实验常用试剂、缓冲液的配制方法
Ampicillin（氨卡青霉素）100mg/ml
□组份浓度100mg/ml Ampicillin
□配制量50mL
□配置方法 1.称量5g Ampicillin置于50mL离心管中。
2.加入40mL灭菌水，充分混合溶解后，定容至50mL。
3.用0.22μm滤膜过滤除菌。
4.小份分装（1mL/份）后，-20℃保存。
Kan（卡那霉素）50mg/ml
□组分浓度50mg/ml卡那霉素
□配制量50mL
□配制方法 1.称取2.5g卡那霉素置于50ml塑料离心管中。
2.加入40ml灭菌水，充分混合溶解之后定容至50mL。
3.用0.22μm 滤膜过滤除菌。
4.小份分装（1mL/份）后，-20℃保存。
IPTG(异丙基-β-D-硫代半乳糖苷) 24 mg/ml
□组份浓度24mg/L IPTG
□配制量50mL
□配置方法 1.称量1.2gIPTG置于50mL离心管中。
2.加入40mL 灭菌水，充分混合溶解后，定容至50mL。
3.用0.22μm 滤膜过滤除菌。
4.小份分装（1mL/份）后，-20℃保存。
X- Gal 20mg/m
□组份浓度20mg/L X-Gal
□配制量50mL
□配置方法 1.称取1gX-Gal置于50mL离心管中。
2.加入40mL DMF（二甲基甲酰胺），充分混合溶解，
定容至50mL。
3.小份分装（1mL/份）后，-20℃避光保存。
LB培养基
□组份浓度1％（W/V）Tryptone，0.5％（W/V）Yeast Extract，1％（W/V）NaCl
□配制量1L
□配置方法 1.称量下列试剂，置于1L烧杯中
Tryptone（胰化蛋白胨）10g
Yeast Extract（酵母提取物）5g
NaCl（氯化钠）10g
2.加入约800mL 的去离子水，充分搅拌溶解。
3.滴加5N NaOH（约0.2mL），调节pH值至7.2-7.3。
4.加去离子水定容至1L。
5.高温高压灭菌后，4℃保存。
注：1. LB固体培养基每100ml LB培养基加入1.5g琼脂粉。
2. 5N NaOH新配后溶液加入需要重新测定。
3.待培养基温度降至50℃时，以手不烫为准，按比例加入抗生素，以免温度过高导致抗生素失效，并充分摇匀。
50×TAE Buffer (pH8.5)
□组份浓度 2 M Tris-醋酸，100 mM EDTA
□配制量100m L
□配制方法 1.称量下列试剂，置于200mL烧杯中。
Tris 24.2 g
Na2EDTA·2H2O 3.72 g
2.向烧杯中加入约80 ml的去离子水，充分搅拌溶解。
3.加入5.71 ml的冰乙酸，充分搅拌。
4.加去离子水将溶液定容至100mL后，室温保存。
注：1xTAE的稀释（如500ml1xTAE即10mL 50xTAE稀释于490mL的去离子水）。
1％琼脂糖凝胶（核酸电泳用）
□组份浓度1％琼脂糖凝胶
□配制量100m L
□配制方法 1.称量1g琼脂糖置于200mL锥形瓶中。
2.加入100ml1×TAE Buffer，摇动混匀。
3.放入微波炉加热2min至琼脂糖完全溶化。
4.插入梳子，等温度降下来，倒胶。
1.M Tris-HCl
□组份浓度 1 M Tris-HCl（pH6.8）
□配制量100mL
□配置方法 1.称量12.11gTris 置于200mL 烧杯中。
2.加入约80mL 的去离子水，充分搅拌溶解。
3.加入11mL的浓盐酸。
4.定容至100mL，室温保存。
1.5M Tris-HCl
□组份浓度 1.5 M Tris-HCl（pH8.8）
□配制量100L
□配置方法 1.称取18.17gTris置于200mL烧杯中。
2. 加入约80mL的去离子水，充分搅拌溶解。
3. 用浓盐酸调pH值至8.8。
4. 将溶液定容至100mL。
5. 高温高压灭菌后，室温保存。
注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH 值。
5 N NaOH
□组份浓度5N NaOH
□配制量100mL
□配置方法 1. 量取80mL 去离子水置于100～200mL 塑料烧杯中
2. 称取20g NaOH 逐渐加入到烧杯中，边加边搅拌以放热。
3. 待NaOH完全溶解后，定容至100mL。
4. 将溶液转移至塑料容器中后，室温保存。
注：NaOH溶解过程中大量放热，有可能使玻璃烧杯炸裂。
2.5 N HCl
□组份浓度 2.5 N HCl
□配制量100mL
□配置方法 1.在78.4mL的去离子水中加入21.6mL的浓盐酸
（11.6N），均匀混合。
2.室温保存。
25xPB Buffer
□组份浓度25xPB Buffer
□配制量100mL
□配制方法 1. 称量下列试剂，置于100 ML烧杯中。
Na2HPO4 (磷酸氢二钠) 2.74g
NaH2PO4（磷酸二氢钠）0.79g
2. 向烧杯中加入约80 ML去离子水，充分搅拌溶解。
3. 定容至100 ML。
1xPBS Buffer
□组份浓度1xPBS Buffer
□配制量100mL
□配制方法 1. 称量8.5g Nacl置于100 ML烧杯中。
2. 向烧杯中加入40 ML 25xPB Buffer搅拌溶解。
3. 滴加5N NaoH调节PH值至7.2，将溶液定容至1L.
