合 细胞膜的流动性
细胞融合的 去处细胞壁后人工 使细胞分散后人 方法 诱导原生质体融合 工诱导细胞融合
诱导方法 物理（离心、振荡、 物理、化学方法 电刺激） 、灭活的病毒 化学（聚乙二醇） 用途 获得杂种植株 制备单克隆抗体
动物细胞培养液的主要成分：
葡萄糖、氨基酸、无机盐、促生长因子、微量元素和 动物血清等。
动物体细胞大都生 活在液体的环境（2）含有动物血清
重组细胞 电脉冲处理 早期胚胎 b 另一头母绵羊子宫 妊娠、出生 克隆绵羊多莉
动物的胚胎移植
解决某些妊 娠时间长、每胎 产子数量少的优 良种畜的繁殖速 度问题。
1、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合， 得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆 A 抗体，与骨髓疤细胞融合的是（ ） A.经过免疫的B淋巴细胞 B.没经过免疫的T淋巴细胞 C.经过免疫的T淋巴细胞 D.没经过免疫的Ｂ淋巴细胞
•植物细胞工程常用的技术手段有哪些？ 植物细胞工程：
植物组织培养 植物体细胞杂交
动物细胞工程：
1.动物细胞培养 3.单克隆抗体 5.核移植 2.动物细胞融合 4.胚胎移植
1.过程：
动物胚胎或幼龄动 胰蛋白酶 单个细胞 细胞 制成 悬液 物的组织、器官 剪碎 细胞增值
去掉组织间 蛋白
加培养液
无限传代
用途 获得杂种植株 主要用于制备 单克隆抗体
提 问
1.其由何种细胞产生？ 2.主要分布在哪里？
？
3.如何得到抗体？
1。抗原
刺激
动物体内
效应B
抗体
2。特异性差、纯度低； 产量低、反应不够灵敏
抗原 抗原不纯
刺激
动物体内
效应B
抗体 抗体不纯
筛选单一效应B细胞 不能增值，产生大量抗体
-化学性质单一、特异性强的抗体。 设计方案： 一个B淋巴细胞－－只分泌一种特异性抗体
D. 都能形成杂种细胞
4. 单克隆抗体制备过程中培育的杂交细胞是------（ D A.由小鼠能产生抗体的B淋巴细胞与肝细胞融合 B.由小鼠一个B淋巴细胞诱导融合而成 C.由小鼠一个B淋巴细胞与肌瘤细胞诱导融合而成
）
D.由小鼠一个B淋巴细胞与骨髓瘤细胞诱导融合而成
1.过程：
2.动物细胞培养技术的应用
6.世界上第一只克隆绵羊“多莉”的培育等程序如图所 示。请仔细看图后回答问题：
⑴写出 ａ、ｂ所指的细胞工程 各称：ａ ｂ 。 ⑵实施细胞工程ａ时，所需的 受体细胞大多采用动物卵细胞 的原因是： 。 ⑶多莉面部的毛色是 判断依据： ， 。 黑面绵羊去 白面绵羊卵 核卵细胞 腺细胞核 a
⑷继植物组织培养之后，克隆 绵羊培育成功，证明动物细胞 也具有 。 ⑸请举例说明克隆绵羊培育成 功的实际意义： 。
4.动物细胞培养与植物细胞培养的重要区别在于 A ） ------------------------------（ A.培养基不同； B.动物细胞培养不需要在无菌条件下进行； C.动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能； D.动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能培 养成植株。
核移植
细胞融合
植物体细胞杂交和动物细胞融合得比较
2。营养：葡萄糖、氨基酸、无机盐、促 生长因子、微量元素和动物血清等。 3。温度：36.5+0.5
4。PH=7.2~7.4
5。气体环境：O2和CO2（95%空气+5%CO ）
2
植物细胞和动物细胞培养的比较
