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水质粪大肠菌群(一般水样)测定作业指导书
水样特指除医院污水外的各种水样。本实验通过定性区别实验产酸产气,检索
出定量的粪大肠菌群结果。
多管发酵技术是以最可能数(most probable number,简称MPN)来表示试验结果的。
它是根据统计学理论,通过水样不同稀释浓度多组重复生物培养阳性结果估计水体中被测生
物密度的一种方法,具体是通过查MPN表获得结果的。
10mL、1mL、O.ImL。
受污染水样接种量根据污染程度接种1mL、0.1mL、0.01mL或0.1mL、0.01mL、0.001mL等。
使用的水样量可参考下表2。
水样种类
接种量(mL)
10
1
0.1
10-2
10-3
10-4
10-5
井水
X
X
X
河水、塘水
X
X
X
湖水、塘水
XXLeabharlann X城市原污水X
X
X
表2接种用水量参考表
a加工、烹调及去皮蔬菜
b生食类蔬菜、瓜类及草本水果
类另y
污水排放
标准值(个/L)
<10000
2分析方法
表1-3粪大肠菌群畜禽养殖污染物排放标准
(GB 18596-2001)
方法名称、方法来源及适用范围
2.1
方法名称:多管发酵法
方法来源:水质粪大肠菌群的测定多管发酵法和滤膜法(试行)(HJ/T347—2007)
装每个试管10ml,加塞,在115C灭菌20min,贮存于暗处备用。
242三倍乳糖蛋白胨培养液:市售乳糖蛋白胨培养基,
按铭牌比例,三倍配制(蒸馏
水除外),用定量加液器分装每个试管5ml或每个大试管
50mL,加塞,在115C灭菌20min,
贮存于暗处备用。
243EC培养液:市售EC培养基,按铭牌配制,在
1.3水环境质量标准
表1-1粪大肠菌群地表水环境质量标准
(GB 3838-2002)
类另y
I类
n类
川类W类
V类
标准值(个/L)
<200
<2000
<10000<20000
<40000
表1-2
粪大肠菌群农田灌溉水质标准
(GB 5084-2005)
类别
水作、旱作
蔬菜
标准值(个
/L)
<40000
<20000a,10000b
方法适用范围:此法适用于地表水、地下水及废水中粪大肠菌群的测定。
仪器
高压蒸汽灭菌器
电热干燥箱
恒温培养箱
冰箱
采样瓶、三角烧瓶、试管、平皿(直径9cm)、刻度吸管等器皿121C(20min)高压
蒸汽灭菌后于电热干燥箱中烘干。
2.3标准菌株制备
将标准菌株的母种或稳定工作种接种到单倍乳糖蛋白胨培养液中培养对照控制。
水质 粪大肠菌群(一般水样)测定作业指导书
1含义及执行标准
含义
粪大肠菌群基本性状与总大肠菌群相似,属于总大肠菌群的一部分。在培养温度为37C
时可检出总大肠菌群的存在, 为区别存在于自然环境和温血动物肠道内的粪源性大肠菌群细
菌,将培养温度提高倒44.5C,仍能使乳糖发酵产酸产气的总大肠菌群为粪大肠菌群。
115C灭菌20min,用定量加液器
分装每个试管10ml,加塞,贮存于暗处备用。
2.4.4培养基存放于带紫外灯的灭菌物品专用贮藏柜中, 显变化时废弃不用。
当培养基颜色变化,或体积明
2.5分析步骤
2.5.1水样接种量
将水样充分混匀后,根据水样污染的程度确定水样接种量。
每个样品至少用三个不同的水
样量接种。同一接种水样量要有五管。相对未受污染的水样接种量为
必须包
括大肠埃希氏菌、产气场杆菌和山夫登堡沙门氏菌三种对照。接种完后需记录:
母种的来源,
母种和工作种的保存方法、保存温度、传代间隔时间、生长培养基及孵育条件,
确认试验(存
活度、纯度、关键诊断指标等),母种到工作种的传代代数。
2.4培养基
2.4.1单倍乳糖蛋白胨培养液:市售乳糖蛋白胨培养基,按铭牌配制,用定量加液器分