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第二章基因工程习题答案

基因工程课程习题选择题001 基因工程操作的三大基本元件是【A】I 供体II 受体III 载体IV 抗体V 配体AI + II + IIIBI + III + IVCII + III + IVDII + IV + VEIII + IV + V002 根据当今生命科学理论,基因工程的用途是【E】I 分离纯化基因 II 大量生产生物分子 III 构建新型物种 IV 提高基因重组效率A I + II + IIIB I + II + IVC I + III + IVD II + III + IVE I + II + III + IV003 根据基因工程的定义,下列各名词中不能替代基因工程的是【A】A基因诱变B分子克隆C DNA重组D遗传工程E基因无性繁殖004 基因工程的单元操作顺序是【B】A增,转,检,切,接B切,接,转,增,检C接,转,增,检,切D检,切,接,增,转E切,接,增,转,检005 下列有关基因的叙述,错误的是【A】A蛋白质是基因表达的唯一产物B基因是 DNA 链上具有编码功能的片段C基因也可以是 RNAD基因突变不一定导致其表达产物改变结构E基因具有方向性006 限制性核酸内切酶是由细菌产生的,其生理意义是【D】A修复自身的遗传缺陷B促进自身的基因重组C强化自身的核酸代谢D提高自身的防御能力E补充自身的核苷酸消耗007 天然 PstI 限制性内切酶的来源是【D】ABacillus amyloliquefaciensBEscherichia coliCHaemophilus influenzaeDProvidencia stuartiiEStreptomyces lividans008 T 4 -DNA 连接酶是通过形成磷酸二酯键将两段 DNA 片段连接在一起,其底物的关键基团是【D】A 2' -OH 和 5' -PB 2' -OH 和 3' -PC 3' -OH 和 2' -PD 3' -OH 和 5' -PE 5' -OH 和 3' -P009若载体 DNA 用 M 酶切开,则下列五种带有 N 酶粘性末端的外源 DNA 片段中,能直接与载体拼接的是【D】M NA A/AGCTT T/TCGAAB C/CATGG ACATG/TC CCC/GGG G/GGCCCD G/GATCC A/GATCTE GAGCT/C G/AGCTC010下列有关质粒分子生物学的叙述,错误的是【B】A质粒是共价环状的双链 DNA 分子B天然质粒一般不含有限制性内切酶的识别序列C质粒在宿主细胞内能独立于染色体 DNA 自主复制D松弛复制型的质粒可用氯霉素扩增E质粒并非其宿主细胞生长所必需011带有多个不同种复制起始区的质粒是【A】A穿梭质粒B表达质粒C探针质粒D整合质粒E多拷贝质粒012 下列各常用载体的装载量排列顺序,正确的是【A】A Cosmid > λ-DNA > PlasmidBλ-DNA > Cosmid > PlasmidC Plasmid >λ-DNA > CosmidD Cosmid > Plasmid >λ-DNAEλ-DNA > Plasmid > Cosmid013 目前在高等动物基因工程中广泛使用的载体是【C】A质粒 DNAB噬菌体 DNAC病毒 DNAD线粒体 DNAE叶绿体 DNA014 若某质粒带有lacZ 标记基因,那么与之相匹配的筛选方法是在筛选培养基中加入【D】A半乳糖B葡萄糖C蔗糖D5- 溴-4- 氯-3- 吲哚基- b -D- 半乳糖苷(X-gal )E异丙基巯基- b - 半乳糖苷(IPTG )015质粒是基因工程中最常用的运载体,它的主要特点是【C】①能自主复制②不能自主复制③结构很小④蛋白质⑤环状RNA ⑥环状DNA⑦能“友好”地“借居”A ①③⑤⑦B ②④⑥C ①③⑥⑦D ②③⑥⑦016 双脱氧末端终止法测定DNA 序列是基于【A】ADNA 的聚合反应BDNA 的连接反应CDNA 的降解反应D特殊的DNA 连接酶E聚合单体2' 和5' 位的脱氧017 下列三种方法中,能有效区分重组子与非重组子的是【E】I 限制性酶切II PCR 扩增III 抗药性筛选AIBI + IICI + IIIDII + IIIEI + II + III018鸟枪法克隆目的基因的战略适用于【A】A原核细菌B酵母菌C丝状真菌D植物E人类019 cDNA 第一链合成所需的引物是【D】APoly ABPoly CCPoly GDPoly TE发夹结构020 Taq DNA 聚合酶的发现使得PCR 技术的广泛运用成为可能,这是因为【D】ATaq DNA 聚合酶能有效地变性基因扩增产物BTaq DNA 聚合酶催化的聚和反应不需要引物CTaq DNA 聚合酶具有极强的聚和活性DTaq DNA 聚合酶能使多轮扩增反应连续化ETaq DNA 聚合酶能使扩增反应在DNA 变性条件下进行021 为了利用PCR 技术扩增下列染色体DNA 片段上的虚线部分,应选用的引物顺序是【D】AI + IIBI + IIICI + IVDII + IIIEII + IV022 构建基因文库一般使用的载体是【E】I 质粒IIλ-DNA III CosmidAIBIICIIIDII + IIIEI + II + III023 强化基因转录的元件是【C】A密码子B复制子C启动子D内含子E外显子024 启动子的特征之一是【B】AGC 富积区BTATA BoxC转录起始位点D长度平均1 kbE含有某些稀有碱基025 下列基因调控元件中属于反式调控元件的是【A】A阻遏蛋白B启动子C操作子D终止子E增强子026包涵体是一种【E】A受体细胞中难溶于水的蛋白颗粒B大肠杆菌的亚细胞结构C噬菌体或病毒DNA 的体外包装颗粒D用于转化动物细胞的脂质体E外源基因表达产物的混合物027 外源基因在大肠杆菌中以融合蛋白的形式表达的优点是【E】I 融合基因能稳定扩增II 融合蛋白能抗蛋白酶的降解III 表达产物易于亲和层析分离AIIIBI + IICI + IIIDII + IIIEI + II + III028 第二代基因工程是指【C】A途径工程B代谢工程C蛋白质工程DRNA 基因工程E细胞器基因工程029 基因工程菌中重组质粒的丢失机制是【C】A重组质粒渗透至细胞外B重组质粒被细胞内核酸酶降解C重组质粒在细胞分裂时不均匀分配D重组质粒杀死受体细胞E重组质粒刺激受体细胞提高其通透性030利用毛细管作用原理,将凝胶电泳分离后的DNA片段转移至硝酸纤维素膜上并根据核酸杂交原理进行分析的技术是【D】AWestern 印迹转移技术BNorthern 印迹转移技术C基因的表现型分析法DSouthern 印迹转移技术031在翻译过程中.mRNA必需首先与核糖体相结合才能进行蛋白质合成。

