高效液相色谱法以内外标法测定甲磺酸多沙唑嗪分散片的含量比较
摘要：目的对甲磺酸多沙唑嗪分散片含量测定方法进行摸索。

方法采用高效液相色谱（HPLC）法外标法测定分散片中甲磺酸多沙唑嗪含量，色谱柱为Kromasil-C18柱（250mm×4.6mm，5μm），流动相为甲醇- 水- 冰乙酸- 二乙胺（550：450：10：0.2），检测波长为244nm。

结果甲磺酸多沙唑嗪进样浓度在4.95～74.25μg.ml范围内与峰面积具有良好的线性关系（r=0.9992），平均回收率为101.0%，RSD为1.9%。

结论HPLC法外标法测定甲磺酸多沙唑嗪分散片含量简便、快捷、精密度高、准确性好，能很好地控制产品质量。

关键词：甲磺酸多沙唑嗪分散片甲磺酸多沙唑嗪高效液相色谱法含量
甲磺酸多沙唑嗪（Doxazosin Mesylate）是一种选择性α1肾上腺受体阻滞剂，具有良好的降压、降脂作用。

目前仅有新药转正标准中以高效液相色谱法内标法测定甲磺酸多沙唑嗪的含量，本文通过高效液相色谱法的外标法对本品中主成分进行了含量测定，并通过比较了内外标法的结果，确定以外标法测定本品，更方便快捷。

1、仪器与试药
1.1仪器
岛津LC-10ATvp液相色谱仪，岛津SPD-10Avp紫外检测器，HW2000色谱工作站，
1.2 试药
甲磺酸多沙唑嗪对照品（批号：100566-200401，供含量测定用，中国药品生物制品检定所），其它试剂均为分析纯，甲磺酸多沙唑嗪分散片（某制药企业生产，批号110308、110309、110310）。

2、方法与结果
2.1 测定波长的选择
取甲磺酸多沙唑嗪对照品适量，以流动相溶解，在200～400nm范围内作紫外扫描。

结果显示：本品在244nm波长处有最大吸收，故选择244nm波长作为检测波长。

2.2 色谱条件
Kromasil C18色谱柱（5μm，4.6mm×250mm），流动相为甲醇- 水- 冰乙酸- 二乙胺（550：450：10：0.2），检测波长为244nm，流速1.0ml·min-1。

2.3 溶液的制备：取本品20片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于多沙唑嗪2mg），置50ml量瓶中，加流动相适量，振摇超声使甲磺酸多沙唑嗪溶解，用流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，即为供试品溶液。

2.4 空白干扰溶液的制备：按照处方配比制备空缺甲磺酸多沙唑嗪的阴性样品，照供试品溶液制备方法制成空白干扰溶液。

2.5 对照溶液的制备：取甲磺酸多沙唑嗪对照品适量，精密称定，加流动相溶解制成每ml约含40ug的溶液，即为对照液。

2.6 系统适应性实验：分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液和空白干扰溶液20μl注入液相色谱仪，按上述色谱条件进行分析，记录色谱图，发现该色谱条件下，空白干扰样品对本品的主峰位置无干扰峰，样品中主峰与相邻色谱峰分离度符合要求。

2.7 线性关系考察：精密称取甲磺酸多沙唑嗪对照品适量，加流动相溶解，摇匀，作为贮备液。

精密量取贮备液各适量，制成甲磺酸多沙唑嗪一系列标准溶液，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。

以峰面积为纵坐标，以浓度为横坐标，进行线性回归，其回归方程为：Y=57100X+105621 γ=0.9992，结果表明甲磺酸多沙唑嗪在4.95ug/ml～74.25ug/ml浓度范围内，峰面积与浓度呈良好的线性关系。

2.8 溶液的稳定性考察：取样品含量测定项下供试品一份，按上述色谱条件，分别于0、1、2、4、6小时测定，求得甲磺酸多沙唑嗪的含量，RSD = 0.6%，结果表明，样品溶液在6h内稳定性较好。

2.9 重复性试验：取同一批甲磺酸多沙唑嗪分散片样品，按照上述方法制备6份供试品溶液，照上述色谱条件测定，结果甲磺酸多沙唑嗪含量（n = 6）为10
3.6%，RSD=0.4%。

2.10 回收率实验：分别精密称定甲磺酸多沙唑嗪对照品适量作为主药，取50片处方量辅料，分别加入50片处方量的80%、100%、120%的主药，混合均匀，配制模拟样品，精密称取此样品适量，按含量测定方法测定，计算回收率。

平均回收率为101.0%，RSD为1.9%。

结果表明：该方法的回收率良好，可满足测定要求。

2.11 以本品拟定的外标法对样品进行含量测定：取本品20片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于多沙唑嗪2mg），置50ml量瓶中，加流动相适量，振摇超声使甲磺酸多沙唑嗪溶解，用流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，即为供试品溶液。

精密量取20ul注入液相色谱仪，记录色谱图。

另取甲磺酸多沙唑嗪对照品适量，精密称定，加流动相溶解制成每ml约含40ug的溶液，同法测定。

按外标法以峰面积计算，即得。

结果见表1中。

2.12 以新药转正标准中方法，以苯甲酸苯酯为内标物，取上述研细的样品
按新药转正标准中规定的方法测定，结果见表1中。

3 讨论
新药转正标准中以内标法测定本品中甲磺酸多沙唑嗪含量，且以甲醇溶解样品，甲磺酸多沙唑嗪峰形拖尾，理论板数不高，计算麻烦。

本方法通过以外标法测定，调整了流动相的比例，并且以流动相溶解样品，改善了峰形，提高了理论板数，通过方法验证，符合测定要求。

通过两种方法测定结果的比较，结果基本一致，无明显差异，说明本测定方法可行，可作为生产质量控制方法。

参考文献：
[1]国家食品药品监督管理局. 国家药品标准WS1-（X-044）-2003Z
[2]刘玉真.HPLC 法测定甲磺酸多沙唑嗪含量和有关物[J].中国新药杂志，2005，14，（11）：1321-1323.
[3] 逄书明，孙玲. 高效液相色谱法测定甲磺酸多沙唑嗪缓释胶囊的含量[J]. 齐鲁师范学院学报，2012，27（2）：107-109.。