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吉林省不同产地西洋参中人参总皂苷含量的测定
西洋参( Panax quinquefolius L) 为五加科人参属 植物,具有滋补强壮,养血生津,宁神益智的功效,其主 要的活性成分为人参总皂苷[1]。吉林省是我国人参、 西洋参的主产区,为了评价吉林省不同产区西洋参的 质量,本文对吉林省 6 个产地的西洋参进行了人参总 皂苷含量的测定及比较研究。 1 仪器与试药
TU - 1810 型紫外分光光度计( 北京普析通用仪器 有限责任公司) ; HH - 6 型数显恒温水浴锅( 常州澳华 仪器有限公司) ; N - 1001 型旋转蒸发仪( 上海爱朗仪 器有限公司) ; 电子天平( 上海梅特勒 - 托利多仪器有 限公司) ; GF - 254 型层析硅胶板( 浙江省台州市路桥 四甲生化塑料厂) 。西洋参( 4 年生) 于 2011 年 9 月采 于吉林省珲春、敦化、长白、集安、临江和抚松等地; 人 参皂苷 Re 对照 品 ( 中 国 药 品 生 物 制 品 检 验 所,批 号 110754 - 201123) ; 实验用水为自制蒸馏水; 所用试剂 均为国产分析纯。 2 方法与结果 2. 1 溶液的制备
2. 1. 1 对照品溶液的制备 精密称取人参皂苷 Re 对 照品 20. 00 mg,置于 10 ml 量瓶中,加甲醇适量使其溶 解,并 稀 释 至 刻 度,摇 匀,即 得 ( 含 人 参 皂 苷 Re 2 mg / ml) 。 2. 1. 2 供试品溶液的制备 西洋参样品经 50 ℃ 烘干 后粉碎( 过 40 目筛) ,精确称取供试品 1. 00 g,用中性 滤纸包好,置索式提取器中,加入乙醚,在 47 ℃ 左右微 沸回流提取 1 h,弃去乙醚液,挥干乙醚溶剂,加入甲醇 浸泡过夜,次日再加入适量甲醇在 89 ℃ 左右微沸回流 提取,控 制 滴 速 100 ~ 120 滴 / min,虹 吸 次 数 为 5 ~ 6 次 / h,回流提取 3 次,每次 2 h,以人参皂苷提尽为准 ( 定性鉴别为阴性) 。合并甲醇提取液,回收甲醇,少 量提取液置蒸发皿中,水浴蒸干。用蒸馏水溶解提取 物,加蒸馏水 30 ml 置分液漏斗中用水饱和的正丁醇 50 ml 进行萃取,共 4 次。取上层液蒸干,加甲醇溶解 后,转移至 10 ml 量 瓶 中,用 甲 醇 稀 释 至 刻 度,摇 匀, 即得。 2. 2 人参总皂苷提取定性鉴别[2] 供试品回流提取 3 次以后,取索式提取器中载供试品瓶中的溶液少量
Determination of total ginsenoside in Panax Quinquefolius L from various areas of jilin province Qu Zhengyi,Liu Hongqun,Zhao Jinghui,Yao Chunlin,Wang Yingping
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天津药学 Tianjin Pharmacy 2012 年 第 24 卷第 3 期
吉林省不同产地西洋参中人参总皂苷含量的测定*
曲正义,刘宏群,赵景辉,姚春林,王英平
( 中国农业科学院特产研究所,吉林 132109)
摘 要 目的: 建立西洋参中人参总皂苷的测定方法,并对吉林省 6 个产地西洋参中人参总皂苷含量进行了测定。
98. 5 100. 5 100. 3 99. 8 100. 3
表 2 吉林省不同产地西洋参中总皂苷测定结果
产地 总皂苷含量( % )
珲春 敦化 长白 集安 临江 抚松 7. 94 8. 11 7. 75 6. 37 8. 51 6. 65
3 讨论 本实验采用甲醇热回流索氏提取西洋参中人参总
皂苷,通过薄层色谱定性鉴别,可将西洋参中的总皂苷 提取完全。紫外 - 可见分光光度法测定西洋参中人参 总皂苷含量,方法简便易行,精确度高,稳定性和重现 性均较好。所测吉林省 6 个产地的西洋参中人参总皂 苷含量均大于 6% ,符合《中成药质量标准与标准物质 研究》[4]要求,对吉林省西洋参药材质量的控制具有参 考意义。
mg / ml) 10、20、30、40 和 50 μl,按“2. 3. 2”项下方法显 色测定吸光度,计算回收率为 99. 9% ,RSD 为 0. 82% 。 2. 8 样品的测定 精密吸取“2. 1. 2 供试品溶液的制 备”方法中样品溶液 20 μl,共 3 份。分别置于 3 个 10 ml 磨口带塞试管中,按“2. 3. 2”项下方法显色测定吸 收度,由 回 归 方 程 计 算 总 皂 苷 的 平 均 含 量,结 果 见 表 2。