4. 高温灭菌后，室温保存。
注：PBST的配制:1L 1xPBS加1ml吐温-20。
10%（W/V）过硫酸铵
□组分浓度10%（W/V）过硫酸铵
□配制量10mL
□配制方法 1.称取1g过硫酸铵；
2.加入10ml的去离子水后搅拌溶解，
3.贮存于4℃。
注：10%过硫酸铵最好现配现用，配好的溶液在4℃保存可使用2周左右，过期会失去催化效果。
10%（W/V）SDS
□组份浓度10%（W/V）
□配制量100mL
□配制方法 1.称量10gSDS 置于100～200mL 烧杯中，加入约80mL的去离子水，
68℃加热溶解。
2.滴加数滴浓盐酸调节pH值至7.2 。
3.将溶液定容至100mL后，室温保存
5X Tris-Glycine Buffer
□组分浓度0.125M Tris，1.25M Glycine，0.5% (W/V)SDS
□配制量1L
□配制方法 1.称取下列试剂，置于1L的烧杯中
Tris 15.1g
Glycine 94g
SDS 5.0g
2.加入约800ml的去离子水，搅拌溶解。
3.加入去离子水定容至1L后，室温保存。
注：1X Tris-Glycine Buffer（500ml即量取100ml稀释于400ml去离子水中）。
考马斯亮蓝R-250染色液
□组份浓度0.1％（W/V）考马斯亮蓝R-250，25%（V/V）异丙醇，10％（V/V）
冰醋酸
□配制量1L
□配置方法 1.称取1g考马斯亮蓝R-250,置于1L烧杯中。
2.量取250mL的异丙醇加入上述烧杯中，搅拌溶解。
3.加入100mL的冰乙醋酸，均匀搅拌。
4.加入650mL的去离子水，均匀搅拌。
5.用滤纸去除颗粒物质后，室温保存。
考马斯亮蓝染色脱色液
□组份浓度10％（V/V）醋酸，5％（V/V）乙醇
□配制量1L
□配置方法 1.量取下列溶液，置于1L烧杯中。
醋酸100mL
乙醇50mL
dH2O 850mL
2.充分混合后使用。
膜转移缓冲液（Western杂交用）
□组份浓度39 mM Glycine，48 mM Tris，0.037%(W/V)SDS，20%(V/V)甲醇
□配制量 1 L
□配制方法 1.称量下列试剂，置于l L烧杯中。
Glycine 2.9 g
Tris 5.8 g
SDS 0.37 g
2.向烧杯中加入约600 ml的去离子水，充分搅拌溶解。
3.加去离子水将溶液定溶至800 ml。
4.加入200 ml的甲醇，室温保存。
封闭缓冲液（Western杂交用）
□组份浓度5%(W/V)脱脂奶粉/PBST Buffer
□配制量100 mL
□配制方法 1.称0.5g脱脂奶粉加入到10ml PBST Buffer中，搅拌溶解。
2.4℃保存待用(本封闭液应该现配现用)。
100mM EDTA(PH8.0)
□组份浓度100mM EDTA
□配制量100mL
□配制方法 1.称取37.524gNa2EDTA·2H2O,置于200mL烧杯里。
2.加入约800ml的去离子水，充分搅拌。
3.用NaOH调节PH值至8.0（让EDTA完全溶解）。
4.加去离子水将溶液定容至100ml。
5.高压灭菌后，室温保存。