National Institutes for Food and Drug Control
进口复核（方法转移）
他克莫司软膏剂含量测定 供试品溶液制备：
相当于1mg他克莫司(0.1%软膏) 和0.3mg他克莫司(0.03%软膏)
样品内容物, 混匀 准确称取 +12ml四氢呋喃 精密+4.0ml水 1g软膏,臵 移至广口玻璃 小心振摇 50ml量瓶 水浴△至60℃ 瓶(预先冲洗) 慢搅至软膏溶解 精密+4.0ml 冰浴10min 无水乙醇 取出,平衡 至室温 剧烈振摇 30s 过滤
样品内容物, 混匀 准确称取 +12ml四氢呋喃 精密+4.0ml水 1g软膏,臵 移至广口玻璃 小心振摇 50ml量瓶 水浴△至60℃ 瓶(预先冲洗) 慢搅至软膏溶解 精密+4.0ml 冰浴10min 无水乙醇 取出,平衡 至室温 剧烈振摇 30s 过滤
滤膜孔径 ≤0.5 m
混旋液
弃去初滤液
收集滤液
进口质量标准复核 石蜡、凡士林、羊毛脂、矿物油 30g/管
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检验目的 样品基质 样品总量
实例分析
他克莫司软膏剂含量测定 供试品溶液制备：
相当于1mg他克莫司(0.1%软膏) 和0.3mg他克莫司(0.03%软膏)
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方法转移
When validated method are transferred between laboratories the receiving laboratory should demonstrate that it can successfully performed the method. (USP 1226) • 当经过验证的分析方法在实验室之间转移时， 方法接收实验室应该证明其能够成功的操作此方法。
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线性
• 对两种规格的软膏分别考察了浓度范围为其含量测 定浓度的50％－150％之间的线性关系，其中，规格
为30g，0.03％/支的线性方程为：y = 6995488x 64.2, r = 0.9999，浓度范围为：0.0075－ 0.225mg/ml；规格为30g，0.1％/支的线性方程为：
y = 6989786x +105.4, r = 0.9999 ，浓度范围为：
0.025－0.075mg/ml。
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溶液的稳定性
6.00E+05 5.00E+05
峰面积（AU）
4.00E+05 3.00E+05 2.00E+05 1.00E+05 0.00E+00 0 1 2 3 4 6 12 24 48 60 72 时间（hr）
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方法确认适用范围
• 药典各论中收载的分析方法一般不需要再进行
验证。
• 需要进行方法确认。
• 方法确认的内容和具体方法有关，根据试验人
员对方法的理解和经验由试验人员自己确定。
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一个进口复核检验的实例
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实例分析
他克莫司软膏剂含量测定 （进口药品质量标准复核工作）
品种名称 他克莫司软膏剂
规
格
0.1%和0.03% 1g的软膏相当于1mg和0.3mg主成分
System suitability tests
分析方法 分析仪器
Analytical method validation
Analytical instrument qualification
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基本概念
• 方法验证（method validation）
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他克莫司软膏剂含量测定 供试品溶液制备：
相当于1mg他克莫司(0.1%软膏) 和0.3mg他克莫司(0.03%软膏)
样品内容物, 混匀 准确称取 +12ml四氢呋喃 精密+4.0ml水 1g软膏,臵 移至广口玻璃 小心振摇 50ml量瓶 水浴△至60℃ 瓶(预先冲洗) 慢搅至软膏溶解 精密+4.0ml 冰浴10min 无水乙醇 取出,平衡 至室温 剧烈振摇 30s 过滤
室温静臵 4h
供试品溶液 (48h内稳定) NhomakorabeaNational Institutes for Food and Drug Control
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专属性
• 异构体2与与他克莫司主峰分离度 分离度大于2，人工降解溶液 • 他克莫司主峰峰纯度检查 根据他克莫司样品溶液的HPLC光谱图，他克莫司主 峰的纯度角为0.412，比纯度阈值（2.048）小，可 见他克莫司主峰是纯的
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方法确认（WHO定义）
Process by which a pharmacopeial method or validated analytical procedure is demonstrated to be suitable for the analysis to be performed. (WHO定义)
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中国食品药品检定研究院
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检验结果的主要质量要素
质控样品 系统适用性试验
Quality control check samples
• 方法转移（method transfer）
• 方法确认（method verification）
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现
目前存在的问题： • 概念不清 • 无章可依
状
1）ICH Q2A和Q2B的方法主要是对生产企业在
产品分析方法研发的时候进行的全面验证
2）各国药典收载的分析方法验证内容和目的
基本与ICH指导原则一致
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一个进口复核检验的实例
• 他克莫司（Tacrolimus），也称普乐可复，代号 FK506，是一种高效低毒的新型免疫抑制剂。1984 年日本藤泽药品有限公司（Fujisawa Healthcare, Inc.）首次从土壤“筑波链霉菌”的肉汤发酵物中 提取出FK506，其化学结构属23元环大环内酯类抗 生素，类似于红霉素。该药1989年开始用于临床， 1995年经美国FDA批准后开始使用。
滤膜孔径 ≤0.5 m
混旋液
弃去初滤液
收集滤液
室温静臵 4h
供试品溶液 (48h内稳定)
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规格 0.03％
加入对照品的量 80
n 1 2 3
回收率% 100.4 101.1 100.3
平均回收率％ 100.6
分析方法验证、转移和确认
许明哲
中国食品药品检定研究院
中国食品药品检定研究院
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中国食品药品检定研究院
National Institutes for Food and Drug Control
中国食品药品检定研究院
12771
99.2
99.7
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方法验证适用范围
• 新分析方法的建立 全面的验证：专属性、准确度、精密度、线性、检 测线、耐用性…… • 认为有问题需要重新进行验证的方法。
• 主要是药品生产企业的研发部门建立新分析方法时 使用。
小
方法验证
结
方法建立者 (企业研发部门) 建立者和使用者之间
方法转移
进口药品质量标准复核工作 药典质量标准协作起草
方法确认
药典分析方法（药检所）
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方法验证
The documented process by which an analytical procedure (or method) is demonstrated to be suitable for its intended use. • 证明分析方法适用于期望用途的过程，该过程必须 有文件记录。
RSD％ 0.4
100
1
2 3
98.9
99.7 101.9 97.0 97.8
101.3
100.2
1.6
120
1 2
3
98.7