比较项目 原理 培养基性质 培养基特有成分 培养结果 培养目的 植物组织培养 细胞的全能性 固体培养基 蔗糖、植物激素 植物体 快速繁殖、培育 无病毒植株等 动物细胞培养 细胞增殖 液体培养基 葡萄糖、动物血清
细胞系
原 细胞 代 贴壁 培 养
细胞株
胰蛋白酶 传代培养
动物细胞培养不能
最终培养成生物体
如何界定原代培养和传代培养？
随细胞增多，细胞就会停止分裂增殖
细胞株 细胞系 遗传物质改变
细胞 悬浮 液
10代 细胞
50代 细胞
传代培养
无限传 代
原代培养
多数组织细胞固定在表面 生长和分裂。
动物细胞培养条件 1。无菌、无毒
C．原代细胞
B．细胞株
D．传代细胞
2、动物细胞工程技术的基础是 ------（ D ） A.动物细胞融合 B.单克隆抗体 C.胚胎移植 D.动物细胞培养
3、用于动物细胞培养的组织和细胞大都取自胚胎 或出生不久的幼龄动物的器官或组织，其主要原因 是这样的组织细胞 （ D ） A.容易产生各种变异 B．具有更强的全能性 C.取材十分方便 D．分裂增殖的能力强
促生长因子
细胞株、细胞系 获得细胞 或细胞分泌蛋白
动物体细胞核移植和克隆动物
分为胚胎核移植和体细胞核移植
1.过程：
物理法
诱导方式
化学法 生物法： 灭活的病毒 丧失感染性（不感染细胞）
仙台病毒
紫外线 （诱导细胞融合） 保留融合活性
1.过程：
灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面
细胞膜被病毒颗粒穿通
细胞膜连接
小鼠骨髓瘤细胞－－能无限增殖
杂种细胞
抗原 ？
2.制备过程：
效应 ？ B细胞
诱导其融合的 方法有哪些？
抗原 ？ AA型、BB型
效应 ？ B细胞
筛选
AB型杂交瘤细胞
杂交瘤细胞
筛选
能产生所需抗体的细胞
3.单克隆抗体的应用：
①在基础理论研究中具有重要意义
②在疾病诊断、治疗和预防方面，具有 特异性高、灵敏度高等优越性。 ③生物导弹
一种诱导细胞融合的新方法 一种新细胞
灭活病毒 杂交瘤细胞
一个优势
单克隆抗体特异性强、 灵敏度高的优势
多 莉 与 “ 母 亲 ”
Ａ母绵羊
Ｂ母绵羊 乳腺细胞
多 莉 羊 的 培 育 过 程
卵细胞
细胞质
细胞核移植
细胞核
融合后的卵细胞
卵裂
早期胚胎 C母绵羊子宫 妊娠 分娩 多莉羊 胚胎移植
克隆动物的研究意义 1.用于生物学和医学研究的实验动物 2.改良动物品种 3.治疗人类疾病 4..保护濒危动物
•（1）生产蛋白生物制品：病毒疫苗、干扰 素、单克隆抗体等。 •（2）获得大量自身的皮肤细胞，用于植皮。
•（3）用于检测有毒物质 •（4）用于生理、病理、药理等方面的研究， 为治疗和预防疾病提供理论依据
1、在动物细胞培养过程中遗传物质发生改 变的细胞是 --------------------（ A ） A．细胞系
2..动物细胞融合的目的中最重要的是----------------（ A A.克服远缘杂交不亲和 C.培育新品种 B. 制备单克隆抗体 D.生产杂种细胞
）
3.动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较中，正确的是 D （ ）
A. 诱导融合的方法完全相同 B.所用的技术手段基本相同
C. 所采用的原理完全相同
细胞融合，形成杂种细胞
植物、动物细胞融合的比较
比较项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合
原理 细胞融合的方法
细胞膜的流动性、细胞膜的流动性 植物细胞全能性
去除细胞壁后诱 使细胞分散后诱 导原生质体融合 导细胞融合 物理（离心、振 物理、化学方法 荡、电刺激） （同左）
诱导方法
化学（聚乙二醇） 灭活的病毒