处女蝇的收集
准备好亲本培养管后，每天中午12：00观察记录果 蝇的情况，在观察到发黑的蛹时，将成蝇全部赶去，羽 化后8小时内挑选处女蝇。为了方便起见，建议每天早晨 8：00～9:00将培养瓶内成蝇杀死，次日傍晚17:00～ 19:00对新羽化出的果蝇进行挑选。可以多收集几只，一 组做实验用，一组单独培养观察3天，看是否有卵产生。
P：白眼，小翅，卷刚毛（Xw m sn Xw m sn）三隐 性突变体雌果蝇 红眼，长翅，直刚毛（X+ + + Y 型雄果蝇 ) 野生
果蝇的生活史
果蝇属完全变态昆 虫，其完整的生活周期科 分为卵、幼虫、蛹和成虫4 个明显时期，如右图。 25℃时成蝇一般在交 配1~2天后开始产卵，卵 长约0.5mm，白色椭圆形 ，前端背面有一对触丝使 卵能附在食物或瓶壁上。
果蝇杂交实验方案
组员：郑书钰4 王艺辰3 卢春晓2 吴牡丹1
一、实验目的
1 观察认识果蝇性状。 2 了解果蝇生活史。 3 掌握果蝇的饲养方法。 4 学习杂交实验原理与方法，探索果蝇若干性 状遗传规律。 5 验证基因伴性遗传的规律 6 验证基因连锁与交换规律并计算重组值
二、实验材料
黑腹果蝇Drosophila melanogaster
日期
性状／只 性状／只 性状／只 性状／只
第一天 第二天 第三天 第四天 第五天 第六天..
实验操作 麻醉
成体果蝇好动，应用麻醉进行镜下观察，转瓶等操作。 麻醉动作： 左手小指与无名指夹取麻醉瓶瓶塞，瓶塞处滴加2-3 滴乙醚。取果蝇培养瓶轻拍瓶壁，使果蝇震落在瓶底， 再用左手无名指和中指夹取培养瓶塞，培养瓶口与麻醉 瓶口对接，轻拍上面的培养瓶，将果蝇引入麻醉瓶。迅 速盖塞约半分钟，果蝇行动缓慢。 观察完毕后，用干净毛笔将所需果蝇转移到侧卧的新培 养瓶内，待它清醒，再竖立加塞，防止果蝇粘在培养基 上。
谢谢！
实验可能偏差
1.产卵多，幼虫密度过大，自然选择导致突变型个体生存不 利，死亡率高于野生型 2.杂交亲本弃除不完全（没有在白色幼虫孵出时将亲本全部放 飞，连锁与交换中，部分亲本型子代与亲本表型相同） 3.部分新羽化的果蝇黏死在培养基上，表型无法识别。后者人 为原因破坏了果蝇表型。 4.保证品系的纯正。如发现有从瓶中逃逸者，必须捕杀。经常 对亲本果蝇进行性状检查，排除杂交或突变者。 5.正确记录杂交子代每种类型的个体数。对f1,f2统计，必须及 时进行，避免陆续羽化出的果蝇在培养瓶内交尾后将卵产在 培养基内。实验者要不断进行观察，只要有新羽化出的果蝇 ，就要及时取出，并进行统计和观察。
工具的使用
培养瓶：有培养基，纸盖与瓶口的密封， 毛笔：分突变型和野生型，勿混用 麻醉瓶：干燥、空的培养瓶，突变型和野生型勿混用，用棉塞 文具盒：中的工具保持完整
实验流程与步骤概述
野生型
雌 雄
+++
红眼，长翅，直刚毛
Y
突变型
雌
X
w m sn
X
w m sn
雄
X
w m sn
白眼，小翅，卷刚毛
Y
亲本 突变型
野生型 8天后
突变型
野生型
弃 亲 本
8天后
子一代
处女蝇
突变型
雌果蝇
每隔12h
突变型
野生型 继续培养 12h后羽化
雄果蝇
弃亲本 子一代 收集30对雌雄，转瓶
• •
记录雌雄与眼色 记录雌雄与眼色 • 子二代羽化， 观察
8天后 弃亲本
记录 眼色，翅形，刚毛
小组组员分工
记录表格设计
伴性遗传1 亲代 10只白眼，雌X X
f1 ____只 白眼，雄 Xw Y
w w
10只 红眼，雄 X+Y f1 ___只 红眼，雌 X+Xw
伴性遗传2
记录表格设计
连锁与交换 类别 亲本型 单交换1 单交换2 双交换 基因型
+ + + w m sn
表型
红眼，长翅，直刚毛
白眼，小翅，卷刚毛
观察数
Xw m sn X X Y
合计
连续性状观察
突变型：白眼、小翅、焦刚毛
野生型：红眼、长翅、直刚毛
记录与标记
杂交管的观察与记录
将所需品系的雌蝇与雄蝇放在一起培养，如果需要观察F1代的性状，78天后，需要倒掉亲本，避免F1代雌蝇与父本杂交，影响结果。
果蝇管标记（纸盖）
亲本管：P（+/-），组别：1（上午）-组数，2-（下午）-组数，接种时 间； 杂交管：F1/F2，组别：1（上午）-组数，2-（下午）-组数，接种或杂 交时间；
黑腹果蝇生活史短，繁殖力强，相对性状明 显且可遗传，易于培养，培养成本低，符合上 述遗传学实验研究要求。 同时因其染色体仅4对，基因组仅约165Mb ，并且基因组超过60%的片段同人类疾病基因相 似。
果蝇性别及突变形状的鉴别
认识：红眼与白眼(w)，长翅与小翅(m), 焦刚毛(sn)与直刚毛,雄性与雌性， 性梳和平衡棍。
果蝇的完全变态发育： 卵（embryo）、幼虫（instar larva）、蛹 （pupa）、成虫（adult）
果蝇的生活史
从蛹中羽化出 的果蝇8~12小时候即 可交配，交配后精子 可以在雌蝇的受精囊 中储存一段时间，然 后释放到输卵管中。 所以杂交试验中母本 必须使用未交配雌蝇 。
为什么选择黑腹果蝇？
果蝇的完全变态发育： 卵（embryo）、幼虫（instar larva）、蛹 （pupa）、成虫（adult）
果蝇的生活史
受精卵24小时内 便孵化成幼虫，幼虫经两 次蜕皮(分别为一龄幼虫， 二龄幼虫）成为三龄幼虫 ，三龄幼虫体长可达45mm，用肉眼观察可见其 一端稍尖，上有一黑色钩 状口器，幼虫生活约4天左 右开始结蛹并停止摄食， 爬到相对干燥的表面，逐 渐形成菱形的蛹。