1、两次加蒸馏水。（提取） 第一次，利用红细胞渗透吸水破裂，释放DNA； 第二次， 稀释NaCl溶液浓度至0.14mol/L，降低DNA溶解度， 沉淀DNA。
2、两次DNA沉淀。都是由于溶解度降低所致，第一次，由NaCl 溶液浓度改变（ 2mol/L－0.14mol/L）（提取）
第二次，由于95%的冷酒精的加入。 （纯化）
2、选择参照物 观察叶绿体流动的速度和方向
3、选择最佳观察部位 靠近叶脉部分（因为叶脉处水分供应充足，易观察）
实验三：观察植物细胞的有丝分裂（装片制作）
步骤 试剂
时间 作用
解离 漂洗 染色 制片
质量分数为15%的盐酸 和体积分数为95%的酒 精混合（1:1）
3~5min 使组织中的细胞相互分离 开来，并且能杀死固定细 胞，便于观察。
染色质（体）
大肠杆菌
试剂
碘液 斐林试剂 班氏试剂 苏丹III染液 苏丹IV染液 双缩脲试剂
二苯胺 龙胆紫溶液 醋酸洋红液
伊红－美蓝
颜色
蓝色 砖红色沉淀 砖红色沉淀 橘黄色 红色 紫色
蓝色 紫色 红色
深紫色，金属光 泽
备注
沸水浴1-2分钟
制作临时装片，用显微 镜观察
变性蛋白质也可以鉴定 （鉴定肽键） 沸水浴1-2分钟 被染色细胞可以观察细 胞核的形态和数量（不 分裂细胞）；有丝分裂 中期（分裂细胞） 大肠杆菌的代谢产物有 机酸与伊红－美蓝反应
实验原理：
1、研磨不充分； 2、没有加碳酸钙； 3、丙酮量太多； 4、放置时间太长。
层析时注意事项：
1、滤液细线不能浸入层析液中； 2、盖上培养皿盖； 3、滤纸条不能贴壁； 4、滤纸条剪去两角。
实验九：DNA粗提取与鉴定
实验原理：
提取：DNA在0.14mol/L的NaCl溶液中溶解度最 低，可以使溶解在氯化钠中的DNA析出
纯化：DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的其 他 物质可以溶于酒精溶液，可以提取含杂质较少的 DNA
鉴定：DNA遇二苯胺（沸水浴）会染成蓝色，可 以鉴定DNA（设置了对照实验）
酒精用途
50％的酒精 95％的酒精 95%的冷酒精 75%的酒精
脂肪鉴定时洗去浮色 解离根尖 沉淀DNA 表面消毒
实验步骤：理解整体，把握重点
镜头：目镜（倍数大，镜筒短），物镜（倍数大，镜筒长）
放大倍数＝物镜倍数×目镜倍数
污点：位置判断（载玻片、物镜、目镜）
调焦（调物距）：粗准焦螺旋和细准焦螺旋
视野：
范围 细胞数 细胞大小 物距 明暗度
低倍镜 大 多
小
大
亮
高倍镜 小 少
大
小
暗
观察细胞质流动
1、加快细胞质流动的措施 适当升高温度（20 ℃ －25 ℃ ）； 光下培养一段时间； 切伤部分叶片； 用适宜浓度的生长素溶液处理。
原理：保证过氧化氢酶的活性。
观察植物细胞质壁 紫色的洋葱鳞片叶
分离与复原
（外表皮）
含有紫色大液泡，便于观察
DNA粗提取与鉴定 鸡血细胞液
含有细胞核
斐林试剂与双缩脲试剂比较
1、试剂浓度不同： 斐林试剂：质量浓度为0.1g/ml的NaOH溶液和质量浓度为 0.05g/ml的CuSO4溶液配制而成。 双缩脲试剂：质量浓度为0.1g/ml的NaOH溶液和质量浓度为 0.01g/ml的CuSO4溶液组成。 2、使用顺序不同： 斐林试剂：两种溶液是现配现用。 双缩脲试剂：是先加入2mlNaOH溶液后滴加CuSO4溶液3－ 4滴。 3、反应温度不同： 斐林试剂：反应温度为100℃沸水浴。 双缩脲试剂：反应温度为室温。
清水
10min 洗去盐酸，便于碱性染料 染色。
0.01g/ml或0.02g/ml的龙 3~5min 对细胞中的染色体（质）
胆紫溶液（或醋酸洋红
进行染色，便于观察。
液）
根尖放在载玻片上→滴清水→镊子弄碎根尖→盖片→拇指轻 压盖玻片，可使细胞进一步分散开来（呈薄雾状），便于显 微观察。
实验七：观察植物细胞的质壁分离与复原
实验步骤
研磨成分 绿色叶片 丙酮（或酒精） 二氧化硅 碳酸钙
用量 5g 5ml 少许 少许
作用 提供色素 溶解色素 为了研磨充分 中和有机酸，防止色素受到破坏
实验结果
色素在滤纸条上的顺序，从上到下依 次为： 胡萝卜素、叶黄素、叶绿素a、叶绿素b 橙黄色、 黄色、 蓝绿色、 黄绿色
色素提取液浅的原因：
实验六：叶绿体中的色素的提取和分离
实验原理
提取：叶绿体中的色素能够溶解在有机溶剂丙酮（或 酒精）中，所以，可以用丙酮（或酒精）提取叶绿体 中的色素。（萃取法）
分离：叶绿体中的色素在层析液中的溶解度不同，溶 解度高的随层析液在滤纸上扩散的很快，溶解度低的 随层析液在滤纸上扩散的很慢，从而色素在扩散的过 程中分离开来。（纸层析法）
实验专题复习
课本学生实验 1、鉴定类 2、观察类 3、调查类
实验一：生物组织中还原糖、脂肪、 蛋白质的鉴定
实验原理：
某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物， 产生特定的颜色反应。
还原糖＋斐林试剂→砖红色（沸水浴） 脂肪＋苏丹Ⅲ染液→橘黄色 蛋白质＋双缩脲试剂→紫色
物质鉴定的颜色反应
物质
淀粉 还原性糖 脂肪 蛋白质 DNA
3、三次溶解DNA。对应三大步骤， 提取： 2mol/L氯化钠溶液； 提纯： 2mol/L氯化钠溶液； 鉴定：0.015mol/L氯化钠溶液。
实验二：用高倍显微镜观察叶绿体和细胞质流动
显微镜使用：对光→低倍镜观察→移动载玻片→转动转换器→高 倍镜观察
对光：反光镜（平面镜和凹面镜）和遮光器（光圈）
成像：倒立、放大、虚像。
含叶绿体大，数目少，叶片薄 操作：含叶绿体的大液泡细胞， 质流动快，易于观察。
观察植物细胞有丝 分分裂 丝分裂。分裂期相对较长的材
期相对较长。（动物： 料位于分裂期的细胞较多。便
受精卵）
于取材。
比较过氧化氢酶和 新鲜肝脏研磨液 Fe3+的催化效率
实验材料选择原则（一是符合原理；二是便于操作或观察）
实验
材料
原理或操作
还原糖鉴定实验
叶绿体中色素提取 和分离 高倍镜观察叶绿体 观察细胞质流动
含还原糖量较高、颜 色为白色或近于白色 的植物组织
新鲜的绿色叶片（如 菠菜）
藓类的叶（菠菜叶）
新鲜的黑藻
操作：富含还原糖；选择与砖 红色沉淀反差较大的白色，便 于观察。 含有叶绿素，便于研磨。