( Institute of Special Wild Economic Animal and Plant Science,Jilin 132109) ABSTRACT Objective: To establish a method to determine the total ginsenoside contents in Panax quinquefolius L. Methods: A colorimetric method was employed and the total ginsenoside contents in Panax quinquefolius L was quantitatively measured at the wavelength of 544 nm. Results: A good linear relationship was observed in the range of 20 ~ 200 μg ( r = 0. 999 4) and averagere covery rate was 99. 9% with a relative standard deviation of 0. 82% ( n = 5) . Among the six samples from several regions of the province,the sample from Linjiang gave the highest contents of the total ginsenoside,and the sample from Dunhua contained the total ginsenoside only next to the former. Conclusion: The method is simple,precise,stable and repeatable. The contents of total ginsenoside in all the six samples were more than 6% . KEY WORDS Panax quinquefolius L,total ginsenoside,colorimetry
参考文献 1 王蕾,王英平,许世全,等. 西洋参化学成分及药理活性研究进展. 特
产研究,2007,3: 73 2 中国药典. 一部. 2005: 31 - 32 3 赵花,刘强,张达正,等. 香兰素存放时间对测定人参总皂苷含量结果
的影响. 人参研究,2007,1: 19 4 王宝琴. 中成药质量标准与标准物质研究. 北京: 中国医药科技出版
社,1994: 493 - 497
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
* 收稿日期: 2012-02-07
天津药学 Tianjin Pharmacy 2012 年 第 24 卷第 3 期
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点于硅胶 G 薄层( 105 ℃ 活化 10 min) 板上,展开剂: 氯 仿 - 甲醇 - 水( 65∶ 35∶ 10) 10 ℃ 以下放置后的下层 溶液,用 10% 硫酸乙醇显色,将薄层板置通风橱内,喷 10% 硫酸乙醇溶液,105 ℃ 加热,无紫红色斑点( 总皂 苷阳性应为紫红色斑点) 。结果表明,样品中人参总皂 苷已提取完全。 2. 3 标准曲线的绘制 2. 3. 1 8% 香草醛乙醇试液和 72% 硫酸溶液的配制 8% 香草醛乙醇试液: 取香草醛 4. 00 g,加无水乙醇定 容至 50 ml 量瓶中,溶解,摇匀,即得( 配制溶液 1 周内 可以使用[3]) 。72% 硫酸溶液: 取硫酸 720 ml,缓缓注 入适量蒸馏水中,冷却至室温,加水稀释至 1 000 ml, 摇匀,即得。 2. 3. 2 标准曲线的绘制 精密吸取人参皂苷 Re 对照 品 10、30、50、60、80 和 100 μl,置于磨口带塞试管中, 水浴蒸干甲醇后,加入 8% 香草醛乙醇试液 0. 5 ml, 72% 硫酸试液 5 ml,充分振摇混匀后置 60 ℃ 恒温水浴 上加热 10 min,立即用冰水冷却 10 min,摇匀。以试剂 作空白,于 544 nm 波长处分别测定吸收度,以吸光度 ( A) 为纵坐标、浓度( C) 为横坐标,绘制标准曲线,得回 归方程: A = 0. 193 86 C - 0. 002 74( r = 0. 999 4) 。 2. 4 精密度试验 精密吸取对照品溶液 30 μl 置于 10 ml 磨口带塞试管中,共 6 份,按“2. 3. 2”项下方法显 色测定吸收度,连续测定 6 次,记录吸光度值,计算得 其 RSD 为 0. 02% 。 2. 5 稳定性试验 精密吸取样品溶液 20 μl 置于 10 ml 磨口带塞试管中,按“2. 3. 2”项下方法显色,并分别 在显色后每隔 10 min 测定一次吸光度,共测 6 次,计算 得其 RSD 为 0. 53% 。 2. 6 重复性试验 精确称取药材粉末 5 份,每份 1. 00 g,按照“2. 1. 2 供试品溶液的制备”步骤,平行制备样 品溶液,各吸取 20 μl 置于 5 个 10 ml 具塞试管中,按 “2. 3. 2”项下方法显色测定吸收度,通过回归方程得到 平均总皂苷的质量浓度,其 RSD 为 0. 93% 。 2. 7 加样回收试验 精确吸取已知含量的样品溶液 20 μl,平行 5 份,分别置于 5 个 10 ml 磨口带塞试管 中,再 分 别 精 确 加 入 人 参 皂 苷 Re 标 准 品 溶 液 ( 2
表 1 回收率实验
样品液总皂苷量 标准品加入量 实际测得值 回收率
样品号
( mg)
( mg)