在原核生物中,mRNA分子上有两个核糖体结合位点,一个是起始密码AUG,另一个是【C】A启动子B调节基因CSD序列D终止子二、填空题答案1、Ⅱ型限制性内切酶可特异性地识别呈双重螺旋对称结构的特定双链DNA序列并进行切割。

如Bst BⅠ(TT CGAA)消化可产生含5 ′CG 3′的5′磷酰基端黏性末端末端,PstⅠ(CTGCA G)消化可产生5′TGCA 3′的3′-OH端黏性末端,而SmaⅠ(CCC GGG)消化产生平末端。

2、识别顺序相同但切割位点不同者称同位酶,识别顺序与切割方式均相同者称同裂酶,来源与识别顺序均不同,但切割后形成的限制性片段有相同的粘性末端,称同尾酶。

3、受体细胞经过一些特殊方法(如:CaCl2等化学试剂法)的处理后,细胞膜的通透性发生变化,成为能容许有外源DNA的载体分子通过,这种细胞称为感受态细胞。

4、在翻译过程中,mRNA必需首先与核糖体相结合才能进行蛋白质合成。

在原核生物中,mRNA分子上有两个核糖体结合位点,一个是起始密码AUG ,另一个是SD序列。

5、在提取分离DNA的过程中,加入酚-氯仿、去垢剂或酶的目的是使蛋白质变性或水解,除去蛋白质,使用金属离子螯合剂如EDTA等的原因是细胞内有金属离子,如Mg2+,是酶活性的辅助因子,会使DNA被DNase分解,故除去使DNase活性的Mg2+以保护DNA不被变性或降解。

在小批量碱变性提取质粒过程中加入醇溶液的目的是是DNA变性沉淀,并除去蛋白质、糖类等其他水溶性杂质,使之分离,加入Rnase的目的是除去DNA 沉淀中的RNA,是凝胶电泳检测时条带更明显。

6、PCR的全称是聚合酶链式反应,它是一种在体外模拟DNA复制方式选择性地扩增DNA特殊区域的技术。

它是在四种脱氧核苷三磷酸存在下,以寡聚核苷酸为引物及单链DNA 为模板,经DNA聚合酶催化合成DNA互补链的过程,其基本反应步骤为高温变性、低温退火和适温延伸,并循环n次,达到扩增目的。

7、采用光导原位合成或微量点样等方法,将大量生物大分子或其他生物样品有序地固化于支持物表面,然后与已标记的待测生物样品中靶分子杂交,通过特定仪器对杂交信号的强度进行快速、并行、高效地检测分析,从而判断样品中靶分子的数量的技术称为生物芯片技术,根据固定的探针不同,可分为基因芯片、蛋白芯片、细胞芯片和组织芯片。

该技术具有高通量、快速高效、高度灵敏等特点。

8、根据Southern blot的结果可以说明被检测样品中的DNA及其含量,了解基因的状态, 如是否有点突变、扩增重排等,Northern blot 则用于检测样品中是否含有基因的转录产物(mRNA)及其含量,而Western blot的结果可以明被检测基因在蛋白质水平上的表达状况。

9、基因工程中用来获得有功能的异源蛋白质的体系称为表达系统。

10、用火药爆炸或者高压气体加速将包裹了DNA的球状金粉或者钨粉颗粒直接送入完整的植物组织或者细胞中,这一方法称为基因枪法。

基因工程课程习题问答题1、基因工程的操作过程的主要步骤包括哪些?切、接、转、增、筛(检)(1)切——获得DNA片段,取得目的基因;载体的选择与制备。

方法:从生物基因组中分离得到——基因组DNA ——>酶切产物从总RNA中分离得到mRNA ,再逆转录得到cDNA 人工合成——化学合成;PCR(聚合酶链式反应)(2)接——DNA片段和载体DNA在体外连接,形成重组子。

(3)转——将重组的DNA引入宿主细胞方式:转化——某一基因型细胞从周围介质中吸收另一基因型细胞的DNA,而使其基因型和表型发生相应变化的现象;转染——除去蛋白质外壳的病毒核酸感染细胞或原生质体的过程;转导——用噬菌体做载体,将一个细胞的基因传递给另一个细胞的过程。

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