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生物显微镜实验报告


盖玻片,否则换高倍镜头用这个方法,镜头会碰到样品造成损失)。 ⒋由于高倍物镜的工作距离很短,如我们这次用的生物显微镜的工作
距离为:10×物镜工作距离为6.3mm,40×时为0.5mm,100×时为 0.1mm。调焦一不小心就可能使物镜与被观察物挤压而造成物镜或被观 察样品的损坏。为了避免这种事故,我们规定此种显微镜的调焦操作规 程如下:先调整旋钮使工作台慢慢升高,使被观察物慢慢靠近物镜头而 不接触。做这一步时眼睛必须在旁边监视,千万不要让被观察样品与物 镜头相接触! 然后眼睛通过目镜观察视场,这时只允许工作台下降使 样品与镜头之间的距离增大进行调焦工作。这个规定无论使用多大放大 倍数的镜头都必须严格遵守.
⒋从显微镜中看到的鉴别率板有25组方块,每组方块中有四组平行条 纹(见图4),其中单元号码小的平行条纹间距大,号码大的条纹间距小。 号码大到一定程度方块中会模糊一片,看不出条纹。记住那个临界的刚 刚能看出有条纹的方块号码(每一组中有四个方块,只要一个方块个中 看出有条纹就算这一组有条纹)。
⒌从本实验的附表中查出2号鉴别率板相应单元号码的条纹宽度,这 个便是加了圆孔光阑的被测显微镜实际的最小分辨距离。这是实验测得 的数据(记作)。
41.36毫 米
0.032
σy理=0.61波长 (550nm)/NA
10.5微米
σ实际 12.6微米
【数据处理】d是由内圆筒深度:3.440cm 外圆柱高度:3.616cm 总高度:4.720cm 玻璃片厚度:0.408cm这些原始数据经过计算得出的。
【实验数据分析】由于人为读数不准确等偶然误差以及仪器本 身不准确等系统误差,造成实验结果存在一定的误差。 【思考题】
班 级______物理3班_______ 组 别____2组 _________
姓 名_____XXX_______ 学 号 ___1110600095__________
日 期____2012/10/23_________ 指导教师__刘丽 峰________
【实验题目】 生物显微镜 【实验目的】
测微尺长度 y(mm)
0.452
0.326
测微尺像的长度 y'(mm) 4.563 3.125
放大倍率 β=y'\y 10.01 9.58
光栅
光栅像长 y'
0.59毫米
放大倍率 β0
10.01倍
光栅长度 0.059毫米
光栅的数目 6条
相邻线之 间的间距
0.01毫米
分ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ率
Φ
d
NA=Φ/2d
2.64毫米
答:根据公式:σy理=0.61波长(550nm)/NA 带入数据得油镜头下的σy理=0.022μm 放大倍数为40×的σy理=0.0427μm 所以不用油镜头是不行的,因为分辨率太低,会看不
清。
⒈熟悉显微镜的构造及原理; ⒉学会显微镜的调整和使用、以及测量微小长度的方法; ⒊理解数值孔径与显微镜分辨本领的含义,验证显微镜分辨本领与物
镜数值孔径的 关系。
【实验仪器】
⒈XSP-18A生物显微镜;⒉测微尺;⒊测微目镜;⒋被测物(透射光栅 及生物切片);⒌2号鉴别率板;⒍光阑及其支架。
【实验内容】
⒍如图5,由光阑与鉴别率板之间的距离以及光阑的孔径,代入 (10)
算出。其中、的值由测量显微镜测出。将值代入(9)式,即可算出(理论) 值(其中按550nm计算)。将与作比较.
注意:鉴别率板上复盖有一层较厚的玻璃片,因此不得用高倍物镜去 观察它, 否则会损 坏仪器。用低倍物镜已足够清楚。
【原始数据】
⒈一张全息照片的干涉条纹最密得是2500lin/mm,即干涉条纹的空间周 期为0. 4μm, 如欲在生物显微镜下观察,试问不用油镜头又行不行?为什么?(注:生 物显微镜的100×物镜使用时要在物和物镜间加油,以便增大NA值,所 以把这个镜头叫做油镜头。)已知油镜头( 物镜)的放大倍数为100×,数 值孔径为1.25,而放大倍数仅次于它的物镜为40×,数值孔径为0.65, 照 明光波长以于550nm计算。
(二)物镜放大倍数的测定、微小物体的长度测量 1.用测微目镜代替显微镜的目镜,调节照明亮度,把测微尺放在显 微镜载物台上 ,调焦。测量测微尺的某一段长度 (尽量取大些,以减小误 差)经物镜放大后的中间象长 (注意使测微目镜中刻度尺的方向与的方向 一致)。从而计算出物镜的放大倍数,与物镜上所标的数值作比较,说 明二者不同的原因。. 2.将测微尺换成全息光栅,调焦,测出光栅条纹间距经物镜放大后 的中间象长,由此得出未知长度 (可测量若干条条纹间距再除以条数得 到),算出光栅的空间频率。 (三)显微镜分辨本领的测定 1.仍用10×目镜代替测微目镜,将移测显微镜上用的3×物镜装在生 物显微镜的物镜转换器上。转动物镜转换器,使3×物镜对准镜筒。 ⒉把装在特制套筒里的鉴别率板放在载物平台上,调显微镜的照明并 调焦,使2 号鉴别率板从显微镜中看去最清楚,并转动工作台的纵向和 横向移动手轮,使鉴别率板的图象在视野正中。 ⒊将带有小圆孔的特制圆罩盖在鉴别率板套筒上,小圆孔与物镜头的 距离很近。重新调整载物台的纵向及横向移动手轮,使圆孔与显微镜共 轴。
(一)显微镜的调节和使用: ⒈装上目镜和物镜,物镜可装10×及40×两种。先用低倍物镜,转动 物镜转换器,听到“咔”的响声后,说明物镜已对准了目镜。 ⒉接通照明电源并拨动亮度调节钮,使视场内亮度适当。 ⒊将被观察的样品放在载物台上,先用低倍物镜寻找被观察的部 位。旋动调焦粗调及 微调手轮,直到看见清晰的象,将被观察部分利用工作台的纵向及横向 移动手轮调到视场中心。 如果要用高倍物镜时,可转动物镜换上高倍物镜,然后稍微调节微 调手轮,就可以清晰聚焦了(注意:生物显微镜由低倍换高倍这个办法 是有条件的,即物与物镜之间不能有东西,或者只有厚度小于0.17mm的
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